聯系電話
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級會員·12年
具體成交價以合同協議為準
- 聯系人：
- 曹女士
- 電話：
- 400-6111-883
- 手機：
- 售后：
- 4006-111-883
- 傳真：
- 86-21-34615995
- 地址：
- 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號3樓
- 網址：
- www.yeasen.com
掃一掃訪問手機商鋪
產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 貨號 | 46007ES01 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè),制藥,綜合 |
產品介紹
試劑盒組成：
名稱 | 規(guī)格 | 保存方法 |
JC-1 （200×） | 5× 100ul/管 | -20℃避光 |
JC-1染色緩沖液（5×） | 80mL | -20℃避光，也可4℃保存 |
CCCP（10 mM） | 20 uL | -20℃避光 |
超純水 | 90 mL | 4℃保存 |
檢測原理：
JC-1法線粒體膜電位檢測試劑盒是一種以JC-1 為熒光探針，快速靈敏地檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒，可以用于檢測線粒體的健康狀態(tài)，也是用來檢測細胞早期凋亡的常用方法。
是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針。JC-1染料表現出電勢依賴性的積聚在線粒體內。正常線粒體內，JC-1聚集在線粒體基質中形成聚合物，聚合物發(fā)出強烈的紅色熒光（Ex=585 nm, Em=590 nm）；不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失，JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中，產生綠色熒光（Ex=514 nm, Em=529 nm）。因此顏色的變化非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。線粒體的去極化程度也可以通過紅/綠熒光強度的比例來衡量。
線粒體膜電勢的破壞是細胞凋亡早期發(fā)生的一個標志性事件。細胞受到凋亡誘導后線粒體膜電位的變化使得膜的通透性發(fā)生改變。膜通透性的增加，使得線粒體蛋白包括細胞色\素C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸內切酶G（EndoG）、凋亡誘導因子（AIF）等從線粒體基質釋放到細胞漿。細胞色\素C的釋放伴隨膜電位的*喪失，進而引發(fā)細胞凋亡酶的級聯效應。
JC-1染料的優(yōu)勢：
◆ 染料用途廣：可用來檢測各種細胞類型包括單核細胞和神經細胞，以及完整組織和純化的線粒體；
◆ 染料特異性更高：與其他的陽離子染料如DiOC6（3）和羅丹明123相比，對線粒體膜電位變化的特異性高于質膜電位變化，對線粒體去極化檢測的檢測*性更好；
◆ 紅綠色熒光強度比率只受線粒體膜電位的變化，不受線粒體大小，形狀，密度的差異干擾；
◆ 檢測靈敏度強，對細胞應激反應的微小異質性都能辨別；
JC-1試劑盒操作步驟（詳細步驟請見說明書）：
1. JC-1 染色工作液的配制
取適量JC-1（200×），按照每50μL JC-1（200×）加入8mL 超純水的比例稀釋JC-1。劇烈震蕩充分溶解并混勻JC-1。然后再加入2mL JC-1染色緩沖液（5×），混勻后即為JC-1染色工作液。
2. 陽性對照的設置
CCCP（10mM）推薦按照1∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中，稀釋至10μM，處理細胞20分鐘。對于大多數細胞，通常10μM CCCP處理20分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3. 線粒體膜電位檢測（懸浮細胞）
（1）取1.0～6.0×105 細胞，重懸于0.5mL 細胞培養(yǎng)液中，細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入0.5mL JC-1染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養(yǎng)箱中37℃孵育20分鐘。
（3）孵育期間按照每1mL JC-1染色緩沖液（5×）加入4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4） 37℃孵育結束后，600g 4℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1染色緩沖液（1×）洗滌2 次：加入1mL JC-1染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4℃離心3～4分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4℃離心3～4分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量JC-1染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
4. 線粒體膜電位檢測（貼壁細胞）
5. 線粒體膜電位檢測（純化的線粒體）
6. 熒光觀測和結果分析
注意：
CCCP陽性對照屬于線粒體電子傳遞鏈抑制劑，有毒性。操作時需避免直接接觸皮膚；
為了個人的安全和健康，請戴手套，口罩還有實驗服進行操作；
其他相關產品：
1）JC-1 貨號：QC1018 規(guī)格：1mg
2）羅丹明123 貨號：QC1021 規(guī)格：5mg
訂購：
貨號 | 名稱 | 產地 | 規(guī)格 | 報價 | *（元） |
46007ES01 | JC-1法線粒體膜電位檢測試劑盒 | YEASEN | 100T | 800 | 800 |
46006ES10 | JC-1法線粒體膜電位檢測試劑盒 | YEASEN | 10mg | 441 | 374.85 |
