詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 9號染色體開放閱讀框40抗體 |
英文名稱 | C9orf40 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
羧肽酶 Y >50 U /mg 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>50 U /mg,BC純度:≥95%
蓖麻油 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:商品級純度:≥97%
1,1環(huán)己基二乙 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥97%
乙纖維素 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR純度:90%
乙鈰(>99%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:90%
鈰四水(>99%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:95% 98%
碳銫(>99%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:≥99%
滂天藍(~50%,BS) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:~50%,BS純度:≥95%
銨T三水(>98%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:95%
卡拉唑黑E(>70%,BS) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>70%,BS純度:≥95%
金三水 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR;水溶液,Au在23.523.8%純度:≥95%
乙膽固(>96%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>96%,BR純度:≥95%
硬脂膽固(>98%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
重酒石膽堿(>98%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
鉻粒(>99%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:≥97%
鉻粉(>99%,BR) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:≥98%
WDR19 WD重復膜蛋白19一抗 * 0.2ml Ronidazole
WSB2/WD SOCS box protein 2 信號傳導抑制蛋白WD重復蛋白2一抗 * 0.2ml Ronidazole
WWP1 WW結構域E3泛素連接酶1一抗 * 0.2ml Ethyl cellulose
YY1AP1/HCCA2 肝癌相關蛋白2一抗(轉(zhuǎn)錄因子YY1結合蛋白1一抗) * 0.2ml Vitamin K1
ZNF146 指蛋白146一抗 * 0.2ml 9Amimicycline HCl
ZNF23 指蛋白23一抗 * 0.2ml Afatinib/BIBW2992
ZNF364/BCA2/RNF115 癌相關基因2一抗(指蛋白364) * 0.2ml Atazanavir sulfate
FAM89B/MMTVR 腫瘤病毒受體同源蛋白一抗 * 0.2ml Atazanavir sulfate
9號染色體開放閱讀框40抗體200mg土壤漆酶活性檢測試劑盒 可見分光光度法65-22-552705-93-896T內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)HPLC≥98%可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體檢測試劑盒20mgMV IgG 50-02-2化學試劑醇脫酶2(ADH2)15mg土壤漆酶活性檢測試劑盒 微量法65-22-552286-59-696T妊娠關聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)HPLC≥98%可溶性腫瘤壞死子受體2檢測試劑盒20mgTRB-1 50-02-2化學試劑醇脫酶3(ADH3)
15mg土壤漆酶活性檢測試劑盒 微量法65-22-552286-59-696T妊娠關聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)HPLC≥98%可溶性腫瘤壞死子受體2檢測試劑盒20mgTRB-1 50-02-2化學試劑醇脫酶3(ADH3)50mg山梨醇(木糖醇)含量測試盒 可見分光光度法65-22-552286-58-596T妊娠關聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)HPLC≥98%可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1檢測試劑盒20mgTRB-2 50-02-2化學試劑醇脫酶4(ADH4)
50mg山梨醇(木糖醇)含量測試盒 可見分光光度法65-22-552286-58-596T妊娠關聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)HPLC≥98%可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1檢測試劑盒20mgTRB-2 50-02-2化學試劑醇脫酶4(ADH4)125mg山梨醇(木糖醇)含量測試盒 微量法65-22-522427-39-096T妊娠關聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)HPLC≥98%可溶性血纖蛋白單體復合物檢測試劑盒20mgTRB-31405-89-6化學試劑醇脫酶5(ADH5)
125mg山梨醇(木糖醇)含量測試盒 微量法65-22-522427-39-096T妊娠關聯(lián)血漿蛋白A(PAPPA)HPLC≥98%可溶性血纖蛋白單體復合物檢測試劑盒20mgTRB-31405-89-6化學試劑醇脫酶5(ADH5)1g解酶檢測試劑盒 (紫外分光光度法)524-36-752286-74-596T高遷移率族蛋白1(HMG1)HPLC≥98%可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體檢測試劑盒20mgAsp1405-89-6化學試劑醇脫酶6(ADH6)
1g解酶檢測試劑盒 (紫外分光光度法)524-36-752286-74-596T高遷移率族蛋白1(HMG1)HPLC≥98%可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體檢測試劑盒20mgAsp1405-89-6化學試劑醇脫酶6(ADH6)25mg二(MDA)含量檢測試劑盒 可見分光光度法524-36-714197-60-596T高遷移率族蛋白1(HMG1)HPLC≥98%可溶性胸苷激酶1檢測試劑盒20mgAsparagine1405-87-4化學試劑醇脫酶7(ADH7)