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斐林試劑和班氏試劑的區(qū)別_哈靈生物
閱讀:6205 發(fā)布時間:2013-8-26斐林試劑和班氏試劑有什么不同?
他們的本質(zhì)是一樣的,班氏試劑又叫本尼迪特試劑,是由硫酸銅、檸檬酸鈉和無水碳酸鈉配置成的藍色溶液,可以存放備用。而斐林溶液必須現(xiàn)配現(xiàn)用,斐林試劑一般稱甲、乙液,甲液為氫氧化鈉溶液,乙液為硫酸銅溶液,二者混合發(fā)生復(fù)分解反應(yīng)生成氫氧化銅和硫酸鈉。
氫氧化銅進一步和還原糖反應(yīng)生成磚紅色的氧化亞銅沉淀而鑒定出還原糖。臨時混合使用是因為氫氧化銅很不穩(wěn)定,易分解為氧化銅和水。分解后就失效了。所以要現(xiàn)場混合以后馬上使用。
斐林試劑和雙縮脲試劑都由NaOH溶液和CuSO4溶液組成。斐林試劑是即配即用的試劑,CuSO4溶液濃度為0.05 g/mL,它在加熱條件下與醛基反應(yīng),被還原成磚紅色的沉淀,可用于鑒定可溶性還原糖的存在。用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時,溶液的顏色變化過程為:淺藍色→棕色→磚紅色(沉淀)。
雙縮脲試劑 CuSO4溶液濃度為0.01 g/mL,可用于鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)的肽鍵在堿性溶液中能與Cu2+絡(luò)合成紫紅色的化合物。顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比。
斐林試劑和班氏試劑都能用于鑒定可溶性還原糖,但兩者配制方法不一樣。
班氏試劑的配置:
①400mL水中加85g檸檬鈉和50g無水碳酸鈉;
②50mL加熱的水中加入8.5g無水硫酸銅。制成溶液;
③把CuSO4溶液倒入檸檬酸鈉溶液中,邊加邊攪拌,如產(chǎn)生沉淀可濾去。
兩者都可以在加熱條件下與還原性糖反應(yīng)生成磚紅色沉淀。