詳細介紹
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100管/96樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321209 |
商品介紹:
測定意義 SSS(EC 2.4.1.21)通常以游離態(tài)存在于質(zhì)體基質(zhì)中,催化淀粉鏈延長,主要負責支鏈淀粉的合成。 測定原理 SSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應,將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上,同時生成ADP,在反應體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,NADPH生成量與前一步反應中ADP生成量呈正比,340nm下測定NADPH增加量即可計算SSS活性。 需自備的的儀器和用品 紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
3,29-二酰基栝樓仁三(標準品)英文名: Fmoc-Ala-OH瘤病調(diào)控因子1抗體(鋅指蛋白395)包裝5g
3,3'-二基鞣花-4'-O-葡萄糖苷英文名: Fmoc-Phe-OH人類狀瘤病18 E6單克抗體包裝1g
3,6-二芥子?;崽牵藴势罚┯⑽拿?Fmoc-Val-OH異質(zhì)核糖核蛋白F抗體包裝25g
3-(3-羥基基)(標準品)英文名: Fmoc-Asn(Trt)-OH異質(zhì)核糖核蛋白K抗體包裝5g
3-Deoxyaconitine英文名: Fmoc-Lys(Z)-OH異質(zhì)核糖核蛋白L抗體包裝5g
3-O-Acetyl-16α-hydroxytrame...英文名: Fmoc-Lys-OH·HClHER2受體單克抗體包裝1g
3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李...英文名: Oxyresveratrol癌分化因子P45抗體 Heregulinβ包裝5g
3-O-乙?;?16α-羥基松苓新英文名: Oxyresveratrol肝脂抗體包裝1g
3’-氧基芹菜苷;柯伊-7-O-葡萄糖-2-O-...英文名: Acetyl-resveratrol磷化組蛋白去乙?;?抗體包裝250mg
3β,7β,12β-三羥基-11,15-二羰基-羊毛甾...英文名: Acetyl-resveratrol解旋樣轉(zhuǎn)錄因子抗體包裝1g
3β,7β,15β-三羥基-11-羰基-羊毛甾烷-8-...英文名: Fmoc-Lys(Mtt)-OH三羥基三基合成2抗體包裝250mg
3β-乙酰氧基-7,25-甘遂二烯-24(R)-(標...英文名: Fmoc-Thr(Bzl)-OH人類白抗原A抗體包裝1g
4'-去鬼臼英文名: Fmoc-Lys-OH羥類固脫氫17β2抗體包裝250mg
4'-去氧基表鬼臼(標準品)英文名: Fmoc-L-aspartic acid β-benzyl ester羥類固脫氫17β-HSD抗體包裝5g
4-β-D-葡萄糖基-1,3,7-三羥基呫噸英文名: Fmoc-Asp(OH)-OtBu人肝單克抗體/肝特異性抗原抗體包裝1g
桑黃Phellinus│linteus (Berk. & M.A. Curtis) Teng 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)磷化腺苷活化蛋白激試劑盒N-基野靛堿;Caulophyllin
鮑曼不動桿菌Acinetobacter│baumanii 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR磷化外信號調(diào)節(jié)激試劑盒肌; Inositol
溜曲霉Aspergillus│tamarii 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品磷化糖原合成激3試劑盒加蘭他敏;Galanthamine
可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒100管/96樣Lactococcus 5-溴-2-甲基-4-內(nèi)切-β-1,4-葡聚糖Elisa
棒曲霉 3-甲基-3-苯基縮水甘油酸乙酯(異構(gòu)體混合物)NADP依賴性甘油-3-磷酸脫氫Elisa
香茅假單胞 氨基鈉海藻糖-6-磷酸合成Elisa
放射形根瘤 酸葡萄糖-6-磷酸Elisa
孤島鹽單胞 硫酸亞鐵七水合物葡萄糖-1-磷酸Elisa
海南小短桿 硝酸鐵(III) 九水合物Elisa
梾木生殼針孢 2,2-二苯基烷磷酸葡萄糖變位Elisa
植物乳桿植物亞種 3-羥基谷氨酰tRNA還原Elisa
枯草芽孢桿 桂酸異酯5-氨基乙酰酸合成Elisa
燼灰紅鏈霉果糖發(fā)酵亞種 磷酸鋅酮酸Elisa
賴芽胞桿屬 3-溴-4-氟苯甲蕓苔內(nèi)酯Elisa
根瘤 3-溴-4-氟苯甲脂肪酸合成Elisa
木蹄層孔 氟化銀(I)乙脫氫Elisa
黑木耳 化錳乳酸脫氫Elisa
植物乳桿 -3-羧酸乙酯酮酸脫羧Elisa