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Peptide Hydrogel Suitable for 3D Cell Culture
——3D多肽水凝膠超越基質(zhì)膠（matrigel）
Yeasen多肽水凝膠產(chǎn)品是由一種由16個(gè)氨基酸組成的多肽，在鹽離子存在情況下自發(fā)組裝成的水凝膠支架結(jié)構(gòu)。多肽的大小通常在5nm左右，是親水性和疏水性氨基酸殘基交替排列組成的兩性分子肽段，能形成折疊片結(jié)構(gòu)，并自組裝形成納米纖維，這些納米纖維相互交織在一起形成基質(zhì)并進(jìn)一步形成含水量超過99.5%的水凝膠支架（見圖1）。
Yeasen多肽水凝膠無需通過調(diào)節(jié)聚合物和交聯(lián)劑的量來獲得不同類型的水凝膠。組分單一，受環(huán)境影響小，針對(duì)不同類型細(xì)胞配有不同類型水凝膠產(chǎn)品，可直接進(jìn)行挑選使用。
圖1:圖示為兩性多肽通過自組裝形成水凝膠的過程。
3D多肽水凝膠的特點(diǎn)：
還原體內(nèi)外壞境，給細(xì)胞更真實(shí)的感覺——Yeasen水凝膠系列產(chǎn)品在適當(dāng)條件下，可自組裝成平均孔徑為50~200nm的纖維狀結(jié)構(gòu)，形成與天然細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）相似的網(wǎng)狀立體結(jié)構(gòu)，能夠?yàn)榧?xì)胞的粘附、遷移、增殖和分化提供更接近體內(nèi)的外環(huán)境。
組分明確，無動(dòng)物異源蛋白和病原體——Yeasen水凝膠系列產(chǎn)品是一種人工合成的多肽類生物納米材料，由1%（w/v）的合成多肽及99%的水組成，無需通過腫瘤分離，能有效避免因動(dòng)物異源蛋白和病原體污染造成的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制等其他不利影響。
操作簡(jiǎn)單，觀察方便——可以直接用熒光染料和免疫試劑對(duì)培養(yǎng)在3D水凝膠中的細(xì)胞的進(jìn)行標(biāo)記，Yeasen水凝膠產(chǎn)品外觀呈透明狀，可用共聚焦顯微鏡或其它顯像技術(shù)獲得清晰的細(xì)胞形態(tài)圖像。Yeasen多肽水凝膠4度保存，可室溫操作。
3D細(xì)胞培養(yǎng)水凝膠功能：
（1）適合大多數(shù)種類細(xì)胞的培養(yǎng)。
（2）促進(jìn)細(xì)胞的分化，例如，肝前體細(xì)胞、大鼠PC12細(xì)胞、心肌細(xì)胞、海馬神經(jīng)元細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞等；
（3）增強(qiáng)原代細(xì)胞貼壁能力，如神經(jīng)元細(xì)胞、成纖維細(xì)胞及角化細(xì)胞等；
（4）增強(qiáng)轉(zhuǎn)染細(xì)胞系的貼壁能力，如MG-63、SH-SY5Y、HEK-293及NIH3T3等。
3D細(xì)胞培養(yǎng)水凝膠（Hydrogel）與基質(zhì)膠（Matrigel）對(duì)比
| 3D細(xì)胞培養(yǎng)水凝膠（Hydrogel） | 基質(zhì)膠（Matrigel） |
生產(chǎn)方式 | 人工合成 | EHS小鼠腫瘤中分離 |
主要成分 | 1%（w/v）的合成多肽+99%的水 | 主要成分由層粘連蛋白，Ⅳ型膠原，巢蛋白，硫酸肝素糖蛋白等，還包含生長(zhǎng)因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等 |
外觀 | 透明 | 淡黃色到深紅色（含酚紅） |
批次差異性 | 穩(wěn)定 | 批次濃度差異性大 |
儲(chǔ)存 | 2-8℃ | -20℃，使用時(shí)需要過一夜夜融化 |
運(yùn)輸 | 冰袋 | 干冰 |
適用實(shí)驗(yàn)類型 | 促進(jìn)增殖和分化；促進(jìn)原代細(xì)胞貼壁和增殖；支持轉(zhuǎn)染細(xì)胞的增長(zhǎng)；干細(xì)胞增殖，腫瘤細(xì)胞遷移/侵襲 | 細(xì)胞生長(zhǎng)、分化，形態(tài)研究，細(xì)胞化學(xué)功能，細(xì)胞遷移/侵襲，細(xì)胞基因/蛋白表達(dá)，裸鼠成瘤 |
使用濃度 | 0.1%-1% | 根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康南♂專?:3或原液） |
操作注意事項(xiàng) | 室溫；避免引入鹽離子，用無菌蔗糖或去離子水稀釋 | 嚴(yán)格低溫：實(shí)驗(yàn)涉及的液體、耗材需提前預(yù)冷 |
【注】如用于血管生成實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)購買高濃度基質(zhì)膠（貨號(hào)：354248）
簡(jiǎn)便的操作流程：
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1）水凝膠原液水浴超聲（或渦旋振蕩）30 min，離心去除氣泡；
2）用20%無菌蔗糖稀釋超聲后的水凝膠至需要的濃度；
3）消化收集細(xì)胞，離心去除培養(yǎng)基；
4）用10%無菌蔗糖重懸細(xì)胞至需要的濃度；
5）取等體積（1:1）稀釋的水凝膠和細(xì)胞懸液迅速混勻；
6）迅速（2 min內(nèi)）將上述水凝膠和細(xì)胞混合物轉(zhuǎn)移至細(xì)胞培養(yǎng)板等；
7）緩慢加入細(xì)胞培養(yǎng)基，30 min內(nèi)更換2次培養(yǎng)基；
8）30~60 min即可成膠。
實(shí)例展示:
1）用于成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)（Cat No. 40134ES）
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圖1 成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）在水凝膠中成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)后的細(xì)胞形態(tài)圖 左圖為接種在3D細(xì)胞水凝膠中的成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在成脂誘導(dǎo)10天后的形態(tài)。右圖為采用油紅O試劑對(duì)左圖細(xì)胞進(jìn)行染色的結(jié)果，紅色染色代表是脂肪滴。 |
圖示表明間充質(zhì)干細(xì)胞在水凝膠中可以被成功誘導(dǎo)為脂肪細(xì)胞，形成大量的脂肪滴。水凝膠材料不會(huì)影響干細(xì)胞的分化活性，同時(shí)保持了干細(xì)胞自我更新或分化成特定細(xì)胞系的能力，具有成為新一代組織或器官修復(fù)再生材料的潛力。
2）用于腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)（Cat No. 40137ES）
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圖2 腫瘤細(xì)胞在水凝膠中的顯微觀察圖 表達(dá)GFP基因的293細(xì)胞（左圖）與乳腺腫瘤細(xì)胞（右圖）在3D細(xì)胞培養(yǎng)水凝膠中培養(yǎng)一周后的顯微觀察結(jié)果。這兩種腫瘤細(xì)胞均已形成球樣細(xì)胞團(tuán)塊。表明細(xì)胞培養(yǎng)的水凝膠可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞形成三維結(jié)構(gòu)的多細(xì)胞球體。 |
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3）用于胎兒骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)（Cat No. 40138ES）
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圖3 胎兒骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）在水凝膠中培養(yǎng)5天后的細(xì)胞形態(tài) 采用鈣黃綠素（Calcein, AM）和碘化丙啶（PI）對(duì)細(xì)胞進(jìn)行雙熒光染色，其中綠色熒光指示活細(xì)胞，紅色熒光指示死細(xì)胞。指示活細(xì)胞的綠色熒光細(xì)胞團(tuán)在水凝膠中均勻分布，指示死細(xì)胞的紅色熒光基本觀察不到，表明細(xì)胞培養(yǎng)水凝膠對(duì)胎兒骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞毒性很低，擁有良好的細(xì)胞相容性。 |
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相關(guān)產(chǎn)品：
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
Peptide Hydrogel Suitable for 3D Cell Culture, Normal （替代Matrigel 基底膜/基質(zhì)膠） | 40134ES08 | 5 ml | 1356.00 |
Peptide Hydrogel Suitable for 3D Cell Culture, for Adhesion and Migration （替代Matrigel 基底膜/基質(zhì)膠，促粘附與遷移型） | 40135ES08 | 5 ml | 1676.00 |
Peptide Hydrogel Suitable for 3D Cell Culture, Neural Stem Cell Specially 3D（替代Matrigel 基底膜/基質(zhì)膠，適用于神經(jīng)干細(xì)胞） | 40136ES08 | 5 ml | 1676.00 |
Peptide Hydrogel Suitable for 3D Cell Culture, Tumor Cell Specially （替代Matrigel 基底膜/基質(zhì)膠，適用于腫瘤細(xì)胞） | 40137ES08 | 5 ml | 1676.00 |
Peptide Hydrogel Suitable for 3D Cell Culture, Chondrocyte Specially （替代Matrigel 基底膜/基質(zhì)膠，適用于軟骨細(xì)胞） | 40138ES08 | 5 ml | 1676.00 |
Human Fibronectin 人纖維連接蛋白 | 40105ES08 | 5 mg | 3200.00 |
Mouse Fibronectin 小鼠纖連蛋白 | 40106ES03 | 1mg | 6000.00 |
Rat Fibronectin 大鼠纖連蛋白 | 40124ES02 | 0.5mg | 2888.00 |
Insulin (From Bovine) 牛胰島素 | 40107ES25 | 25mg | 247.00 |
Matrixgel 基底膜/基質(zhì)膠 | 40111ES08 | 5ml | 1199.00 |
Matrixgel, Reduced Growth Factor 基底膜/基質(zhì)膠（低生長(zhǎng)因子） | 40123ES08 | 5ml | 1469.00 |
