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轉(zhuǎn)鐵蛋白(Transferrin)——無血清細胞培養(yǎng)添加物

2019-8-7  閱讀(1676)

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轉(zhuǎn)鐵蛋白(Transferrin)

------無血清細胞培養(yǎng)添加物

 

>>>背景介紹

轉(zhuǎn)鐵蛋白又名運鐵蛋白(Transferrin,TRF、Tf),負責運載由消化管吸收的鐵和由紅細胞降解釋放的鐵。以三價鐵復合物(Tf-Fe3+)的形式進入骨髓中,供成熟紅細胞的生成。轉(zhuǎn)鐵蛋白主要存在于血漿中,血漿中的轉(zhuǎn)鐵蛋白供應機體絕大部分組織的鐵,而在其不能到達的部位,由這些組織自己合成的轉(zhuǎn)鐵蛋白在局部產(chǎn)生轉(zhuǎn)鐵作用。

 

圖1: 轉(zhuǎn)鐵蛋白的結構

人轉(zhuǎn)鐵蛋白(Human Transferrin)主要在肝臟合成,是由位于同源N-端和C-的兩個葉片(Lobe)組成一種單鏈糖蛋白。人轉(zhuǎn)鐵蛋白共含678個氨基酸殘基,等電點為5.9、分子量為76kD。每分子的轉(zhuǎn)鐵蛋白能攜帶2個三價鐵離子(Fe3+)轉(zhuǎn)鐵蛋白與Fe3+的相互作用取決于pH,pH為7.4時,轉(zhuǎn)鐵蛋白與Fe3+結合,在酸性pH下兩者分離。

 

>>>存在形式

 

 

>>>作用機制

轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf)結合鐵是通過與其受體,即Transferrin Receptor 1(TfR1)相互作用而實現(xiàn)的。TfR1 是一種表達于細胞表面的糖蛋白,由兩個同源二聚體的亞基通過二硫鍵連接而成。在細胞表面,Tf與Fe3+相互作用形成全鐵-Tf,并與TfR1受體結合,在細胞內(nèi)吞作用下進入核內(nèi)體。在偏酸性核內(nèi)體的環(huán)境中,F(xiàn)e3+與Tf分離,同時STEAP3將Fe3+還原為Fe2+,并被二價金屬離子轉(zhuǎn)運蛋白1(DMT1)轉(zhuǎn)運到細胞質(zhì)中,然后釋放了Fe3+的Tf與TfR1組成Tf/TfR1復合物,通過胞吐作用回游到細胞表面。在細胞表面,轉(zhuǎn)帖蛋白(Tf)與受體TfR1分離,成為脫鐵-Tf,然后再與Fe3+重新結合參與鐵循環(huán)。整個過程完成后Tf和TfR1被循環(huán)利用,進入細胞攝取鐵的下一個周期中。

 

圖2: 轉(zhuǎn)鐵蛋白循環(huán)機理圖

 

>>>轉(zhuǎn)鐵蛋白主要功能

 

 

 

 

>>>轉(zhuǎn)鐵蛋白來源

 

 

來源

安全性

批次差別

提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白

從人、牛的血漿中提取

安全性差,終產(chǎn)品可能含有病原體

轉(zhuǎn)鐵蛋白從不同批次的人血清或牛血清中提取,性能差別大

重組轉(zhuǎn)鐵蛋白

原核、真核細胞表達

安全性好,終產(chǎn)品不含有病原體

每批次均用同一細胞株表達,性能穩(wěn)定

 

>>>產(chǎn)品特點

安全性好產(chǎn)品通過多層質(zhì)檢檢測,避免了病原體的污染;

毒性小細胞毒性非常低,對后續(xù)實驗沒有影響;

性能穩(wěn)定每批次均從同一細胞株中表達,性能差別小,蛋白純度高

操作簡單 只需將產(chǎn)品加入培基中即可;

應用性廣可適用于不同類型細胞的培養(yǎng)。

 

>>>FAQ

Q1:無血清培養(yǎng)基中應該添加提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白,還是重組的轉(zhuǎn)鐵蛋白?

答:提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白具有安全性差和批間差大等缺陷,尤其是將提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白添加于用于細胞培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基中時,可能會將人或動物的病原體(如瘋牛病病毒,克雅氏病毒和其它未知病原體)帶入細胞中,污染細胞。重組的轉(zhuǎn)鐵蛋白*避免了病原體污染的可能性,因此無血清培養(yǎng)基中更應該添加重組的轉(zhuǎn)鐵蛋白。

Q2:培養(yǎng)基中應該添加鐵飽和(Holo)轉(zhuǎn)鐵蛋白,還是脫鐵(Apo)轉(zhuǎn)鐵蛋白?

答:當培養(yǎng)基中不含鐵或鐵含量較低時,選擇添加鐵飽和(Holo)的轉(zhuǎn)鐵蛋白;當培養(yǎng)基中富含鐵時,選擇脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白。

Q3:鐵飽和(Holo)的轉(zhuǎn)鐵蛋白脫鐵(Apo)的轉(zhuǎn)鐵蛋白,哪個效果好?

答:無法從理論上推斷出兩者的效果好壞,需要通過實驗檢測。

Q4:轉(zhuǎn)鐵蛋白在無血清培養(yǎng)基中的濃度是多少?

答:轉(zhuǎn)鐵蛋白的濃度和細胞類型有關,具體的濃度與細胞狀態(tài)、細胞濃度、實驗目的有關。一般原代細胞:5-100mg/L;中國倉鼠卵巢細胞10-50mg/L;雜交瘤和Vero細胞5-20mg/L

 

>>>訂購信息

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

價格(元)

牛脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白(Bovine Transferrin, APO)

40102ES60

100 mg

868.00

Bovine Transferrin (HOLO) 牛飽和鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白

40103ES80

1g

4236.00

Human Transferrin 人轉(zhuǎn)鐵蛋白

40133ES60

100 mg

1187.00

 

 HB20190807

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