哺乳動(dòng)物基因組DNA抽提試劑盒公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：Anti-PROCR Antibody人幽門(mén)螺桿素相關(guān)基因蛋白A-IgG
Anti-PRPF31 Antibody大鼠P53
Anti-PRPF19 Antibody人粘蛋白/粘液素7
Anti-PRPF39 Antibody大鼠環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷
Anti-PRPF39 Antibody小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1
Anti-PRPH Antibody大鼠

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢(xún)并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類(lèi)：核酸提取

儲(chǔ)存條件：—20℃,12個(gè)月

用途：采用了經(jīng)典的蛋白酶K處理法,可以抽提到100-150kb以上的基因組DNA

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

葡萄生擬莖點(diǎn)霉菌肌肉特異性環(huán)指蛋白3抗體Human NUP50 ELISA Kit山梨脫氫(SDH)

芽孢桿菌屬磷化原癌基因c-Met相關(guān)酪激抗體Human NUP205 ELISA Kit沙眼衣原體抗原(CT)

釀酒酵母絲裂原活化蛋白激13抗體Human NUDT6 ELISA Kit沙眼衣原體抗體(CT)

釀酒酵母多纖毛蛋白抗體Human NUP53 ELISA Kit沙眼衣原體蛋白樣活性因子(CPAF)

枯草芽孢桿菌肌管相關(guān)蛋白8抗體Human NUMBL ELISA Kit沙眼衣原體(CT)

吉氏芽孢桿菌巨噬甘露糖受體2抗體Human PYGB(Glycogen phosphorylase, brain form) ELISA Kit沙漠猬因子(DHH)

不動(dòng)桿菌周期G1的相互作用蛋白抗體Human NUDT8 ELISA Kit殺傷凝集樣受體(KLR)

芽胞桿菌主導(dǎo)控制樣蛋白3抗體Human NUP107 ELISA Kit殺傷免疫球蛋白樣受體(KIR)

枯草芽孢桿菌斯氏亞種絲裂原活化蛋白激MKK3抗體Human NUP133 ELISA Kit殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)

脫葉鏈霉菌MYSM1抗體Human NUP160 ELISA Kit殺菌肽B(CecB)

新月彎孢單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體Human F11(Coagulation factor XI) ELISA Kit殺菌肽(cecropin)

巴斯德畢赤酵母微管相關(guān)蛋白1A抗體Human NUP153 ELISA Kit色上皮衍生因子(PEDF)

漢遜德巴酵母中期因子/肝結(jié)合生長(zhǎng)因子抗體Human NUP50 ELISA Kit色酰tRNA合成(WARS)

米曲霉鹽皮質(zhì)激受體抗體Human NUP205 ELISA Kit色羥化(TPH)

類(lèi)馬鏈球菌促黑激α抗體Human NUDT6 ELISA Kit三角形四肽重復(fù)蛋白1(TTC1/TPR1)

桃中田殼小圓孢菌Myc基因相關(guān)X因子抗體Human NUP53 ELISA Kit狀腺原(T3)

ATCC53103資源名稱(chēng): 鼠李糖乳桿菌 質(zhì)量規(guī)格：螯合劑五味子乙

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：螯合劑五味子酯

銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)五味子酯乙
哺乳動(dòng)物基因組DNA抽提試劑盒MDC/CCL22(Mouse Macrophage-Derived Chemokine) ELISA Kit  小鼠巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子規(guī)格： 48T

RANTES/CCL5(Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) ELISA Kit  小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子規(guī)格： 48T

MIP-2(Mouse Macrophage Inflammatory Protein 2) ELISA Kit  小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2規(guī)格： 48T

OT(Mouse oxytocin) ELISA Kit  小鼠催產(chǎn)su規(guī)格： 48T

MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Mouse macrophage inflammatory protein 3 Beta) ELISA Kit  小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。