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參考價: | 面議 |
- 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):2126更新時間:2023-03-07 15:11:13
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | 20401ES60 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
rEK重組腸激酶 Recombinant Enterokinase
產(chǎn)品描述
rEK重組腸激酶 Recombinant Enterokinase是高純度的牛腸激酶輕鏈亞基,它有著和天然提取的腸激酶同樣特異的切割酶活性,切割位點Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合標簽,本rEK具有比天然酶更高的切割活性。
本品為采用重組大腸桿菌分泌表達的高純度、高活性、高特異的牛腸激酶,適用范圍廣,并且在各種去垢劑和變性劑存在的條件下仍具有部分活性。本品不含標簽,由于具有酶切活性,酶切反應(yīng)使用量少,不影響下游蛋白應(yīng)用,故后續(xù)不需將其去除。
產(chǎn)品組分
編號 | 組分 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | ||||
20401ES60 | 20401ES70 | 20401ES76 | 20401ES80 | 20401ES90 | ||
20401 | rEK重組腸激酶 | 100 U | 200 U | 500 U | 1000 U | 5000 U |
運輸和保存方法
冰袋運輸。試劑盒內(nèi)各組分-20°C保存兩年,盡量避免反復(fù)凍融(5次以內(nèi)沒問題)。
基本特性
來源(Source) | E.Coli |
分子量(Molecular Weight) | 理論值25.850 kDa |
外觀(Appearance) | 無菌液體 |
酶濃度(Enzyme Concentration) | ≥5 U/uL |
活性定義(Activity Definition) | 一個活性單位定義為25°C,12-16 h,在25 mM Tris-HCl,Ph 8.0緩沖體系下,將500 μg帶有腸激酶酶切位點的融合蛋白切開95%所需要的酶量 |
內(nèi)毒素檢測(Endotoxin) | 用LAL法測定內(nèi)毒素含量小于1 EU/μg |
質(zhì)量保證(Quality assurance) | 經(jīng)多次柱純化,SDS-PAGE膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶;本制品中不含有非特異性的蛋白酶切活性 |
常見影響腸激酶活性的因素(Influence factors) | >2 M尿素,>200 mM NaCl,>20 mM β-ME,>0.1%SDS,>50 mM咪唑,或>5%甘油 |
應(yīng)用舉例
【注】該酶效力高且待切蛋白結(jié)構(gòu)性質(zhì)不同,建議先進行預(yù)實驗摸索酶使用濃度及酶切反應(yīng)時間。
1)反應(yīng)體系
融合蛋白 | 0.05-0.1 mg(蛋白濃度:0.1-1 mg/mL) |
Enterokinase | 0.1-0.2 U |
緩沖體系 | 25 mM Tris-HCL 8.0 |
注:緩沖液的使用體積等比例融合蛋白和酶使用量的總和。
2)反應(yīng)條件:25°C過夜酶切(注:酶切需要16-24 h)。
【注】重組腸激酶可使用25 mM Tris-HCl pH 8.0稀釋成每1 μL含0.1單位的溶液使用。
反應(yīng)條件:4°C低溫酶切條件,酶切需要48-64 h 或者增加2-3倍酶量。
注意事項
1)本產(chǎn)品所講述的緩沖體系需要自行配置。
2)在>200mM咪唑,或>200mM NaCl,或>5%甘油,酶切會受到影響。如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種,為獲得理想的酶切結(jié)果,請先將樣品透析到25 mM Tris-HCl 8.0緩沖液中,然后再進行酶切實驗;若不方便透析,可將樣品稀釋,使得各組分低于干擾濃度后再酶切,酶的用量與蛋白比例不變;若干擾因素很多,且不便去除,需要適當增加酶量或延長酶切時間,有助于得到理想的酶切效果。
3)磷酸鹽對Enterokinase有很強的抑制作用,痕量的磷酸鹽都會嚴重影響Enterokinase的活性,因此在酶切體系內(nèi)不能存在磷酸鹽。
4)本品是具有高酶活力重組腸激酶,切割蛋白使用量少,可不考慮除去。
5)蛋白酶切效果不好,可適當增加酶量,或適當延長酶切時間。
6)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
貨號 | 名稱 | 產(chǎn)地 | 規(guī)格 | 報價 | *(元) | 庫存 |
30307ES10 | 重組腸激酶 Recombinant Enterokinase | YEASEN | 100U | 200 | 180 | 是 |
30307ES20 | 重組腸激酶 Recombinant Enterokinase | YEASEN | 200U | 350 | 320 | 是 |
30307ES50 | 重組腸激酶 Recombinant Enterokinase | YEASEN | 500ul | 700 | 650 | 是 |
30307ES60 | 重組腸激酶 Recombinant Enterokinase | YEASEN | 1000U | 1200 | 1120 | 是 |
30307ES92 | 重組腸激酶 Recombinant Enterokinase | YEASEN | 5000U | 5000 | 4680 | 一周內(nèi) |