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Hematoxylin and Eosin Staining Kit  

蘇木素伊紅（H&E）染色試劑盒

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

蘇木素（Hematoxylin）是一種從洋蘇木提取的天然染料，以Mayer’s，Gill’s和Harris等多種配方形式普遍用于細胞核，線粒體，粘蛋白，彈性纖維，肌肉，膠原，髓鞘和磷脂的染色，檢測原理是帶正電荷的堿性染料蘇木素與帶負電荷的酸性物質(zhì)結(jié)合使其被染成藍色。

伊紅（Eosin），又稱曙紅，一種紅色熒光染料，在水中解離成帶負電荷的陰離子，能夠與蛋白質(zhì)氨基中帶正電荷的陽離子結(jié)合從而使細胞質(zhì)、紅細胞、膠原、肌纖維、結(jié)締組織、嗜伊紅顆粒等染成不同程度的紅色或者粉紅色。作為一種酸性染料，常用于蘇木素-伊紅染色法（H&E Staining），用作蘇木素的復染劑。

蘇木素-伊紅（H&E）的結(jié)合染色使得細胞質(zhì)呈紅色，細胞核顯藍紫色，紅細胞呈桔紅色，其它成分呈深淺不同的紅色，可用于免疫組化中組織切片，血涂片，骨髓切片的染色，也能用于細胞涂片的染色，是細胞生物學、組織學及病理學等學科*的zui常規(guī)染色方法之一。

產(chǎn)品組分

運輸和保存方法

室溫運輸；室溫保存，有效期至少1年。

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、樣本前處理

1）石蠟切片

① 脫蠟：用無毒環(huán)保脫蠟劑或二甲苯脫蠟，10-15 min/次，共2缸2次；

② 梯度入水：95%、70%、30%乙醇各2 min，溫水2 min，如果脫蠟不干凈，需再次溫水2 min。此時玻片上除樣本部分略有水分外，玻片其余部分均應(yīng)無水珠。

2）冰凍切片

① 回溫：按以下方法將預先制作好的并保存在-20℃的冰凍切片取出回溫（選取其中一種即可）：

A、室溫放置回溫5-10 min。

B、37℃孵育箱中進行回溫。

C、在37℃水浴箱中放置一個小盒子，再將從-20℃取出的冰凍切片放到小盒當中，目的是讓冰凍切片回溫至37℃。

② 水合：將回溫好的切片，水中浸泡30-60 s左右。

【注】：冰凍切片用防脫載玻片，切好的片子如不及時染色可放-20℃保存，染色前不要用乙醇等固定，否則易造成掉片。

3）血涂片及骨髓涂片

① 推片：取全血3 µL左右置載玻片上，將推玻片與載玻片保持30°角，置于血滴正前方，稍往后移與血滴接觸，血滴沿推片下緣散開，再勻速沿載玻片平面平穩(wěn)向前滑動，至血液鋪完血膜為止。

② 涂片空氣中自然干燥，95%乙醇固定2-3 min，水洗約30-60 s。

二、 樣本染色

1）組織潤濕：染色前用蒸餾水潤濕組織1-2 min，確保蒸餾水覆蓋整個組織，使水分均勻分布；

2）胞核染色：蘇木素染色液染色5 min，水洗3-5 s。

3）胞漿染色：可選用以下方法中其中一種進行染色：

① 伊紅染色液染色10-30 s，用增色液沖洗1-2次，濾紙吸干或自然晾干；

【注】：此法可立即封片鏡檢。

② 伊紅染色10-30 s，在水中蘸1-2次（10 s左右），濾紙吸干或自然晾干；

【注】：此法需無水乙醇脫水二次后再封片鏡檢。

③ 伊紅染色2 min，用蒸餾水洗1-2 min，濾紙吸干或自然晾干；

【注】：此法需無水乙醇脫水二次后再封片鏡檢。

三、 鏡檢結(jié)果

胞漿呈紅色，胞漿呈藍紫色，紅細胞呈桔紅色，其它成分呈深淺不同紅色。

【注】：若染色較淺，可延長染色時間或者重復染色一次；若染色較深，可延長水沖時間或者再重復梯度脫水一次。

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