詳細介紹
商品介紹:
商品介紹 測定意義: CA是線粒體三羧酸循環(huán)的第一個中間產(chǎn)物,由檸檬酸合酶催化乙酰CoA與草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循環(huán)強度的主要指標之一。 配合測定丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性、乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脫氫酶活性變化可以反映糖酵解進行程度,(2)綜合分析丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性和乙酰CoA含量變化可以反映脂肪酸β-氧化途徑提供的乙酰CoA情況,(3)乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量變化可以反映三羧酸循環(huán)進行狀況。 測定原理: CA在檸檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性條件下,α-酮酸進一步與苯肼反應(yīng),生成相應(yīng)的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm處有吸收峰,該波長下吸光度的變化程度可反映出CA的含量。 自備儀器和用品: 可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL石英比色皿、研缽和蒸餾水。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
紫外分光光度法 | 25管/24樣 | AS6321147 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產(chǎn)品優(yōu)點如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗: X =102.3%。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。且特異性強,不受類SOD物質(zhì)的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
寶藿苷V英文名: Barium carbonate內(nèi)皮-1抗體包裝25ml
寶藿苷VII英文名: Benzamide絲裂原活化蛋白激4抗體包裝5ml
杯莧甾(標準品)英文名: Biebrich scarlet埃茲蛋白抗體包裝1g
北蒼術(shù)(標準品)英文名: Calcium citrate, tetrahydrate轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體包裝100g
北豆根(標準品)英文名: Cesium sulfate內(nèi)皮-1單克抗體包裝25g
北芹英文名: Copper sheet腸道病71型抗體包裝5g
北芹(標準品)英文名: Copper(I) chloride抗志賀大腸桿菌O139抗體(仔豬腫病志賀大腸桿菌O139)包裝25g
北五加皮苷M;杠柳苷M英文名: Copper (I) iodide表皮生長因子抗體包裝5g
北五加皮苷N;杠柳苷N英文名: dGDP, 2'-Deoxyguanosine-5'-Diphosphate disodium salt表皮生長因子抗體包裝1g
貝萼皂苷元英文名: D-Glucuronic acid, sodium salt, monohydrate磷化真核翻譯延長因子2抗體包裝250mg
貝萼皂苷元-3- O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名: Ficol 70真核延伸因子激2抗體包裝1g
貝母花(標準品)英文名: Guanidine carbonate磷化真核延伸因子激2抗體包裝1g
貝母(標準品)英文名: Hydrazine hydrochloride真核啟動因子2α抗體(eIFα2)包裝1g
貝母乙(標準品)英文名: Iron(III) sulfate, hydrate磷化一氧化氮合成3(內(nèi)皮型)抗體包裝250mg
貝母辛(標準品)英文名: Methyl gallate真核翻譯延長因子2抗體包裝5g
擬囊體側(cè)耳Pleurotus│cystidiosus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品輸血傳播病/辛型肝炎病抗原鞣花;Ellagic acid
土曲霉Aspergillus│terreus Thom 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR輸血傳播病試劑盒肉桂;Cinnamic acid
ATCC15835資源名稱: 棘孢小單孢菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品輸卵管特異性糖蛋白試劑盒染料木苷;Genistin
線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒25管/24樣紅根須腹 4-羥基喹啉-3-甲酸乙酯胱Elisa
南類芽孢桿 肉桂基透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白2Elisa
芽孢桿 5-(二乙氨基)戊基乙巨噬來源的趨化因子Elisa
米串珠鐮孢 N,N-二甲基烯酰單核趨化蛋白4Elisa
灰平鏈霉 (R)-(+)-α-[(3-甲氧基-1-甲基-3-氧代-1-烯基)氨基]-1,4-環(huán)己二烯-1-乙馬尿酸Elisa
需鈉弧 D-(-)-2-(2,5-二氫苯基)甘Smad同源物1Elisa
油菜核病 抗氧化劑THP-24Smad同源物3Elisa
枯草芽孢桿 5-溴-2-甲氧基-4-甲基-3-硝基吡啶Smad同源物7Elisa
圍小叢殼 (R)-2-氨基-3-(2-溴苯基)酸裂殖子表面蛋白1Elisa
平菇—法無孢 異氟血管緊張Elisa
枯草芽孢桿 2-溴-4-甲苯甲狀腺球蛋白Elisa
香菇 苯并咪唑-5-甲酸甲酯鼠李糖苷Elisa
澳型核果褐腐病 N4-苯甲?;奏な罄钐擒誆lisa
檸檬色小單孢 6-氟-2-甲基Ⅲ型前膠原氨基端肽Elisa
Sphingobacterium composti 尼泊金十二酯軟骨間層蛋白2Elisa