GPB解離液公司正在銷售的產(chǎn)品：兔髓過氧化物酶抗體(Anti-MPO)試劑盒Anti-GAB1 AntibodySTRN4蛋白抗體
兔鈣調(diào)素(CAM)試劑盒 Anti-GABRA1 Antibody鈉離子通道蛋白7α/Na+ CP type VIIα抗體
兔核孔蛋白160kda(NUP160)試劑盒Anti-GABBR1 Antibody電壓門控鈉通道SCN3α蛋白/Na+ CP type II

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：細(xì)胞組分分離

儲(chǔ)存條件：—20℃,避光,6個(gè)月

用途：分離植物組織細(xì)胞核

注意事項(xiàng)：主要由精胺、檸檬酸鈉、氯化鈉、曲拉通、MOPS等組成。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.1    5～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

哌啶（標(biāo)準(zhǔn)品） Nitazoxanide19號(hào)染色體開放閱讀框46抗體包裝5g

派多,哌多（標(biāo)準(zhǔn)品） Nitazoxanide原癌基因cMAF抗體包裝1g

他（標(biāo)準(zhǔn)品） Oligomycin A電壓依賴性鈣通道Cav2.1抗體包裝25g

福多斯坦（標(biāo)準(zhǔn)品） Olopatadine HClL型鈣通道蛋白a1亞型3抗體包裝5g

福斯坦(標(biāo)準(zhǔn)品) Olopatadine HClL型鈣通道蛋白a1亞型6抗體包裝1g

（標(biāo)準(zhǔn)品） Oxybutynin HCl色P450 2B6抗體包裝25g

雜質(zhì)A（福辛普）（標(biāo)準(zhǔn)品） Oxybutynin HCl磷化β鏈接相互作用蛋白1抗體包裝5g

輔Q10(標(biāo)準(zhǔn)品) Paroxetine HCl20號(hào)染色體開放閱讀框62抗體包裝1g

輔Q9(標(biāo)準(zhǔn)品) Paroxetine HCl凋亡抑制因子1抗體包裝250mg

富馬（標(biāo)準(zhǔn)品） Piroxicam20號(hào)染色體開放閱讀框27抗體包裝25g

富馬 (標(biāo)準(zhǔn)品） Piroxicam酯抑制蛋白C1IN抗體包裝5g

富馬（標(biāo)準(zhǔn)品） Posaconazole色P450 2W1抗體包裝1g

富馬盧帕他定(標(biāo)準(zhǔn)品) Posaconazole脫氫抗體包裝250mg

富馬馬斯（標(biāo)準(zhǔn)品） Riimin因子誘導(dǎo)凋亡抑制因子1包裝1g

富馬替芬(標(biāo)準(zhǔn)品) Riimin親環(huán)蛋白PPIB抗體包裝250mg

桿狀毛霉Mucor│bacilliformis 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR,可用于培養(yǎng)信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子1試劑盒 ;lindenenol

蘇云金芽胞桿菌鲇澤變種Bacillus│thuringienis var. aisawai 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品新生狀腺試劑盒烏金甙;

JCM15524資源名稱: 居沉積物海桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%;FLT3拮抗劑新喋呤試劑盒D-無葡萄糖;D(+)-Glucose
GPB解離液NPPC/FITC  熒光標(biāo)記促尿鈉排泄肽前體CIgG(S)-(-)-α-纈氨 98%

NP/FITC  熒光標(biāo)記任IgG(-)-2--D-絲氨 99%

NPM/FITC  熒光標(biāo)記核仁蛋白IgGα--D-苯氨 98%

Phospho-NPM (Ser4)/FITC  熒光標(biāo)記化核仁蛋白IgG反式-3-苯-L-脯氨 98%

Phospho-NPM (Thr95)/FITC  熒光標(biāo)記化核仁蛋白IgGα--L-苯氨 98%

Phospho-NPM (Thr199) /FITC  熒光標(biāo)記化核仁蛋白IgG2,6-二氨苯 98%

NPY /FITC  熒光標(biāo)記神經(jīng)肽 YIgG己 97%

NPY2R/FITC  熒光標(biāo)記神經(jīng)肽Y受體2IgG己 ≥97%, FCC, Kosher, FG

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對(duì)于需要更高密度來檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。