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參考價: | 面議 |
- 150T 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):707更新時間:2023-03-15 09:07:32
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HB161219
Immunohischemistry Kit for Rabbit Primary Antibody
兔免疫組化(IHC)檢測試劑盒
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格(元) |
Immunohischemistry Kit for Rabbit Primary Antibody 兔免疫組化(IHC)檢測試劑盒 | 36312ES64 | 150T | 4℃ | 548 |
產(chǎn)品描述
翊圣IHC Kit for Rabbit Primary Antibody可用于檢測以兔單克隆或多克隆抗體為一抗的免疫組化實驗,檢測原理基于高特異性高親和力的鏈霉親和素-生物素結(jié)合:已固定或培養(yǎng)細胞的抗原與一抗形成抗原抗體復(fù)合物,生物素化二抗特異性結(jié)合上述復(fù)合物,經(jīng)辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素特異性識別生物素(即抗原所在位置),zui后經(jīng)辣根過氧化物酶底物顯色即可檢測相應(yīng)抗原。
本品可適用于多種類型樣本,如石蠟包埋切片、冰凍切片、培養(yǎng)細胞涂片及血液標本等。
產(chǎn)品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 |
36312-A | Normal goat serum for IHC 封閉液 | 7.5ml |
36312-B | Biotin-conjugated Anti-Rabbit IgG 生物素標記抗兔二抗 | 7.5ml |
36312-C | HRP-conjugated Streptavidin HRP 標記鏈霉親和素 | 7.5ml |
36312-D | 20× DAB Substrate Buffer 20×DAB底物緩沖液 | 400µl |
36312-E | 20×H2O2 Stock Solution 20×H2O2濃縮液 | 400µl |
36312-F | 20×DAB Stock Solution 20×DAB濃縮液 | 400µl |
運輸和保存方法
冰袋運輸。4℃保存,有效期1年。勿冰凍!
注意事項
1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2)DAB是一潛在致癌物,使用時請注意自我防護。
3)檢測樣本時需同時做陰性對照和陽性對照。
準備試劑
1)二甲苯、乙醇、甲醇
2)去離子水
3)30%過氧化氫溶液(Cat# 36216)
4)1×PBS, PH7.4(Cat#60145)
5)蘇木素染色液(Cat#60502)
6)封片劑(Cat#36313)
使用方法
1 樣品準備
染色前用PBS浸泡組織或細胞涂片10min。石蠟切片于室溫下用二甲苯常規(guī)脫蠟、入水、抗原修復(fù)。
【注】:從此步驟起,嚴禁標本或組織切片干燥。
2 染色(以石蠟切片為例)
1)將處理好的石蠟切片放入3% H2O2-甲醇溶液中浸泡10min,以消除內(nèi)源性過氧化氫酶的作用。
2)清洗:PBS清洗3次,2 min/次。
3)封閉:加一滴封閉液于組織切片上(需*覆蓋待檢組織)孵育10min。
4)倒掉或吸干液體(不要沖洗)。
5)一抗孵育:每張切片加2滴(100μl)或適量一抗(需*覆蓋待檢組織),濕盒內(nèi)孵育30-60min。
6)清洗:PBS清洗3次,2 min/次。
7)二抗孵育:每張切片加一滴生物素標記抗兔二抗(需*覆蓋待檢組織),孵育10min。
8)清洗:PBS清洗3次,2 min/次。
9)酶孵育:每張切片加一滴HRP標記鏈霉親和素(需*覆蓋待檢組織),孵育10分鐘。
10)清洗:PBS清洗3次,2 min/次。
11)制備DAB顯色液。
按照【20×DAB濃縮液:20×H2O2濃縮液:20×DAB底物緩沖液:水=1:1:1:20】的比例進行配制顯色液,以1張切片為例,分別吸取上述3種溶液各2.5µl溶于50µl去離子水中,充分混勻即可。
【注】:① DAB顯色液需現(xiàn)配現(xiàn)用,避光放置,且在30min內(nèi)使用。
② 可根據(jù)需要一次染多張切片,各種試劑量按照上述比例放大即可。
12)顯色:向切片上滴加一滴上述DAB顯色液,室溫顯色2-5min(此步可在顯微鏡下控制顯色程度)。
13)自來水充分沖洗。
14)用合適復(fù)染劑復(fù)染,鹽酸酒精分化。
15)繼續(xù)后續(xù)脫水、透明、封片、鏡檢。
3 結(jié)果判定
陽性結(jié)果處顯處染棕黃或棕褐色。
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