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- 11807ES76 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):848更新時間:2017-12-21 01:10:26
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- www.yeasen.com
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本品是經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可用于DNA的化學轉化。經(jīng)使用pUC19質(zhì)粒檢測,本品轉化效率可達108 cfu/µg,廣泛適用于高效的DNA克隆和質(zhì)粒擴增,能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定遺傳。
JM109 Chemically Competent Cell
JM109化學感受態(tài)細胞
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格(元) |
JM109 Chemically Competent Cell JM109化學感受態(tài)細胞 | 11807ES76 | 100 μl×5管 | -80℃ | 110.00 |
JM109 Chemically Competent Cell JM109化學感受態(tài)細胞 | 11807ES80 | 100 μl×10管 | -80℃ | 189.00 |
產(chǎn)品描述
在基因重組實驗中,常使用感受態(tài)細胞攝取外源DNA以制備基因文庫、重組質(zhì)粒以及進行亞克隆等。
本品是經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可用于DNA的化學轉化。經(jīng)使用pUC19質(zhì)粒檢測,本品轉化效率可達108 cfu/μg,廣泛適用于高效的DNA克隆和質(zhì)粒擴增,能保證高拷貝質(zhì)粒的穩(wěn)定遺傳。本品適用于藍白斑篩選,另對recA1和endA1進行特定的改造使其更能保證克隆DNA的穩(wěn)定性以及更有利于高純度質(zhì)粒DNA的提取。
JM109感受態(tài)細胞基因型:recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 e14-(mcrA-) supE44 relA1 △(lac-proAB)/F’ [traD36 proAB+ lac Iq lacZ △M15]。
產(chǎn)品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | |
11807ES76(100 μl × 5管) | 11807ES80(100 μl × 10管) | ||
11807-A | JM109感受態(tài)細胞 | 100 μl × 5 | 100 μl × 10 |
11807-B | pUC19(0.1 ng/μl) | 5 μl × 1 | 5 μl × 1 |
運輸與保存方法
干冰運輸。
JM109感受態(tài)細胞-80℃保存,pUC19質(zhì)粒-20℃保存。有效期半年。
注意事項
- 感受態(tài)細胞應保存在-80℃,不可反復凍融和放置時間過長,以免降低感受態(tài)細胞的轉化效率。
- 整個轉化操作,嚴格根據(jù)相應溫度及無菌條件要求進行。
- 為確保zui高轉化效率,整個操作過程應盡量輕柔,并保持低溫,避免移液槍吹吸。
- 為防止轉化不成功,可以保留部分連接反應液,以重新轉化,zui低化實驗可能遇到的風險。
使用方法
- 取100 μl感受態(tài)細胞置于冰浴中融化。
- 向100 μl感受態(tài)細胞懸液中加入2-10μl目的DNA或連接產(chǎn)物,輕輕旋轉離心管以混勻內(nèi)容物,在冰浴中靜置20min。
- 將離心管置于42℃水浴中放置90s,然后快速將管轉移到冰浴中,使細胞冷卻2min,該過程不要搖動離心管。
- 向離心管中加入500μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床振蕩培養(yǎng)60min(200 rpm), 目的是促使菌體復蘇,抗性基因表達。
- 將離心管內(nèi)容物混勻,根據(jù)實驗要求(質(zhì)粒,重組連接產(chǎn)物轉化),吸取不同體積已轉化的感受態(tài)細胞加到含相應抗生素的SOB或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌玻棒輕輕的將細胞均勻涂開。室溫正置10 min,待液體被吸收后,倒置平板,37℃培養(yǎng)12-16 h。
附錄一:常用抗生素工作濃度
抗生素 | 翊圣貨號 | 常用工作濃度 |
Ampicillin 氨芐青霉素 | 60203ES10 | 100 μg/ml |
Carbenicillin羧芐青霉素 | 60202ES08 | 100 μg/ml |
Chloramphenicol 氯霉素 | 60205ES10 | 33 μg/ml |
Kanamycin 卡那霉素 | 60206ES10 | 30 μg/ml |
Streptomycin 鏈霉親和素 | 60211ES60 | 25 μg/ml |
Tetracycline 四環(huán)素 | 60212ES25 | 15 μg/ml |
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11807ES76 | JM109 Chemically Competent Cell JM109化學感受態(tài)細胞 | 100 μl × 5管 | 110.00 |
11807ES80 | JM109 Chemically Competent Cell JM109化學感受態(tài)細胞 | 100 μl × 10管 | 189.00 |
11902ES03 | pUM19-T Vector TA克隆載體 | 1μg | 350.00 |
11902ES08 | pUM19-T Vector TA克隆載體 | 5μg | 1470.00 |