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BPTE電泳緩沖液

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更新時間:2022-08-30 09:16:53瀏覽次數(shù):479

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
貨號 FS-R7297 應用領域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R7297
BPTE電泳緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品:Anti-OR52D1 Antibody小鼠巨噬來源的趨化因子
Anti-OR52E1 Antibody人粒巨噬集落激因子
Anti-OR52E1 Antibody大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯
Anti-OR52E2 Antibody小鼠正常T表達和因子
Anti-OR52E4 Antibody人膠質系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子
Anti-OR52E2

詳細介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

BPTE電泳緩沖液

500ml

FS-R7297

產(chǎn)品分類:核酸電泳

儲存條件:室溫,12個月

用途:RNA電泳

注意事項:主要由PIPES、Tris、EDTA、雙蒸水等組成,用DEPC處理,其zui終PH值約為6.5。

63.jpg 

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

Luteolibacter甲型流感病血凝抗體(H2N2)Human SGK1 ELISA Kit大鼠 Klotho 免疫試劑盒

小葉相思根瘤菌人巨病UL49蛋白抗體Human SFI1 ELISA Kit倉鼠

類諾氏菌屬人類白抗原E抗體Human SGEF ELISA Kit倉鼠組織蛋白K(cath-K)免疫試劑盒

梭菌屬E3連接抑制受體3抗體Human SF4 ELISA Kit倉鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒

蘇云金芽胞桿菌亞亞種P1抗體Human SFMBT2 ELISA Kit倉鼠脂氧A4(LXA4)免疫試劑盒

叢毛紅曲肝生長因子抗體Human SFPQ ELISA Kit倉鼠脂聯(lián),含C1Q和膠原域(ADIPOQ)免疫試劑盒

東方伊薩酵母組蛋白去乙?;?/span>2抗體Human SFRS14 ELISA Kit倉鼠載脂蛋白B(APOB)免疫試劑盒

釀酒酵母人乙肝病Large S蛋白抗體Human SETMAR ELISA Kit倉鼠血紅氧合1(HO-1)免疫試劑盒

蠟樣芽孢桿菌HER4抗體Human SERPIND1(Serpin family D member 1) ELISA Kit倉鼠心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)免疫試劑盒

 禽白血病病原基因1/bri3結合蛋白抗體Human SF3A1 ELISA Kit倉鼠色P450,家族7亞科A多肽1(CYP7A1)免疫試劑盒

淡紫青霉肝病核心抗原C區(qū)抗體Human BIRC2(Baculoviral IAP repeat-containing protein 2) ELISA Kit倉鼠鐵蛋白(FE)免疫試劑盒

印度芽孢桿菌型肝炎病-NS1抗體Human SETDB2(Histone-lysine N-methyltransferase SETDB2) ELISA Kit倉鼠瘦(LEP)免疫試劑盒

洋蔥伯克霍爾德氏菌型肝炎病-NS3抗體Human SERPINB8 ELISA Kit倉鼠前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒

絨毛栓菌型肝炎病-NS4a抗體Human SERPINB12 ELISA Kit倉鼠可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)免疫試劑盒

丁梭菌A型病H5N1-M2蛋白抗體Human SERPIND1(Serpin family D member 1) ELISA Kit倉鼠可溶性間粘附分子1(sICAM-1)免疫試劑盒

中華根瘤菌透明質/玻璃抗體Human SERPINB9 ELISA Kit倉鼠巨噬遷移抑制因子(MIF)免疫試劑盒

炭疽芽胞桿菌Bacillus│anthracis 質量規(guī)格:分析標準品,99%秦皮苷

洋蔥伯克霍爾德氏菌Burkholderia│cepacia 質量規(guī)格:分析標準品高麗槐

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規(guī)格:100μg/ml,u=4%紫蓳靈
BPTE電泳緩沖液TM ELISA Kit  大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白規(guī)格: 48T

PDGF ELISA Kit  大鼠血小板衍生生長因子規(guī)格: 48T

OxLDL ELISA Kit  大鼠氧化低密度脂蛋白規(guī)格: 48T

PAF ELISA Kit  大鼠血小板活化因子規(guī)格: 48T

P III NT ELISA Kit  大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽規(guī)格: 48T

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1)  轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

 


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