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技術(shù)文章

酵母氫ATP酶活性酶連續(xù)反應(yīng)光譜法定量檢測(cè)試劑盒 產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

閱讀:1460          發(fā)布時(shí)間:2016-7-13

主要用途

    我公司酵母氫ATP酶(H-ATPase)活性酶連續(xù)反應(yīng)光譜法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用氫ATP酶、丙酮酸激酶和乳酸脫氫連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng),排除其它ATP酶干擾的情況下,受到ATP酶水解產(chǎn)生的ADP過(guò)程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反應(yīng), 即采用光譜法測(cè)定其氧化后吸光峰值(NADH濃度)的變化,以此進(jìn)行測(cè)算單位酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種酵母細(xì)胞H-ATP酶的特異性活性檢測(cè)。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測(cè)敏感。

 注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品為21次操作,包括背景對(duì)照測(cè)定

2. 操作時(shí),須戴手套

3. 系統(tǒng)操作過(guò)程中,背景測(cè)定只需1次

4. 建議樣品忌用磷酸緩沖溶液、鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽、EDTA、EGTA等,可以使用SUCROSE、IMIDAZOLE等  

5. 用戶如果檢測(cè)質(zhì)膜型氫ATP酶活性,建議使用真菌/酵母細(xì)胞膜蛋白(本公司提供可溶性真菌/酵母細(xì)胞膜蛋白粗提制備試劑盒30043.1

6. 用戶如果檢測(cè)液泡型氫ATP酶活性,建議使用真菌/酵母細(xì)胞液泡蛋白(本公司提供真菌/酵母膜性囊泡(RSOV和IOV)制備試劑盒10169.3)

7. 強(qiáng)化液(Reagent B)為固體狀,移取方法為:使用1毫升槍頭,將部分剪去;或使用0.5毫升PCR管的蓋子內(nèi)圈盛滿;或秤重0.1克

8. 加入樣品啟動(dòng)反應(yīng)后3秒內(nèi)即刻光譜測(cè)定

9. 反應(yīng)測(cè)定值由高到低變化;測(cè)定可以持續(xù)30分鐘

10. 測(cè)定值由高到低變化,即0分鐘測(cè)定讀數(shù)高于10分鐘或30分鐘測(cè)定讀數(shù),表明有酶活性

11. 光譜測(cè)定后,比色皿須清洗*

12. 建議待測(cè)樣本蛋白濃度為50微克/50微升;如果樣本酶活性過(guò)低或過(guò)高,則可以增加或降低樣本量;注意計(jì)算公式的調(diào)整(本公司提供 Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1)

13. 樣品特異活性是指排除其它,包括鈣(EGTA處理)、鈉鉀(烏本苷ouabain處理)等ATP酶的干擾后的氫ATP酶活性

14. ATP酶活性單位濃度定義:在28℃溫度下,pH 7.5條件下,每分鐘內(nèi)能夠氧化1微摩爾還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)所需的酶量作為一個(gè)活性單位

15. 本公司提供系列ATP酶類分析技術(shù)產(chǎn)品

 如:
     細(xì)菌氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
     植物氫ATP酶(H+-ATPase)總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
     植物P型氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
     植物V型氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
     植物F型氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

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