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原代細胞（Primary cells）是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養(yǎng)的細胞。組織主要指：組織器官、外周血及胚胎等，這些細胞保留了其在生物體內(nèi)的基本生物學特性和功能。針對不同的組織解離可選用不同的膠原酶、分散酶、彈性蛋白酶和透明質(zhì)酸酶等，選擇較為復雜，Cebrary®Tissue Digestion Solution組織消化液（10x）能將不同動物組織樣本溫和、快速地消化解離為細胞懸液或細胞團塊，可用于后續(xù)類器官的構(gòu)建和細胞分離培養(yǎng)。該組織消化液廣泛適用于多種實體腫瘤及正常組織標本在體外原代培養(yǎng)的消化解離。
應(yīng)用方向
適用于組織消化包括正常動物組織和腫瘤組織等原代培養(yǎng)的消化解離。
產(chǎn)品特點
組分明確：組分明確，無動物源成分；
安全性高：反應(yīng)過程溫和，對細胞損傷小，細胞活率高；
批次穩(wěn)定性好：嚴格生產(chǎn)質(zhì)檢過程保證批次間性能穩(wěn)定；
污染物檢測： 經(jīng)檢測無支原體、細菌和真菌殘留；
單批產(chǎn)量高：單批產(chǎn)量在10L級別以上；
保質(zhì)期久：10x濃縮原液，保質(zhì)期長達2年；
兼容性好：可與大部分類型的體組織和腫瘤組織兼容。
組織消化過程
將動物組織（以腫瘤組織為例）樣本放入生物安全柜內(nèi)，去除組織表面壞死、纖維化或凝結(jié)xue塊等活性不良組織，用預(yù)冷的含原代抗生素的DPBS清洗數(shù)次；
使用手術(shù)剪刀或組織解離器將組織剪切成1-3mm小塊，將組織碎塊轉(zhuǎn)移至50mL 離心管中，預(yù)冷的含原代抗生素的 DPBS清洗數(shù)次；
棄去DPBS，保留組織沉淀，向離心管中加入適量無血清培養(yǎng)基，加入1/10體積的組織消化液，用封口膜將離心管密封，置于37℃水浴箱或恒溫水浴播床中進行組織消化。根據(jù)組織類型不同，消化時間控制在 30min左右，難消化的組織亦可多次消化；
消化完成后，使用1ml的移液槍或者無菌巴氏滴管吹打懸液20-50次，使細胞與結(jié)締組織充分分離：加入適量血清或者BSA溶液削弱消化甚至終止消化；
收集上清含細胞液體，用70μm-100μm 濾網(wǎng)過濾，去除雜質(zhì)；
無菌收集濾液后，4℃，800-1200rpm/min，離心5min；棄去上清，保留細胞沉淀；
DPBS 再次清洗細胞沉淀后，4℃、800-1200rpm/min，離心5 min；
棄去上清，保留細胞沉淀用于后續(xù)類器官培養(yǎng)。
注意事項：消化酶須在37度左右好，收集后的細胞4度短暫保存，可依據(jù)組織性質(zhì)，適當調(diào)整消化液用量比例，一般8%-12%。
消化結(jié)果
產(chǎn)品訂購
產(chǎn)品類型 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 |
組織消化液 | Cebrary® Tissue Digestion Solution 組織消化液 | 41423ES10/30/60 | 10/30/100 mL |
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