詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體 |
英文名稱 | ANKRD1 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
膦酰二肽鈉 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.99純度:≥97%
癸基喃葡萄糖;癸基吡喃葡萄糖苷 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
德羅特韋(GSK1349572,DTG) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
十二基吡喃葡萄糖苷;月桂酰基喃葡萄糖 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:≥98%
羥乙基纖維素(20000~30000 mpa.s) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:粘度20000~30000 mpa.s純度:≥97%
羥乙基纖維素(55006500 mpa.s) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:粘度55006500 mpa.s純度:≥98%
羥乙基纖維素(40~60 mpa.s) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:粘度40~60 mpa.s純度:≥98%
異丙基βD代半乳糖苷(IPTG) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
甘露糖;D甘露糖 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:≥98%
D甘露糖(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥95%
N辛?;鵑基葡糖(MEGA8) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥97% ,進(jìn)分純度:≥98%
N癸?;鵑基葡糖(MEGA10) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
辛基βD代吡喃葡萄糖苷 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥97%
D綿子糖五水;蜜三糖五水 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
D山梨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:99%
n辛基βD吡喃葡萄糖苷(OGP) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,用于蛋白分析純度:≥98%
PDCD2L/MGC13096 程序性細(xì)胞死亡2一抗 * 0.2ml CFDA SE;Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester
SLTM 轉(zhuǎn)綠調(diào)節(jié)因子SLTM一抗 * 0.2ml CAPE (Caffeic Acid Phenethylester)
GPR65 G蛋白偶聯(lián)受體65一抗 * 0.2ml Sulfameter
AX2R/LOC389289 膜粘連蛋白2受體一抗 * 0.2ml Amitraz
NADE/NGFRAP1 神經(jīng)生長因子受體相關(guān)蛋白1一抗 * 0.2ml Amitraz
NRH2 死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2一抗 * 0.2ml Citric acid mohydrate
PGRPS 肽聚糖識別蛋白1一抗 * 0.2ml Salubrinal
Porimin 前細(xì)胞脹亡受體誘導(dǎo)膜損傷蛋白一抗 * 0.2ml Primaquine phosphate
心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體Bacillus sp.分離基物: 土壤/油污海沙提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 近海細(xì)菌培養(yǎng)基: 33生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Rhizopus sp.分離基物: 高粱米提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 儲糧微生物培養(yǎng)基: 14生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Enterococcus faecalis分離基物: 弱雛肝臟提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 致病性研究培養(yǎng)基: 396生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Escherichia coli EHEC O 157 : H und提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 36℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Rhizobium leguminosarum分離基物: 根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于分類學(xué)和遺傳學(xué)研究,教學(xué)上也有應(yīng)用,同時也篩選與豆科植物共生固氮的高效菌株用于實際。培養(yǎng)基: 0063生長條件: 28-30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
Alcanivorax venustensis分離基物: 水樣/深海底層水樣提供形式: 凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 有機(jī)污染物降解菌/石油烴類降解菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Paecilomyces sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生果膠酶培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Escherichia coli分離基物: 分泌物提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 36℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
Escherichia coli分離基物: 腹瀉新生仔豬小腸黏膜提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研及血清定型培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;