技術文章
乳酸脫氫酶(LDH)釋放法細胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒
閱讀:1486 發(fā)布時間:2022-8-2主要用途 乳酸脫氫酶(LDH)釋放法細胞繁殖與毒性定量檢測試劑是一種旨在通過酶聯(lián)連續(xù)反應系統(tǒng)檢測由于細胞損 傷導致的細胞內(nèi)穩(wěn)定的乳酸脫氫酶釋放到細胞外,使四唑鹽染料碘硝基氯化四氮唑(INT)還原為紅色甲臜 (farmazan),即比色法定量測定酶活性,以評價活體細胞繁殖的而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心 研制、成功實驗證明的。適用于各種藥物、化學、環(huán)境因子和營養(yǎng)因子處理的貼壁或懸浮生長中的動物或人 體細胞。替代傳統(tǒng)的同位素[51 Cr]釋放檢測的。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,簡捷敏感,性能穩(wěn)定, 顯色清晰,檢測準確,重復性好。
產(chǎn)品內(nèi)容
裂解液(Reagent A) 毫升 補充液(Reagent B) 毫升 反應液(Reagent C) 毫升 顯色液(Reagent D) 毫升 終止液(Reagent E) 毫升 標準液(Reagent F) 微升(另購) 產(chǎn)品說明書
用戶自備
96 孔細胞培養(yǎng)板:用于細胞操作的容器 細胞培養(yǎng)箱:用于孵育反應 孔板離心機:用于沉淀細胞 酶標儀:用于定量檢測染色后的細胞
質量標準 1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感
關鍵步驟
1. 本產(chǎn)品為 100 次(1 個 96 孔板)操作
2. 操作時須戴手套 3. 整個操作須無菌操作
4. 建議每個樣品安排 3 個孔,即重復 3 次,計算時取其平均值
5. 檢測體系相應增加,試劑用量按比例相應增加:例如 200 微升檢測體系,試劑用量增加 1 倍
6. 每孔中的培養(yǎng)液需 100 微升,避免使用周邊培養(yǎng)孔(常常液體蒸發(fā)而減少)
7. 系統(tǒng)測試,可以加入 10 微升標準液(Reagent G)到 50 微升無細胞的細胞培養(yǎng)液里,然后加入反應液 和顯色液即可
8. 細胞裂解效果不佳,可以使用 20 微升裂解液(Reagent A)處理
9. 孵育時,須避光
10.染色完成后,建議即刻檢測,最遲不得超過 1 小時
11.細胞培養(yǎng)和處理時,避免使用草酸(OXALATE),草氨酸(OXAMATE)和 EDTA,否則影響檢測的準 確性
12.血清含有乳酸脫氫酶,建議使用濃度不要超過 1%
13.細胞過度生長、密度過高、離心速度過大、培養(yǎng)箱內(nèi)外溫差過大等因素會造成細胞自然釋放乳酸脫氫酶
14.酚紅會干擾檢測
15.樣品最大酶活性對照孔或最大 OD 吸光讀數(shù)與細胞裂解程度密切相關
16.如果用戶沒有孔板離心機,則移取上清液時格外小心
17.如果用戶沒有匹配的波長,可以使用波長 470nm 至 570nm 之間的任一波長替代
18.本公司提供系列細胞繁殖檢測試劑產(chǎn)品