商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義 CS(EC 2.3.3.1)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體基質(zhì)中,是三羧酸循環(huán)第一個(gè)限速酶,是三羧酸循環(huán)主要調(diào)控位點(diǎn)之一。 測(cè)定原理 CS催化乙酰CoA和草酰乙酸產(chǎn)生檸檬酰輔meiA,進(jìn)一步水解產(chǎn)生檸檬酸;該反應(yīng)促使無(wú)色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB,在 412nm處有特征吸光值。 需自備的儀器和用品 可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)英文名:MAP1LC3B ELISA Kit磷化β抑制蛋白1抗體包裝1g
微管蛋白β3(TUBB3)英文名:TUBB3 ELISA Kit磷化有絲分裂激A抗體包裝25g
網(wǎng)膜(omentin)英文名:omentin ELISA Kit磷化APS抗體包裝5g
晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)英文名:AGEs ELISA Kit有絲分裂激A抗體包裝1g
脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)英文名:DPD ELISA Kit干擾誘導(dǎo)蛋白AIM2抗體包裝25g
脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)英文名:DPD ELISA Kit通道蛋白-2抗體包裝5g
脫氫表雄硫酯(DHEA-S)英文名:DHEA-S ELISA Kit腫瘤抑制基因ABI2/精酪蛋白激結(jié)合蛋白抗體包裝25ml
脫氫表雄S7(DHEA-S7)英文名:DHEA-S7 ELISA KitADP核糖基化因子樣11抗體包裝5ml
脫氫表雄(DHEA)英文名:DHEA ELISA KitARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體包裝1g
褪黑(MT)英文名:MT ELISA KitARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體包裝5g
突觸融合蛋白2(STX2)英文名:STX2 ELISA KitARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX2抗體包裝25g
突觸融合蛋白1A(STX1A)英文名:STX1A ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白10抗體包裝25g
透明質(zhì)結(jié)合蛋白(HABP)英文名:HABP ELISA Kit?;Y(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體包裝5g
透明質(zhì)(HA)英文名:HA ELISA Kit基?;?抗體包裝25g
銅藍(lán)蛋白(CP/CER)英文名:CP/CER ELISA Kit脂肪甘油三酯脂抗體包裝5g
脂聯(lián)受體2抗體激肽釋放3(KLK3)Torin 2 是一種 mTOR 抑制劑,抑制內(nèi) mTOR 活性,EC50 為 0.25 nM,比作用于 PI3K (EC50: 200 nM) 選擇性高
檸檬酸合酶(CS)測(cè)試盒50管/24樣釀酒酵母 N-Boc-3-甲基哌Twist相關(guān)蛋白1Elisa
黃青霉 2-甲基乙酰苯Twist轉(zhuǎn)錄因子Elisa
齒孢青霉 3-甲基二苯T亞群Elisa
枯草芽孢桿 3-乙基氨基-4-T亞群Elisa
釀酒酵母 4--2-芐基T球蛋白粘蛋白分子3Elisa
玫瑰小雙孢玫瑰亞種 2,5-二甲氧基苯乙酮UL16結(jié)合蛋白-1Elisa
彩色豆馬勃 鄰基UL16結(jié)合蛋白-2Elisa
新疆薄層 4-二苯甲UL16結(jié)合蛋白-3Elisa
異常海桿狀 2,4-二溴苯Vasorin;SLIT-like 2Elisa
異常畢赤酵母 (S)-1-苯基-1,2,3,4-四氫異喹啉WNT1可誘導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑蛋白1Elisa
海膽橙色小單孢 N,N-二甲酰二乙基縮X盒結(jié)合蛋白1Elisa
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 4-酸三苯X-連鎖凋亡抑制蛋白Elisa
CCTCC AB 2012479 3-三氟甲基吡唑Yes關(guān)聯(lián)蛋白Elisa
熱帶假絲酵母 2,6-二芐ZBED3Elisa
牛邊緣無(wú)漿體(鎮(zhèn)原株) 2,5-二羥基苯磺酸鈣一水合物ZNF3基因Elisa