詳細(xì)介紹
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時(shí),熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:5(6)-羧基熒光素二乙酸酯
貨號:FSP178
產(chǎn)品規(guī)格:100 mg
分類:熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
尿苷二磷酸酶使用說明書Bim (C34C5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 700 Conjugate)100 ul
酰基輔酶A合成酶保存CTCF Antibody100 ul
葉綠素AB混合物使用說明書Phospho-YB1 (Ser102) (C34A2) Rabbit mAb100 ul
蘇木色精保存IQGAP1 (D6E3J) Rabbit mAb100 ul
蘇丹Ⅳ使用說明書Di-Methyl-Histone H3 (Lys36) (C75H12) Rabbit mAb20 ul
二氯熒光素實(shí)驗(yàn)步驟Di-Methyl-Histone H3 (Lys36) (C75H12) Rabbit mAb100 ul
茜素黃R實(shí)驗(yàn)步驟Phospho-PLCbeta3 (Ser537) (D8K2R) Rabbit mAb100 ul
酸性茜素藍(lán)B價(jià)格ASF1B (C70E2) Rabbit mAb1 Kit
偶氮氯膦Ⅰ實(shí)驗(yàn)步驟p70 S6 Kinase Substrates Antibody Sampler Kit100 ul
偶氮氯膦mN保存Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb150 ul
鄰聯(lián)茴香鹽酸鹽價(jià)格VEGF Receptor 2 Control Proteins100 ul
二甲酚橙四鈉使用說明書IKKε (D20G4) Rabbit mAb20 ul
玫瑰紅6G實(shí)驗(yàn)步驟IKKε (D20G4) Rabbit mAb100 ul
1-基-3-甲基-4-甲?;吝蜻獙?shí)驗(yàn)步驟Pim-1 Antibody1 Kit
4-羥基偶氮價(jià)格PhosphoPlus®α-Synuclein (Ser129) Antibody Duet5 mg
鉍試劑Ⅰ實(shí)驗(yàn)步驟SBI-020 ul
4-(2-吡啶偶氮)間二酚鈉鹽保存DYKDDDDK Tag Antibody (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Biotinylated)100µg
5(6)-羧基熒光素二乙酸酯Saccharomyces│cerevisiae var.ellipsoideus凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 葡萄酒用菌培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;定期移植法
Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch分離基物: 子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 28存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Alcanivorax│venustensis分離基物: 水樣/深層海水凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 有機(jī)污染物降解菌/石油烴類降解菌培養(yǎng)基: 821生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
深紅紫鏈霉菌種屬: Streptomyces│violaceorubidus凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0038生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Streptomyces│venezuelae分離基物: 土壤凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 12生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Escherichia│coli分離基物: 乳汁凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究分析培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;
Escherichia│coli分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 動(dòng)物疫苗培養(yǎng)基: 411生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Rahnella│sp.分離基物: 土壤/南極土壤凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 待定培養(yǎng)基: 33生長條件: 20-25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Streptomyces│sp.分離基物: 鹽堿土凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 331生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法