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Prussian Blue Iron Stain Kit

普魯士藍(lán)染色試劑盒（核固紅法）

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

含鐵血黃素(Hemosiderin)是一種血紅蛋白源性色素，為金黃色或棕黃色顆粒，因其含鐵，且為金黃色，故稱為含鐵血黃素。當(dāng)紅細(xì)胞被巨噬細(xì)胞吞噬后，在溶酶體酶的作用下，血紅蛋白被分解為不含鐵的橙色血質(zhì)和含鐵的含鐵血黃素。

Perls普魯士藍(lán)反應(yīng) (Prussian blue reaction)又稱為含鐵血黃素染色，即經(jīng)過亞鐵qing化鉀和稀酸處理后可以產(chǎn)生藍(lán)色，常見于吞噬細(xì)胞或間質(zhì)內(nèi)，其染色原理在于亞鐵qing化鉀溶液使三價鐵離子從蛋白質(zhì)中被稀鹽酸分離出來，三價鐵與亞鐵qing化鉀反應(yīng)，生成一種不溶解的藍(lán)色化合物即三價鐵的亞鐵qing化物。該法也是診斷學(xué)中檢測靈敏度*的一種鐵染色方法。

本試劑盒可用于顯示局部組織內(nèi)的各種出血性病變，常見于吞噬細(xì)胞內(nèi)，可以很好地區(qū)分含鐵血黃素與其他色素。該染色液穩(wěn)定性好、可以長期保存、不易產(chǎn)生沉淀、應(yīng)用范圍廣，可以進(jìn)行復(fù)染。該染色液的復(fù)染液采用核固紅，是zui經(jīng)典、zui常用的復(fù)染液。

產(chǎn)品組分

運輸和保存方法

冰袋運輸。4℃，避光保存。有效期6個月。

使用方法

（一）石蠟切片染色：

1、組織固定于10%中性福爾馬林（未提供），常規(guī)脫水包埋。

2、切片厚度4 μm，常規(guī)脫蠟至水。

3、蒸餾水水洗1 min。

4、切片入Perls stain (見注意事項3)，浸染15～30 min。5、蒸餾水充分沖洗2～5 min。

6、入核固紅染色液，淡染細(xì)胞核5～10 min。

7、自來水沖洗1～5 s。

8、常規(guī)脫水透明，中性樹膠封固

（二） 冰凍切片染色：

1、無需脫蠟，直接迅速用蒸餾水沖洗2～3 min。

2、染色、封固步驟同石蠟切片的染色步驟，時間可以相應(yīng)縮短。

（三）細(xì)胞染色：

1、4%多聚甲醛固定10～20 min。

2、自來水沖洗2次，每次2 min。

3、蒸餾水沖洗2次，每次2 min。

4、染色、封固步驟同石蠟切片的染色步驟，但操作時間應(yīng)相應(yīng)延長。

結(jié)果參考

含鐵血黃素或三價鐵，結(jié)果呈藍(lán)色；細(xì)胞核、其他組織，結(jié)果呈紅色。

陰性對照

取相同切片脫蠟至水。入5%草酸孵育2～6 h，經(jīng)Perls stain，其余步驟同上。結(jié)果為陰性。

注意事項

1）使用前應(yīng)恢復(fù)室溫，用前請搖勻試劑。

2）工作液現(xiàn)配現(xiàn)用。

3）所有玻片及器具應(yīng)潔凈、無鐵污染（事先經(jīng)除鐵處理，尤其是載玻片），Perls stain染色時，應(yīng)根據(jù)樣本情況調(diào)整著色時間。

4）切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。組織固定常采用10%中性福爾馬林，經(jīng)普通福爾馬林長期固定后，組織會有損傷。避免使用酸性固定劑，鉻酸鹽處理也會妨礙鐵的保存。

5）所有切片都應(yīng)使用同一個陽性對照切片，選擇適合的對照非常重要。尸檢肺組織是一個很好的對照，包含相當(dāng)數(shù)量的鐵陽性巨噬細(xì)胞(心衰細(xì)胞)。

6）每次試劑使用后，請迅速蓋好密封保存，以免揮發(fā)及影響效果。

7）本試劑盒僅限于形態(tài)學(xué)染色觀察使用。

8）冰凍切片和細(xì)胞染色，根據(jù)具體情況摸索實驗條件。

9）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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