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純化線粒體凍存液產(chǎn)品說明書
閱讀：909 發(fā)布時間：2023-7-27純化線粒體凍存液產(chǎn)品說明書
主要用途
純化線粒體凍存液是一種旨在幫助冷凍環(huán)境下儲存各種分離的純化線粒體（人體和動物等），確 保其膜完整性、維持新鮮狀態(tài)的超微結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能的保護性介質(zhì)。該溶液由大師級科學(xué)家精心研制、 成功實驗證明的。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌， 即到即用， 性能穩(wěn)定， 無病毒和支原體， 維護線粒體活力高達 95％以上。
技術(shù)背景
凍存保護（Cryopreservation）是長期儲藏和保存生物活體材料的基本手段。但是，在凍存過程中活體將受 到物理或化學(xué)性傷害諸如冰結(jié)晶體的形成、滲透壓的變化以及化學(xué)物毒性等，尤其是致命性的活體內(nèi)冰產(chǎn) 生， 所導(dǎo)致牽延和縮水等物理性損傷。作為凍存保護劑之一的丙三醇（Glycerol）被證實能夠阻止冰晶體的 發(fā)生。根據(jù)線粒體的生物學(xué)需求， 凍存溶液含有海藻糖（Trehalose），一種天然性二糖， 在植物中幫助共生 的物質(zhì)， 且防止脫水。在線粒體保存中， 維護膜完整性、維持新鮮狀態(tài)下的超微結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能達到 95 %以上，包括 ATP 合成，膜電位，鈣誘導(dǎo)性腫脹等。
產(chǎn)品內(nèi)容
凍存液（Reagent A）
產(chǎn)品說明書
保存方式
保存 凍存液（Reagent A）在－20℃的冰箱里，有效保證 6 月
用戶自備
1.5 毫升離心管：用于線粒體收集后離心
4℃微型臺式離心機：用于沉淀線粒體
2 毫升凍存管：用于線粒體冷凍儲藏
實驗步驟
實驗開始前， 將試劑盒里的 凍存液（Reagent A）從－20℃的冰箱里取出， 置于室溫下溶化。然 后進行下列操作。
1 ． 將分離純化的 500 微升線粒體懸液（50 毫克/毫升）移入到 1.5 毫升離心管
2 ． 放進 4℃微型臺式離心機離心 5 分鐘，速度為 16000g（或 13000RPM，例如 EPPENDORF 5415） 3 ． 小心抽去上清液
4 ． 加入 xx 微升 凍存液（Reagent A）
5 ． 輕輕混勻顆粒群
6 ． 分批 50 微升移入到干冰預(yù)冷的凍存管里
7 ． 即刻放進液氮罐里快速冷凍
8 ． 24 小時后，放進－70℃的冰箱里保存
注意事項
1． 本產(chǎn)品為 50 毫升規(guī)格
2． 所有凍存操作和使用工具均須在嚴(yán)格無菌狀態(tài)下進行
3． 操作時，避免污染母液
4． 如果線粒體懸液容量低于 xx 微升，可以直接加入 凍存液（Reagent A）
5． 凍存管線粒體凍存量可以達到每毫升 50 毫克
6． 凍存和解凍的基本原則是冷凍速度快速（放進液氮后快速冷凍， 再放進－70℃冰箱里保存），解凍速度 快速（用手捂熱解凍）
7． 本產(chǎn)品可以部分保護部分線粒體生物能量學(xué)功能
8． 本公司提供系列細胞凍存產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1 ． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2 ． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無病毒和支原體污染
3 ． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定維護線粒體活力高達 95％以上