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詳細介紹
公司產(chǎn)品僅供科研使用：
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
微量法 | 100管/96樣 | AS6321147 |
商品介紹：
商品介紹 測定意義： CA是線粒體三羧酸循環(huán)的第一個中間產(chǎn)物，由檸檬酸合酶催化乙酰CoA與草酰乙酸合成，其含量是三羧酸循環(huán)強度的主要指標之一。 配合測定丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性、乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量，其中（1）丙酮酸含量和丙酮酸脫氫酶活性變化可以反映糖酵解進行程度，（2）綜合分析丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性和乙酰CoA含量變化可以反映脂肪酸β-氧化途徑提供的乙酰CoA情況，（3）乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量變化可以反映三羧酸循環(huán)進行狀況。 測定原理： CA在檸檬酸裂解酶的作用下，生成α-酮酸（草酰乙酸）；在弱酸性條件下，α-酮酸進一步與苯肼反應(yīng)，生成相應(yīng)的α-酮酸苯腙；α-酮酸苯腙在330nm處有吸收峰，該波長下吸光度的變化程度可反映出CA的含量。 自備儀器和用品： 可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水。 |
常見樣本處理方法：
1、血清（漿）樣品：直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備： 細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液） ，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g） ：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
產(chǎn)品優(yōu)點如下：
1、快速簡便：雙試劑，直接操作，快速、簡便。
2、取樣量微：需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高：檢測線0.5U/ml，是羥胺法5倍，鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好：批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%，試劑盒2～8℃存放3個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗： X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強。且特異性強，不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
白頭翁皂苷E英文名： Nickel (II) fluoride tetrahydrate上皮膜蛋白3抗體包裝5g
白頭翁皂苷E-1英文名： Silicon (IV) oxide膜蛋白EVC2抗體包裝1g
白頭翁皂苷E-2英文名： Strontium fluoride哺乳動物室管膜相關(guān)蛋白1抗體包裝5g
白頭翁皂苷E-3英文名： Syringaldehyde內(nèi)皮粘附分子抗體包裝10g
白土苓(短柱肖菝契)（標準品）英文名： Tetrazolium violet上皮有絲分裂蛋白抗體包裝50g
白土苓(華南肖菝葜)（標準品）英文名： 2-MethylindoleEmerin蛋白抗體包裝25g
白薇（標準品）英文名： Aluminum ammonium sulfate, dodecahydrate外信號調(diào)節(jié)激5抗體包裝5g
白鮮堿(標準品)英文名： AMP buffer concentrate磷/磷二酯家族成員5抗體包裝1g
白鮮皮（標準品）英文名： Benzimidazole早期生長反應(yīng)蛋白2抗體包裝25g
白楊(標準品）英文名： Carboxypeptidase B磷化雌激受體β抗體包裝5g
白楊-7-O-龍膽二糖苷英文名： Cobalt (II) carbonate, hydrate乙激β抗體包裝1g
白英（標準品）英文名： dTDP微管相關(guān)末端結(jié)合蛋白2抗體包裝5g
白芷（標準品）英文名： Galactose oxidase減數(shù)分裂內(nèi)切EME1抗體包裝1g
百部(對葉百部)（標準品）英文名： Iron (II) oxalate, dihydrate延伸突觸蛋白2抗體包裝25g
百部（直立百部）（標準品）英文名： Lead (II) chloride延伸突觸蛋白1抗體包裝5g
40044=ATCC23908=CBS804.68=IFO12862=ISP資源名稱: 脆弱鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR通道蛋白4抗體試劑盒;Ginsenoside
出芽短梗霉Aureobasidium│pullulans 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品通道蛋白3試劑盒人參皂苷RD;Ginsenoside R
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR痘帶狀皰疹病IgM試劑盒人參皂苷RC;Ginsenoside R
線粒體檸檬酸(MCA）含量測試盒100管/96樣弗雷德里克斯堡假單胞 3--2-吡甲酸甲酯蛋白聚糖Elisa
小奧德蘑 1,3-雙(2-異基-2-基)苯堿性成纖維生長因子抗體Elisa
三骨菇 反式-4-(叔丁氧羰基氨基)環(huán)己基羧酸甘油二酯Elisa
桔青霉 4-氮雜-3-甲過氧化物體Elisa
喜寒犁頭霉 2-甲基丁酸-3-甲基丁酯核內(nèi)蛋白Elisa
胡椒枯萎病 富馬酸單甲酯結(jié)核桿抗原Elisa
短小芽孢桿 DL-二硫蘇糖銅鋅過氧化物岐化Elisa
筆狀地霉 2-甲基嗎啉趨化因子C-C-基元受體6Elisa
大腸埃希 亮叔丁酯鹽酸鹽磷酸化肝生長因子受體Elisa
鏈霉 咪唑并[1,2-a]吡啶分泌型堿性磷酸Elisa
大腸埃希氏 N-甲基-4-溴苯甲酰Smads2Elisa
黃芪葉桿 3-溴-4-氟Smads7Elisa
紅緣擬層孔 苯并惡唑糖蛋白AElisa
運動張樹政氏 乳糖酸鈉白蛋白抗體Elisa
奇異變形桿49005 鹽酸左電壓依賴性陰離子通道蛋白1Elisa
實驗方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
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