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公司動(dòng)態(tài)
用MTS檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)
點(diǎn)擊次數(shù)：634 發(fā)布時(shí)間：2016-10-31
1．培養(yǎng)IL-2依賴(lài)細(xì)胞株CTLL-2細(xì)胞或HT-2細(xì)胞（檢測(cè)IL-2），或者IL-3依賴(lài)細(xì)胞株FDC-P1細(xì)胞或FL5.12細(xì)胞（檢測(cè)IL-3）到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。
2．取96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔加0.1ml含1×104～2×104上述細(xì)胞之一的Dmem培養(yǎng)液（加10％小牛血清）。
3．每孔加0.1ml系列稀釋的待測(cè)細(xì)胞因子（IL-2或IL-3）樣品或細(xì)胞因子標(biāo)準(zhǔn)品，在37℃ 5％ CO2的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時(shí)。
4．每孔加20μl MTS/PMS混合液，繼續(xù)培養(yǎng)3～4小時(shí)顯色。
5．檢測(cè)前搖晃培養(yǎng)板10秒鐘，混勻顏色。在酶聯(lián)檢測(cè)儀上，波長(zhǎng)570nm（或490nm，或570nm和690nm）處檢測(cè)各孔的光吸收值（OD）。用樣品稀釋度對(duì)OD值（OD570、OD490或OD570/OD690）繪制劑量-反應(yīng)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品曲線計(jì)算樣品中細(xì)胞因子的量。