商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: HYP是機(jī)體膠原蛋白主要成分之一,膠原蛋白大多分布于皮膚、腱、軟骨和血管等,因此HYP含量是反映膠原組織代謝及纖維化程度的一項(xiàng)重要指標(biāo)。 測(cè)定原理: 樣品經(jīng)水解產(chǎn)生游離的HYP,進(jìn)一步被氯胺T氧化,氧化產(chǎn)物與對(duì)二甲氨基苯j(luò)ia醛反應(yīng),產(chǎn)生紅色化合物,在560nm處有特征吸收峰。通過測(cè)定樣品水解液560nm吸光值,可計(jì)算HYP含量。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器: 天平、烘箱、玻璃管、離心機(jī)、水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、6mol/L鹽酸和蒸餾水。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,快速、簡(jiǎn)便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
培曲塞(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Methazolamide防御β2/Defensin β2抗體包裝5g
噴昔洛韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ziprasidone多巴受體相互作用蛋白5抗體包裝1g
匹多莫德(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Seratrodast性發(fā)育轉(zhuǎn)錄因子蛋白DMO抗體包裝200mg
匹伐他鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Metolazone無胸腺癥關(guān)鍵蛋白6樣抗體(迪格奧爾格綜合征)包裝1g
匹莫丹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Metolazone軸絲動(dòng)力蛋白10抗體包裝5g
蘋果舒尼替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Cediranib Maleate D型天冬抗體包裝1g
撲米(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: SitagliptinDYDC1蛋白抗體包裝5g
撲熱息痛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Vildagliptin二氫嘧啶抗體包裝1g
葡內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Vildagliptin脫磷結(jié)構(gòu)域蛋白抗體包裝250mg
葡鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Acetylsalicylic acidDCST1蛋白抗體包裝25g
葡萄糖鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Acetylsalicylic acidDCUN1D4蛋白抗體包裝5g
葡萄糖鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Orlistat(Fermentation)脫氧輔合蛋白抗體包裝10g
葡萄糖鋅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Orlistat(Fermentation)短鏈脫氫/還原家族4樣2蛋白抗體包裝1g
普伐他丁鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Nicardipine hydrochlorideDDRGK1蛋白抗體包裝5MG
普伐他四基?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名: Nicardipine hydrochlorideDENND2A蛋白抗體包裝1ml
運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單孢菌Zymomonas│mobilis 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP,BR戊型肝炎病抗體試劑盒3,4,5-三咖啡??鼘?3,4,5-
食烷菌Alcanivorax│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,培養(yǎng)級(jí)戊糖試劑盒三七皂苷Fe;Notoginseng t
ATCC486=BCRC14864=CIP82.11=DSM20112=KCTC1370=LMG16695=NBRC12680資源名稱: 雙氮纖維單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%,EP6,BR,可用于培養(yǎng)舞蹈病蛋白相互作用蛋白1試劑盒黃皮;Kranjin
羥脯氨酸(HYP)測(cè)試盒100管/96樣枯草芽孢桿 離子交換樹脂白介2受體α鏈Elisa
多粘類芽孢桿 二苯基巴腙α突觸核蛋白-寡聚體Elisa
圍小叢殼 taerythritol Tetra(Mercaptoac多聚蛋白1Elisa
牡丹枝孢(牡丹葉霉?。?/span> 水飛薊(混合物)α1-B-糖蛋白Elisa
紅酵母屬 聚乙烯吡咯烷酮G蛋白結(jié)合蛋白5Elisa
加拿大色鹽桿 甘油三油酸酯甘露聚糖結(jié)合凝集絲肽-2Elisa
小鏈霉 載脂蛋白HElisa
赭色擲孢酵母 硫代硫酸鈉生精蛋白IElisa
大腸桿屬 硫酸鎳七水合物HLA-DRB5Elisa
釀酒酵母 二氫酮受體酪激Elisa
木糖氧化無色桿 蛻皮胰羧肽BElisa
栗疫 XAD16離子型大孔樹脂乙酰受體Elisa
*瓜果腐霉 N,N-雙[2-]-2-基乙烷磺酸巖藻糖基轉(zhuǎn)移2Elisa
香菇 5'-O-(4,4-二甲氧基三苯甲基)-2'-O-[(叔丁基)二甲基硅基]尿苷-3'-(2-基乙基抗內(nèi)膜抗體Elisa
木生炭角 TFA-aa-dU抗滋養(yǎng)膜抗體Elisa