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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品分類：蛋白電泳
儲存條件：4℃,避光,12個月
用途：配制丙烯酰胺凝膠(PAGE膠),包括SDS-PAGE膠等,可以用于蛋白或核酸的分離。
注意事項(xiàng)：主要由超純丙烯酰胺(acrylamide)、去離子水組成。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
丙烯酰胺溶液 | 500ml | FS-R7495 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
蘇云金芽孢桿菌蘇云金亞種枯草溶菌轉(zhuǎn)化1抑制劑抗體Anti-CDK6 Antibody瘦受體(Leptin receptor)
類干酪乳桿菌枯草溶菌轉(zhuǎn)化1抑制劑抗體Anti-CDK8 Antibody瘦(LEP/Leptin)
黃綠鏈霉菌蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基5C/PP2A-B56-γ抗體Anti-CDK7 Antibody噬性趨化因子-2(Eotaxin-2)
金龜子綠僵菌蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基5D/PP2A-B56-δ抗體Anti-CDK7 Antibody噬性趨化因子(Eotaxin)
新城疫病磷化絲/蘇抗體Anti-CDKN1C Antibody嗜性粒趨化因子(Eotaxin)
變灰青霉ATP鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMCA3抗體Anti-CDK9 Antibody(PB0565)嗜粒趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)
鍺栓孔菌 PUM1蛋白抗體Anti-CDKN1C Antibody生長因子(GH)
紅曲霉核糖核結(jié)合蛋白1抗體Anti-CDKN1B Antibody生長調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)
細(xì)鏈格孢神經(jīng)叢蛋白B2抗體Anti-CDO1 Antibody神經(jīng)趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)
平滑假絲酵母磷化p53結(jié)合蛋白1抗體Anti-CDR2 Antibody前動力蛋白1(PROK1/EG-VEGF)
谷棒桿菌PDZ結(jié)構(gòu)域蛋白GOPC抗體Anti-CEACAM5 Antibody凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX-1)
異常漢遜酵母轉(zhuǎn)錄因子Pax6抗體Anti-CDR2 Antibody苗條受體(Leptin receptor)
北里胞菌多型性腺瘤基因樣蛋白1抗體Anti-CEACAM5 Antibody苗條(OB)
副干酪乳桿菌腫瘤抑制基因p53抗體Anti-CEBPA Antibody苗條(LEP)
產(chǎn)短桿菌蛋白激活受體4抗體Anti-CEBPA Antibody粒趨化蛋白2(GCP-2/CXCL6)
硬水黃桿菌原鈣粘蛋白β5抗體Anti-CEBPB Antibody(PB0119)粒巨噬集落激因子(GMCSF/CSF2)
豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌Actinobacillus│Pleuropneumoniae 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
有毒艾耳球蟲Eimeria│nocens 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
海桿菌Marinobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
丙烯酰胺溶液Agtr1/AT1a/FITC 熒光su標(biāo)記血管組織血管緊張suⅡ1型受體IgG規(guī)格： 0.2ml
AGER/Gold 金離子標(biāo)記的晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體規(guī)格： 0.2ml
Aryl Hydrocarbon Receptor/FITC 熒光su標(biāo)記芳香烴受體IgG規(guī)格： 0.2ml
Aryl Hydrocarbon Receptor/FITC 熒光su標(biāo)記芳香烴受體IgG規(guī)格： 0.2ml
AIF/FITC 熒光su標(biāo)記AIFIgG規(guī)格： 0.2ml
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