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技術(shù)文章

石蠟切片蘇木素伊紅染色試劑盒說明書

閱讀:747          發(fā)布時(shí)間:2023-8-24

主要用途

 

石蠟切片蘇木素伊紅染色試劑是一種旨在使用標(biāo)準(zhǔn)化的化學(xué)分離石蠟處理,進(jìn)而使用蘇木素伊紅染料分別對(duì)組織細(xì)胞核和細(xì)胞漿進(jìn)行染色,以觀察存檔中的石蠟包埋的組織切片中組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)的而經(jīng)典的廣譜染色技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。優(yōu)化了HarrisMayer。適用于各種石蠟包埋組織切片,包括各種生理和病理組織切片,以及固著在福爾馬林或非交聯(lián)固著劑的組織。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,使用方便,性能穩(wěn)定,透明度好,著色清晰。

 

技術(shù)背景

 

作為細(xì)胞結(jié)構(gòu)染色劑之一的蘇木素Hematoxylin和伊紅Eosin已被證明是病理組織切片良好的染色液之一。蘇木素是染色細(xì)胞核的,而伊紅染色細(xì)胞漿的。染色后細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,細(xì)胞漿呈現(xiàn)粉紅色或紅色。染料滲透性強(qiáng),染色透明度好,核漿對(duì)比鮮明組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰可辨。染色后可以進(jìn)行后續(xù)免疫熒光染色或其它染料的染色。 

 

產(chǎn)品內(nèi)容

 

蠟液Reagent A         毫升

補(bǔ)水液AReagent B         毫升

補(bǔ)水液BReagent C             毫升

補(bǔ)水液CReagent D         毫升

補(bǔ)水液DReagent E         毫升

清理液Reagent F         毫升

染色液AReagent G           毫升

染色液BReagent H           毫升

染色液CReagent I           毫升

染色液DReagent J           毫升

染色液EReagent K           毫升

染色液FReagent L          毫升

染色液GReagent M          毫升

染色液HReagent N          毫升

產(chǎn)品說明書             1

 

保存方式

 

保存在室溫下,染色液CReagent I和染色液EReagent K避免光照,試劑具有揮發(fā)性,注意密閉瓶蓋;有效保證6

 

 

 

用戶自備

 

小型染色缸:用于切片的染色操作

光學(xué)顯微鏡:用于組織細(xì)胞染色后觀察分析

 

實(shí)驗(yàn)步驟

 

一、 蠟處理

 

1. 取出10片待測的石蠟包埋的組織切片(注意:石蠟包埋前,組織切片須用10%甲醛4℃條件下,固定16小時(shí),此步很重要

2. 放進(jìn)80℃烘箱,孵育30分鐘

3. 室溫下靜置15分鐘

4. 按下表依次放進(jìn)小染色缸里孵育

染色缸 

孵育時(shí)間 

xx毫升蠟液Reagent A  

15分鐘

xx毫升蠟液Reagent A 

15分鐘

xx毫升蠟液Reagent A 

15分鐘

xx毫升補(bǔ)水液AReagent B 

3分鐘

xx毫升補(bǔ)水液BReagent C 

3分鐘

xx毫升補(bǔ)水液CReagent D 

3分鐘

xx毫升補(bǔ)水液DReagent E  

3分鐘

 

5. 小心移去切片上的補(bǔ)水液DReagent E 

6. 小心加上xx微升清理液Reagent F在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面

7. 室溫下孵育5分鐘

8. 小心移去切片上的清理液Reagent F 

 

二、 染色處理

 

1. 準(zhǔn)備16個(gè)能容納20毫升染色液以及切片大小的染色缸

2. 按下表順序依次倒入xx毫升各種染色液染色缸里

3. 用鑷子輕輕夾住切片邊角,按下表依次放進(jìn)小型染色缸里,在室溫下按規(guī)定時(shí)間孵育(不要松開鑷子);在移到下一個(gè)染色缸前,將切片邊緣放在吸水綿紙上少許時(shí)間,吸去染色液,然后放進(jìn)下一個(gè)新的染色缸里孵育。

 

 

4. 晾干后,在光學(xué)顯微鏡下觀察:細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,細(xì)胞漿呈現(xiàn)粉紅色或紅色組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰可辨。

5. 可以進(jìn)行后續(xù)免疫熒光染色或其它染料的染色。 

 

注意事項(xiàng)

 

1. 本產(chǎn)品為50操作

2. 在整個(gè)操作過程中須戴手套

3. 試劑具有揮發(fā)性,注意密閉瓶蓋

4. 石蠟包埋前,組織切片須用10%甲醛4條件下,固定16小時(shí),否則造成樣品支離破碎

5. 所有操作在室溫下進(jìn)行

6. 每次更換試劑溶液時(shí),保持切片面基本晾干。空氣中晾干狀態(tài)為沒有水滴,呈濕潤狀態(tài),可見反光

7. 試劑可以重復(fù)使用

8. 組織細(xì)胞染色完成后,即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察

9. 染色后切片可以放進(jìn)載玻片盒里長久保存

10. 本公司提供系列細(xì)胞染色試劑產(chǎn)品

 

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定透明度好

3. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定著色清晰


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