詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 乳腺癌膜相關(guān)蛋白101抗體 |
英文名稱 | BCMP101 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
替米沙坦相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:15mg 英文名稱:
托拉唑相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
雙羥羥嗪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Hydroxyzine Pamoate
優(yōu)降糖標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Glyburide
阿魏二十二酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Docosyl Ferulate
地克珠利標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Diclazuril
克拉雜質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:10mg 英文名稱:
群勃龍醋酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:
孕三標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Trenbolone CIII
斯的明標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Pyridostigmine Bromide
六合鐵(II)鐵 進(jìn)口、國產(chǎn) PrussianBlue 含量:IND
六水合鈷 進(jìn)口、國產(chǎn) Cobaltchloridehexahydrate 含量:AR,99.8%
六水合鎳 進(jìn)口、國產(chǎn) Nickelchloridehexahydrate 含量:超純,98%
六水鍶 進(jìn)口、國產(chǎn) Strontiumchloridehexahydrate 含量:CP,98.5%
六重氫二基亞砜 進(jìn)口、國產(chǎn) DMSOd6 含量:CP,98.5%
龍膽 進(jìn)口、國產(chǎn) DHB 含量:高純,98%
龍膽紫 進(jìn)口、國產(chǎn) Crystalviolet 含量:BR,羧度≥60%
漏蘆糖 進(jìn)口、國產(chǎn) D(+)Trehalosedihydrate 含量:高純,98%
盧戈液 進(jìn)口、國產(chǎn) 盧戈液 含量:BR
蘆 進(jìn)口、國產(chǎn) VP 含量:IND,99%
乳腺癌膜相關(guān)蛋白101抗體Trichoderma sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗癌活性培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
Bradyrhizobium sp.提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 與大翼豆共生固氮培養(yǎng)基: 0053生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法
嗜酸乳桿菌種屬: Lactobacillus acidophilus分離基物: 豬腸內(nèi)提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于益生菌類食品。培養(yǎng)基: CM0789生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Bacillus anthracis Cohn分離基物: 楊樹根系土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 141生長條件: 30存儲條件: 定期移植法
木糖氧化無色桿菌種屬: Achromobacter xylosoxidans提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株, quality control strain培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
氧化葡糖桿菌種屬: Gluconobacter oxydans提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 230生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Saccharomyces cerevisiae提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 淀粉發(fā)酵制酒精。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃存儲條件: 定期移植法
Chaetomium sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗真菌;抗白色念珠菌培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 28C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)
Amphibacillus sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法