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Sf9和桿狀病毒(AcNPV)殘留DNA檢測試劑盒,監(jiān)督表達(dá)系統(tǒng)雜質(zhì)殘留!
背景介紹已知,生物技術(shù)藥物是指采用DNA重組技術(shù)或其他現(xiàn)代生物技術(shù)研制的蛋白質(zhì)或核酸類藥物。而蛋白質(zhì)藥物又包含多肽、單克隆抗體、基因工程抗體和重組疫苗等。因此,如何表達(dá)生產(chǎn)穩(wěn)定性高、純度好、質(zhì)量均一的蛋白質(zhì)是這些蛋白藥物的關(guān)鍵。蛋白表達(dá)系統(tǒng)的選擇對于研發(fā)和生產(chǎn)高效蛋白質(zhì)產(chǎn)品就變得尤為重要了,不同的表達(dá)系統(tǒng)提供了多種途徑,以滿足對于表達(dá)水平、折疊狀態(tài)、純度和可溶性等方面的不同需求。目前常用的表達(dá)系統(tǒng)主要有:原核表達(dá)系統(tǒng)和真核表達(dá)系統(tǒng)兩大類,而原核表達(dá)系統(tǒng)中較常用的是大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)和枯草芽孢桿菌表 -
為什么非要檢測rcAAV,rcAAV到底有什么風(fēng)險(xiǎn)?
腺相關(guān)病毒AAV簡介早期基因治療曾嘗試腺病毒載體,但因其免疫原性過強(qiáng)和導(dǎo)入的環(huán)狀DNA可能在細(xì)胞分裂中丟失而被AAV取代。AAV是一種無包膜單鏈DNA病毒,屬于細(xì)小病毒家族。AAV作為最早通過歐盟FDA認(rèn)證的基因治療載體,因其具有宿主范圍廣、非致病性、低免疫原性、長期穩(wěn)定表達(dá)外源基因、良好的擴(kuò)散性能和物理性質(zhì)穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn),已被廣泛地應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和臨床試驗(yàn)中。目前已發(fā)現(xiàn)AAV有12種亞型及120多種變型,并逐步用于基因藥物研發(fā)。rAAV攜帶的蛋白衣殼與野生型AAV幾乎相同,然而衣殼內(nèi)的基因組中編碼 -
新技術(shù)分享:PIP-seq,無需配套儀器的單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)!
如火如荼的單細(xì)胞技術(shù)目前被大家廣為接受,而且單細(xì)胞技術(shù)除了在科研研究領(lǐng)域遍地開花,也廣泛應(yīng)用于抗體發(fā)現(xiàn)、藥物評價(jià)、用藥靶向指導(dǎo)等領(lǐng)域?,F(xiàn)階段,單細(xì)胞測序方法普遍需要依賴于微孔板裝置、微流體裝置或流體處理。而且微流控、微孔板等裝置價(jià)格不菲,成為單細(xì)胞技術(shù)研究的一大壁壘。2023年3月6日,NatureBiotechnology上發(fā)表了一篇關(guān)于PIP-seq(Particle-templatedinstantpartitionsequencing)的文章——ClarkIC,FontanezKM,Me -
PCR數(shù)據(jù)處理秘籍:干貨滿滿,看完還想再來一篇!
通常我們做完熒光定量PCR后,會通過下機(jī)數(shù)據(jù)來分析基因表達(dá)情況。這篇干貨將會給大家詳細(xì)分享熒光定量PCR數(shù)據(jù)處理方法,希望能給小伙伴們一定的幫助。相對定量法中常見的是比較Ct法,其中主要包括△△Ct法,Pfaffl法和△CT法,目前諸多科研人員采用最多的是△△Ct法。雖然該方法應(yīng)用廣泛,但是很多人卻不了解其中的原理。知其然,知其所以然。小翌接下來給小伙伴們講一下△△Ct法的原理?!鳌鰿t法原理Ct值:每個(gè)反應(yīng)管中熒光信號達(dá)到設(shè)定的熒光閾值時(shí)所需要的循環(huán)數(shù)。起始模板拷貝數(shù)越多,Ct值則越小。理論條 -
01無血清培養(yǎng)細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)需要在培養(yǎng)基中加入血清,以維持細(xì)胞的生長和存活。而血清,尤其是牛血清,成分復(fù)雜、批間差大和存在病原體污染的可能性,不確定的動物源性對細(xì)胞培養(yǎng)會帶來顯著的外源物質(zhì)污染風(fēng)險(xiǎn),因此科研人員對無血清培養(yǎng)基的需求日益增加,目前無血清培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于疫苗生產(chǎn)、單抗、活性蛋白等生物制品和細(xì)胞治療等的領(lǐng)域中。無血清培養(yǎng)基中不含血清,為能夠?qū)崿F(xiàn)與含血清培養(yǎng)基相似的維持和促進(jìn)細(xì)胞生長的功能,其中必須添加白蛋白(Albumin)、胰島素(Insulin)和轉(zhuǎn)鐵蛋白(Transferrin)
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干貨 | 基因編輯探秘系列之在細(xì)胞與基因治療領(lǐng)域的應(yīng)用
2023年11月16日,VertexPharmaceuticals和CRISPRTherapeutics共同宣布基因編輯療法產(chǎn)品CASGEVY™(Exagaglogeneautotemcel)獲英國藥品監(jiān)管機(jī)構(gòu)MHRA有條件批準(zhǔn)上市,用于治療治療鐮狀細(xì)胞?。⊿CD)和輸血依賴性β-地中海貧血(TDT),是獲批上市的CRISPR基因編輯藥物,12月8日,美國食品和藥物管理局(FDA)也批準(zhǔn)了該基因編輯治療藥物。這是基因編輯治療里程碑事件,代表著一項(xiàng)重大的科學(xué)進(jìn)步可以讓數(shù)以萬計(jì)的患者受益。圖1.CA -
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,“黑膠蟲”污染常常成為一大難題,“黑膠蟲”及其分解的復(fù)合物是一種細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)常見的細(xì)胞污染物。它在普通倒置顯微鏡的低倍鏡下呈現(xiàn)點(diǎn)狀或碎片狀的黑色顆粒,在高倍鏡下可看到這些黑色顆粒進(jìn)行原地振動(類似布朗運(yùn)動)。想要告別黑膠蟲污染,首先需要準(zhǔn)確識別污染類型。一旦確認(rèn)為黑膠蟲污染,便可以采取相應(yīng)的措施,使用黑膠蟲清除劑(60725ES)來解決問題。01判斷黑膠蟲污染的方法01培養(yǎng)基不渾濁,但在顯微鏡下觀察細(xì)胞時(shí),細(xì)胞周圍和培養(yǎng)液中有很多小黑點(diǎn),且隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長小黑點(diǎn)逐漸增多,更
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N6-甲基腺苷(m6A)是高等真核生物信使RNA(mRNA)內(nèi)部豐富的修飾,與人類的發(fā)育,免疫,腫瘤生成和轉(zhuǎn)移,干細(xì)胞更新,脂肪分化等過程息息相關(guān),目前m6A甲基化修飾已成為科研中一個(gè)重要且熱門的研究方向,因此,開發(fā)m6A甲基化的檢測方法也尤為重要。甲基化RNA免疫共沉淀高通量測序(MeRIP-seq/m6A-seq)是目前研究m6A甲基化修飾使用廣泛的技術(shù)之一。該技術(shù)利用特異性識別m6A甲基化修飾的抗體,對細(xì)胞內(nèi)具有m6A甲基化修飾的RNA片段進(jìn)行免疫共沉淀。然后,對沉淀下來的RNA片段進(jìn)行高