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293細胞無血清培養(yǎng)基,解鎖細胞培養(yǎng)無憂秘籍!

2024-10-10  閱讀(88)

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細胞培養(yǎng)作為現(xiàn)代生命科學(xué)研究的重要手段之一,為我們深入探索生命的奧秘提供了有力的工具。通過在體外模擬體內(nèi)環(huán)境,讓細胞在適宜的條件下生長、增殖和分化,可以研究細胞的生理功能、疾病發(fā)生機制以及開發(fā)新的治療方法。然而,要實現(xiàn)高質(zhì)量的細胞培養(yǎng)并非易事,培養(yǎng)基的選擇至關(guān)重要。


 

 

 

含血清培養(yǎng)基

 

在傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)中,含血清培養(yǎng)基被廣泛使用。血清中含有豐富的營養(yǎng)成分和生長因子,能夠支持細胞的生長和增殖。然而,血清培養(yǎng)也存在諸多缺點。

 

 
01
 
血清的成分復(fù)雜且不明確,不同批次之間存在差異;
02
 
血清可能攜帶病毒、支原體等潛在污染物,增加了細胞培養(yǎng)被污染的風(fēng)險;
03
 
在蛋白表達純化等一些實驗中,血清中的成分可能會干擾實驗結(jié)果。

 

 

無血清培養(yǎng)基

無血清培養(yǎng)基是指在細胞培養(yǎng)過程中不添加血清,而是通過精確調(diào)配各種營養(yǎng)成分、生長因子和其他添加劑來滿足細胞生長需求的培養(yǎng)基。從最初的嘗試到如今的廣泛應(yīng)用,無血清培養(yǎng)基經(jīng)歷了多年的發(fā)展和完善,逐漸成為細胞培養(yǎng)的主流選擇之一,它具有以下顯著優(yōu)點:

 

 
01
 

成分精準(zhǔn)可控

無血清培養(yǎng)基的成分經(jīng)過科學(xué)調(diào)配,明確且穩(wěn)定。每一種成分的作用都清晰可辨,確保了實驗結(jié)果的高度可重復(fù)性。這對于需要嚴格控制實驗條件的研究和生產(chǎn)過程至關(guān)重要;

02
 
杜絕污染風(fēng)險
由于不含有血清,極大地降低了潛在的污染風(fēng)險,為細胞培養(yǎng)提供了一個純凈、安全的環(huán)境;
03
 
優(yōu)化細胞生長

針對不同類型的細胞,如293細胞,無血清培養(yǎng)基能夠提供特定的營養(yǎng)成分和生長因子組合,促進細胞快速增殖并維持良好的細胞狀態(tài)。

 

 

產(chǎn)品介紹

 

CelCulSF™293 Cell Culture Medium(Serum-free)培養(yǎng)基為無動物源、無蛋白的化學(xué)成分限定培養(yǎng)基。適應(yīng)于HEK293各細胞系細胞(如HEK293F,HEK293T,HEK293H,Expi293 等)規(guī)?;療o血清懸浮培養(yǎng)及后續(xù)轉(zhuǎn)染表達。產(chǎn)品經(jīng)過定向優(yōu)化,尤其適應(yīng)于AAV及蛋白等相關(guān)產(chǎn)品研發(fā)和生產(chǎn)過程,可支持細胞高密度擴增及穩(wěn)定的產(chǎn)物表達。

 

 

使用秘籍

 
//
 

技術(shù)參數(shù)

 

參數(shù)

設(shè)定值

50mL TPP管

培養(yǎng)體積:10-20 mL

125~1000 mL搖瓶

培養(yǎng)體積:搖瓶總體積的20-30%

搖床轉(zhuǎn)速

TPP:轉(zhuǎn)速220 rpm,  搖瓶 110-130 rpm

搖床振幅

50 mm

培養(yǎng)基

CelCulSF293 Cell Culture Medium(Serum-free)

接種密度

0.5×106 cells/mL

培養(yǎng)溫度

37℃

CO2%

5%

相對濕度

80%RH

 

//
 

細胞馴化

 

通常,在原用培養(yǎng)基中生長的HEK293細胞需要轉(zhuǎn)移到由50%原用培養(yǎng)基和50%培養(yǎng)(CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium)組成的新培養(yǎng)基中進行適應(yīng)性生長。

 

 
01
 

將原用培養(yǎng)基中生長的細胞移入新培養(yǎng)基(50% CelCulSF™293 Cell Culture Medium + 50% 原用培養(yǎng)基 ),接種密度為0.5×106/mL。

02
 
細胞培養(yǎng)至48±3小時后,建議按此方法進行至少3次細胞適應(yīng)性傳代。當(dāng)細胞活率高于90%時轉(zhuǎn)入100% CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium培養(yǎng)基培養(yǎng)。

 

//
 

細胞培養(yǎng)

 
 
01
 

37℃水浴中預(yù)熱CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium培養(yǎng)基;

02
 
接種密度為1.0×10viable cells/mL。培養(yǎng) 48±3 小時后,取0.5mL細胞懸液,用細胞計數(shù)儀分析活細胞密度(×106細胞 /mL)和活細胞(%);
03
 
傳代前,如果細胞密度低于2.0 ×106/mL,或細胞活率低于80%,需要150g - 300g,離心5分鐘處理細胞。輕輕棄上清,使用100%新鮮培養(yǎng)基按0 .5×106/mL重懸細胞;
04
 
如果傳代前細胞密度大于2.0×106/mL且活細胞率高于85%,則將適量的細胞懸液轉(zhuǎn)移到新?lián)u瓶(或TPP管)中,并用新鮮培養(yǎng)基直接調(diào)整最終培養(yǎng)體積進行細胞傳代,然后在規(guī)定的環(huán)境條件下培養(yǎng)細胞;
05
 
如果傳代比(傳代后的種子密度:傳代前的細胞密度)大于1:4,細胞需要離心并重新懸浮在100%新鮮培養(yǎng)基中。

 

//
 

蛋白表達,腺相關(guān)病毒病毒等在懸浮293細胞上的表達

 
 
01
 

細胞在CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium 中培養(yǎng);

02
 
72±3 小時后,取 0.5 mL細胞懸液,用細胞計數(shù)儀分析活細胞密度(×106/mL)和細胞活率(%);
03
 
用相同體積的預(yù)熱培養(yǎng)基稀釋培養(yǎng)物(培養(yǎng)物體積:待添加培養(yǎng)基體積=1:1);
04
 
根據(jù)病毒培養(yǎng)工藝,接種病毒,并繼續(xù)培養(yǎng)病毒至收獲??筛鶕?jù)實際生產(chǎn)工藝進行優(yōu)化或聯(lián)系產(chǎn)品相關(guān)負責(zé)人。

 

 

 

FAQ

 
 

293 無血清培養(yǎng)基可以用于哪些細胞類型?

主要適用于293細胞系,包括HEK293F,HEK293T,HEK293H,Expi293等不同亞型的細胞。

 

 

與傳統(tǒng)含血清培養(yǎng)基相比,無血清培養(yǎng)基有哪些優(yōu)勢?

無血清培養(yǎng)基具有以下優(yōu)勢:成分明確且穩(wěn)定,避免血清批次差異帶來的影響;降低潛在的污染風(fēng)險;簡化實驗操作流程;優(yōu)化細胞生長,滿足不同實驗需求;具有更高的成本效益。

 

 

如何判斷 293 細胞在無血清培養(yǎng)基中的生長狀態(tài)是否良好?

可以從以下幾個方面判斷:細胞形態(tài)正常;細胞增殖速度穩(wěn)定;培養(yǎng)基顏色變化正常,未出現(xiàn)渾濁等異?,F(xiàn)象。

 

 

無血清培養(yǎng)基的保存條件是什么?

建議將293無血清培養(yǎng)基保存在2 - 8℃冰箱中,避免光照和高溫。開封后應(yīng)盡快使用,避免長時間存放。

 

 

在使用無血清培養(yǎng)基過程中,如果出現(xiàn)細胞生長不良怎么辦?

首先檢查培養(yǎng)條件是否符合要求,如溫度、CO2、濃度等??梢赃m當(dāng)調(diào)整細胞接種密度、換液頻率等。如果問題仍然存在,可以聯(lián)系Yeasen技術(shù)支持團隊,尋求專業(yè)的解決方案。

 

選擇 Yeasen 293無血清培養(yǎng)基,讓你的細胞培養(yǎng)之路更加順暢無憂!

 

 

訂購信息

 

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品貨號

規(guī)格

CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium(Serum-free) 293細胞無血清培養(yǎng)基

40141ES80

1000 mL

CelCulSF™ Insect Cell Culture Medium(Serum-free) 昆蟲細胞無血清培養(yǎng)基

40140ES80

1000 mL

CelCulSF™ Hybridoma Cell Culture Medium(Serum-free) 雜交瘤細胞無血清培養(yǎng)基

40143ES80

1000 mL

Serum-Free CellStore Freezing 無血清細胞凍存液
(推薦搭配使用無血清凍存液,效果更佳)

40151ES50

50 mL

40151ES60

100 mL



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