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pGEM 3 常用載體

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  • 上海士鋒生物科技有限公司
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PCR原理

  DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈,在DNA聚合酶的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,加入設(shè)計(jì)引物,DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。
  但是,DNA聚合酶在高溫時(shí)會(huì)失活,因此,每次循環(huán)都得加入新的DNA聚合酶,不僅操作煩瑣,而且價(jià)格昂貴,制約了PCR技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展。
  發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大  taq酶[1]量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
  PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;②模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合;③引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基互補(bǔ)配對(duì)與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈,重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過(guò)程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2~4分鐘,2~3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍。

鄭重承諾:凡是購(gòu)買公司產(chǎn)品,出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題,無(wú)條件退貨退款。

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磷酸氫二鈉二水物/二水合磷酸二鈉/二水合二鹽基磷酸鈉/二水合磷酸氫二鈉/二水磷酸鈉/磷酸鈉二元二水合物/SodiumSFhosSFhatedibasiSFdihydrateAR,98%10028-24-7RT  磷酸三鈉/正磷酸鈉/十二水磷酸鈉/磷酸三鈉十二水合物/TSSFAR,98%10101-89-0RT 
無(wú)水磷酸三鈉/三堿式磷酸鈉/原磷酸三鈉/磷酸三鈉/磷酸鈉/TrisodiumSFhosSFhateAR,98%10101-89-0RT 
5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷/5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄苷酸環(huán)己氨鹽/5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷酸/5-溴-4氯-3-吲哚葡萄糖苷/5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡糖苷酸環(huán)己胺鹽/5-溴-4-氯-3-吲哚基-β-D-葡萄糖醛酸苷環(huán)己基胺鹽/X-gluSF/X-GlSFA 超純,99% 114162-64-0 保存:-20℃
  或18656-96-7 
5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷/5-溴-4氯-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷/X-gal/BSFIG超純,99%7240-90-6保存:-20℃ 
5-溴-4氯-3-吲哚N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷/5-溴-4-氯-3-吲哚基-N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷/X-GalNASF超純,98%129572-48-1保存:-20℃ 
5-溴-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷/Red-Gal/Mag-gal/Magenta-gal生物技術(shù)級(jí),98%93863-88-8保存:-20℃ 
對(duì)硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷/4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷/4-硝基苯基-α-D-呋喃葡糖苷/4-硝基苯-α-D-吡喃葡糖苷/對(duì)硝基苯-α-D-葡萄糖吡喃苷/SFNSFG生物技術(shù)級(jí),99%3767-28-0保存:-20℃ 
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