詳細介紹
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產品規(guī)格 | 100管/48樣 |
產品貨號 | AS6321130 |
商品介紹:
測定意義:Ca++ Mg++-ATP酶廣泛分布于植物、動物、微生物和細胞中,可催化ATP水解生成ADP和無機磷。測定原理:根據Ca++ Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及無機磷,通過測定無機磷的量來確定ATP酶活性高低。需自備的儀器和用品:可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
鹽(標準品)英文名: Roxatidine acetate HCl動力蛋白激活蛋白亞基3抗體包裝500mg
鹽昂丹司瓊(標準品)英文名: Pemetrexed動力蛋白激活蛋白6抗體包裝1g
鹽奧洛他定(標準品)英文名: Pemetrexed脫2抗體包裝25g
鹽奧昔布寧(標準品)英文名: sulphadoxine磷化DNA依賴性蛋白激抗體包裝5g
鹽奧昔布寧(標準品)英文名: sulphadoxine防御α4抗體包裝1g
鹽貝凡洛爾(標準品)英文名: Penicillin G, sodium salt DNA損傷結合蛋白1抗體包裝25g
鹽貝那普/那普(標準品)英文名: Penicillin G, sodium salt DNA損傷結合蛋白2抗體包裝5g
鹽貝那替(標準品)英文名: Mitiglinide calcium HydrateCD299抗體包裝25g
鹽貝尼地平(標準品)英文名: Mitiglinide calcium HydrateC型凝集結構域家族4成員A抗體包裝5g
鹽倍他司(標準品)英文名: PropylthiouracilC型凝集結構域家族6成員A抗體包裝25g
鹽達莫司(標準品)英文名: Fluorometholone AcetateB淋巴銜接分子DAPP1抗體包裝5g
鹽海明(標準品)英文名: Pentabromophenyl etherDNA1樣蛋白1抗體包裝100ml
鹽海索(標準品)英文名: 3-Amino-3-azabicyclo[3.3.0]octane hydrochloride抗菌蛋白DCD抗體包裝25g
鹽環(huán)壬酯(標準品)英文名: Kasugamycin肌動蛋白解聚因子抗體包裝5g
鹽環(huán)壬酯雜質(標準品)英文名: Tulathromycin A甘油二酯酰基轉移2抗體包裝25g
野油菜黃單胞菌Xanthomonas│campestris 質量規(guī)格:>98%,一合物USP,BR拓樸異構Ⅱ試劑盒山柰-3-O-蕓香糖苷;Kaempfe
: I-3北京制藥廠資源名稱: 氧化葡糖桿菌 質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品脫氧皮質試劑盒;Kaempferide
黑曲霉Aspergillus│niger 質量規(guī)格:>98%,BP,BR,可用于培養(yǎng)脫氧尿三磷試劑盒仙苷;Narcissoside
Ca++Mg++ ——ATP酶測試盒100管/48樣釀酒酵母 2-乙氧烯14-3-3thetaElisa
異常漢遜酵母 異基乙烯基14-3-3zetaElisa
地中海中慢生根瘤* N-(2-乙基)-N-苯轉錄因子NF-E2相關因子2Elisa
慢生根瘤 甲磺酸異酯TitinElisa
青黃褐硬皮馬勃 癸二酰肼抗通透性增高蛋白抗體Elisa
釀酒酵母 5-硝基糠二乙酸酯組蛋白乙?;疕2Elisa
膠孢 N-乙基-N-苯組蛋白乙酰化H3Elisa
多主葡萄殼 3-(N,N-二甲基氨基)烯酸乙酯α3神經節(jié)乙酰受體抗體Elisa
蜜蜂生球擬酵母 丁二酸二異酯甲腺原脫ⅠElisa
米川黃桿 乙酸乙酯甲腺原脫ⅡElisa
滑假絲酵母 1-丁基十氫萘25羥基維生D-1α羥化,線粒體Elisa
慢生根瘤 5-溴-2-異酸酯1,25-二羥維生D(3)24-羥化,線粒體Elisa
黃赭色鏈霉 2-羥基-4-氧雜三環(huán)[4,2,1,0 37]-5-壬酮可溶性CD23Elisa
米根霉 2,3,5,6-四氟對苯二甲抗含干擾誘導解旋C域蛋白1抗體Elisa
食砜節(jié)桿 4-吡啶乙鹽酸鹽腦型肌酸激Elisa