詳細介紹
商品介紹:
測定意義LPS又稱甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于各種生物中。對于人來說,主要是胰脂肪酶,分解食物中脂肪形成單酰甘油和游離脂肪酸,被人體吸收并重新合成脂肪。外源性脂質(zhì)攝入過多是引發(fā)肥胖的重要原因,血清中LPS的異常增高常見于胰腺炎和胰腺癌。測定原理LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用銅皂法測定脂肪酸生成速率,即可計算LPS活性。實驗中所需儀器和用品甲苯、無水乙醇、研缽、冰、臺式離心機、震蕩混勻器、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍和雙蒸水。 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321181 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內(nèi),棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
去斑蝥鈉(標準品)英文名: 1-Tridecene γ-微管蛋白GCP4抗體包裝5g
去堿鹽鹽(標準品)英文名: 1-Tetradeceneγ-微管蛋白GCP6抗體包裝500g
去氧基姜黃英文名: 1-Pentadeceneβ-葡萄糖苷1抗體包裝100ml
去氧基姜黃(標準品)英文名: 1-Hexadecene甘裂解系統(tǒng)H蛋白抗體包裝25ml
去氧基麻醉椒英文名: 1-Heptadecene15號染色體開放閱讀框58抗體包裝25g
去異波爾定(標準品)英文名: 1-Nonadecene淀粉結(jié)合域蛋白1抗體包裝5g
去澤木(標準品)英文名: 2-Bromo-4'-phenylacetophenone延伸因子G1抗體包裝100g
去芹菜糖桔梗皂苷D(標準品)英文名: Dabsyl Chloride β葡萄糖苷2抗體包裝25g
去芹糖桔梗皂苷D3英文名: O-4-Nitrobenzylhydroxylamine Hydrochlorideβ葡萄糖苷3抗體包裝100g
去氫厄弗英文名: 7-Acetoxy-4-bromomethylcoumarin膠質(zhì)母瘤相關(guān)蛋白GBAS抗體包裝1g
去氫二異丁香(標準品)英文名: Br-Mmc (=4-Bromomethyl-7-methoxycoumarin)紅糖苷α1抗體包裝25g
去氫茯苓英文名: 3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one G蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
去氫鉤藤堿(標準品)英文名: 4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin G蛋白結(jié)合蛋白4抗體包裝1g
去氫毛鉤藤堿英文名: DBD-CO-Hz [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(N-hydrazinocarbonylmethyl-N-methyl)amino-2,1,3-benzoxadiazole] G蛋白結(jié)合蛋白6體包裝25g
去氫木香內(nèi)酯(標準品)英文名: NBD-CO-Hz [=4-(N-Hydrazinocarbonylmethyl-N-methylamino)-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole] 鳥苷環(huán)化激活蛋白1抗體包裝5g
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標準品,一合物凝溶膠蛋白試劑盒木蝴蝶苷A;Oroxin A
皺蓋假芝(血芝)Amauroderma│rude 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,一合物凝聚試劑盒漏蘆甾;Rhapontisterone
斜臥青霉Penicillium│decumbens 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP31,可用于培養(yǎng)檸檬合成,線粒體試劑盒羅漢果甜IV;Mogroside IV
脂肪酶(LPS)測試盒50管/48樣暗蓋淡鵝膏 1,3-二甲基尿酸彈性蛋白抑制劑Elisa
巨大芽胞桿 3-氨基-2-羥基吡啶甲胎蛋白異質(zhì)體Elisa
耐久腸球 2-氨基-5-PSD95Elisa
塔賓曲霉 4-溴叔丁酯核心結(jié)合因子β亞基Elisa
分枝節(jié)桿 Chloro[(S)-(-)-5,5'-bis(diphenylphosphino)-4,4'-bi磷酸化蛋白酪激JAK-2Elisa
淺天青鏈霉 3-溴-1-苯并髓觸發(fā)受體2Elisa
Sporosarcina 4-乙酸乙酯白血病抑制因子受體Elisa
盤長孢狀盤孢 米索前列固調(diào)節(jié)因子結(jié)合蛋白2Elisa
淺白隱球酵母 8-溴-4-羥基-2-三氟甲基喹啉周期I2Elisa
豌豆根瘤 甲基4-乙酰-2-乙氧基苯甲脂周期蛋白E2Elisa
棉阿舒囊霉 6-溴-1-甲基吲唑C反應(yīng)蛋白單體Elisa
Lactobacillus brevis 3-溴-2-三氟雙烯雌Elisa
檸檬色短小桿 2-巰基-S-硫代苯甲酰乙酸己烷雌Elisa
游動放線* 酸-S-糠基硫代酯假尿苷酸合1Elisa
格氏嗜鹽堿桿 2-氨基-4-苯甲酰β-羥基類固脫氫2Elisa
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。