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PI Staining Solution PI碘化丙啶染液

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

PI Staining Solution PI碘化丙啶染液（Propidium Iodide，PI）是一種常用的細(xì)胞核熒光染料，作為一種溴化乙錠（EB）的類似物，能夠嵌入堿基對(duì)之間實(shí)現(xiàn)與雙鏈DNA結(jié)合。PI經(jīng)488 nm熒光激發(fā)，產(chǎn)生相對(duì)較大的斯托克司頻移后，并在617 nm處具有zui大發(fā)射波長。另外，PI不能穿透細(xì)胞膜而被排斥在活細(xì)胞外，但是可以穿過破損的細(xì)胞膜而對(duì)核染色。利用以上特性，PI可作為細(xì)胞活力分析的熒光探針之一。不僅可單獨(dú)使用；也可以同Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活細(xì)胞熒光探針一起使用，同時(shí)對(duì)活細(xì)胞和死細(xì)胞染色和鑒定。也能夠與488 nm激發(fā)的熒光素如FITC和PE等聯(lián)合使用。

本品是無菌的即用型PI染色液（溶于PBS），可進(jìn)入死細(xì)胞內(nèi)與DNA結(jié)合，并被活細(xì)胞排斥在外，適合用于流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞活力分析。PI單染用FL2通道檢測，若與FITC或PE標(biāo)記抗體/蛋白聯(lián)合使用FL3通道檢測。

運(yùn)輸與保存方法

冰袋（wet ice）運(yùn)輸。4 oC避光保存，6個(gè)月穩(wěn)定。

使用方法

1）收集細(xì)胞，計(jì)數(shù)，zui高以1 x 106 cells/100 μl的量加入FACS分選管；

2）加2ml PBS（或HBSS）清洗細(xì)胞，300 x g離心5 min，去上清。重復(fù)一次。

注：若需要用抗體標(biāo)記表面抗原，可在此步之后進(jìn)行。PI不適合與檢測胞內(nèi)分子的抗體聯(lián)合使用。

3）細(xì)胞清洗后，用100 μl流式細(xì)胞染色緩沖液（flow cytometry staining buffer）重懸細(xì)胞；加入10 μl PI染色液，輕柔混勻，冰上或者室溫避光孵育10-15 min。

4）直接上機(jī)進(jìn)行流式分析。注：PI染色后不可再清洗細(xì)胞。PI染色孵育后盡快上機(jī)檢測。

注意事項(xiàng)

1） 碘化丙啶（PI）是已知的誘變劑，操作過程中一定要做好防護(hù)工作避免與PI的直接接觸。另外PI溶液在丟棄之前需要先經(jīng)過活性炭處理。

2） 流式細(xì)胞染色緩沖液可配制如下：1×PBS (w/o Ca2+ and Mg2+) + 0.5-1% BSA（或 5% FBS）＋0.1% 疊氮鈉。也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室自身體系調(diào)整。

3） 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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