詳細(xì)介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。?
產(chǎn)品名稱 | 枇杷葉探針?lè)≒CR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Folium eriobotryae |
貨號(hào) | FS-P99213 |
優(yōu)點(diǎn):
(1)操作簡(jiǎn)單,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對(duì)于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,產(chǎn)物檢測(cè)用肉眼觀察或濁度儀檢測(cè)沉淀濁度即可判斷。對(duì)于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器。
(2)快速高效,因?yàn)椴恍枰A(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時(shí)間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時(shí)間可以節(jié)省1/2,多數(shù)情況在20。30 rain均可檢測(cè)到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時(shí)定量檢測(cè)。
(3)高特異性,由于是針對(duì)靶序列6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)的4種特異性引物。6個(gè)區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增。故其特異性*。
(4)高靈敏度,對(duì)于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個(gè)拷貝,比PCR高出數(shù)量級(jí)的差異。
用途:
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗(yàn)。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡(jiǎn)化,能減少污染,降低實(shí)驗(yàn)誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進(jìn)一步簡(jiǎn)化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強(qiáng)。能擴(kuò)增各種常見(jiàn)的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 (CM0075)水楊苷2,4-二氟甲酸NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C) 谷氨酸受體2C(多肽)
Liver Broth 肝肉湯水飛薊賓2,4-二氟甲酸N-ras 原癌基因抗原
庖肉培養(yǎng)基 (CM0081)蕓香柚皮苷2,4-二氟甲酸Nrf2 peptide 核因子2相關(guān)因子2抗原
Hoyle培養(yǎng)基基礎(chǔ) (CM0083)芍藥苷2,2-二氟-1,3-并二惡茂NRF-1(nuclear respiratory factor-1) 核呼吸因子-1抗原
甘露糖鹽瓊脂 (Chapman 培養(yǎng)基) (CM0085)鼠李糖2,2-二氟-1,3-并二惡茂NSE (neuron specific enolase) 神經(jīng)元特異性烯醇化酶抗原
胰蛋白胨水 Tryptone Water(CM0087)甜菜堿3-氟鄰二甲酸CP(Na+/taurocholate Cotransporting Polypeptide) 鈉離子/?;悄懰峁厕D(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗原
鹽肉肉湯 (CM0094)鹽酸甜菜堿3-氟鄰二甲酸Ghrelin 28 腦腸肽28
Czapek Dox 液體培養(yǎng)基 (CM0095)甜菊苷1-Boc-4-溴甲基哌啶OCLN(Occluding) 咬合蛋白抗原
MMP-9/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-9IgGATP依賴的解旋酶CHD12-氟-4-胺Porcine PPAR-δ (Peroxisome Proliferator Activated Receptor Delta) 檢測(cè)試劑盒
MMP-10/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-10IgG染色質(zhì)解旋酶DNA結(jié)合蛋白2-氟-5-胺Porcine ADAM9 (A Disiegrin And Metalloprotease 9) 檢測(cè)試劑盒
MMP-11/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-11IgG染色質(zhì)解旋酶DNA結(jié)合蛋白22-氟-5-胺Porcine OVA sIgG (Ovalbumin Specific IgG) 檢測(cè)試劑盒
MMP-12/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-12/巨噬細(xì)胞金屬?gòu)椓Φ鞍酌窱gG染色質(zhì)解旋酶DNA結(jié)合蛋白34-溴-2-羥基吡啶Porcine BMF (Bcl-2 Modifying Factor) 檢測(cè)試劑盒
MMP-13 /FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶13IgG染色質(zhì)解旋酶DNA結(jié)合蛋白Mi2β4-溴-2-羥基吡啶Porcine VMA (Vanillylmandelic Acid) 檢測(cè)試劑盒
MMP-14/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-14IgGATP依賴的解旋酶CHD64-溴-2-羥基吡啶Porcine SHBG (Sex Hormone Binding Globulin) 檢測(cè)試劑盒
MMP-15/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-15IgGATP依賴的解旋酶CHD73-溴-4-羥基吡啶Porcine TGM2 (Transglutaminase 2, Tissue) 檢測(cè)試劑盒
MMP-16/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-16IgGATP依賴的解旋酶CHD8鹽酸洗必泰Porcine GPR120 (G Protein Coupled Receptor 120) 檢測(cè)試劑盒
枇杷葉探針?lè)?/font>PCR鑒定試劑盒卡格列凈半水;坎格列凈半水Thymidylate Synthase (D26G11) Rabbit mAb
5'-二磷酸胞苷三鈉鹽NBR1 (D2E6) Rabbit mAb (PE Conjugate)
2,3-二氫苯并呋喃 PEN2 Antibody
dT亞磷酰胺單體Pim-1 (D8D7Y) Rabbit mAb
Bz-2'-脫氧胞苷亞磷酰胺單體Human <sub>His6</sub>Fas Ligand/TNFSF6 (h<sub>His6</sub>FasL)
匹多莫德Human <sub>His6</sub>Fas Ligand/TNFSF6 (h<sub>His6</sub>FasL)
匹多莫德(標(biāo)準(zhǔn)品)TNFRSF8/CD30 (E4L4I) XP® Rabbit mAb
硫酸羥基氯喹TNFRSF8/CD30 (E4L4I) XP® Rabbit mAb
乙酰唑胺Mcl-1 (D35A5) Rabbit mAb
O-6-芐基鳥(niǎo)嘌呤,MGMT 的抑制劑Mcl-1 (D35A5) Rabbit mAb