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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·12年
41201ES25外泌體分離快速抽提試劑盒(細(xì)胞培養(yǎng)上清)
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 41201ES25 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：2329更新時(shí)間：2022-04-08 16:16:08
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 25 mL |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 41201ES25 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
HieffTM Quick exosome isolation kit（for Cell Culture Media）
細(xì)胞培養(yǎng)上清外泌體快速抽提試劑盒
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存 | 價(jià)格（元） | *（元） |
HieffTM Quick exosome isolation kit（for Cell Culture Media） 外泌體分離快速抽提試劑盒(細(xì)胞培養(yǎng)上清) | 41201ES25 | 25 mL | 室溫 | 2155.00 | 1500.00 |
41201ES50 | 50 mL | 室溫 | 3855.00 | 2700.00 |
產(chǎn)品描述
Exosome（外泌體）是由活細(xì)胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡，具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)；存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中；Exosome攜帶有多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息，不僅在細(xì)胞與細(xì)胞間的物質(zhì)和信息傳遞中起重要作用，更有望成為多種疾病的早期診斷標(biāo)志物。
外泌體分離快速抽提試劑盒(細(xì)胞培養(yǎng)上清)采用*的分離技術(shù)，可以快速?gòu)募?xì)胞培養(yǎng)上清中獲得大量完整的外泌體顆粒，適用于下游的細(xì)胞共培養(yǎng)、電鏡分析、Western Blot、熒光定量（qPCR）和高通量測(cè)序等應(yīng)用。
產(chǎn)品組分
編號(hào) | 組分 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | |
41201ES25 | 41201ES50 | ||
41201-A | Exosome isolation solution（ Cell Culture Media） | 25 mL | 50 mL |
運(yùn)輸和保存方法
室溫運(yùn)輸，本試劑盒可于室溫穩(wěn)定保存24個(gè)月。
注意事項(xiàng)
1）為了確保獲得的外泌體是來(lái)自于您的細(xì)胞，建議使用無(wú)外泌體的血清進(jìn)行培養(yǎng)。
2）如果想要進(jìn)一步純化外泌體，可以使用相應(yīng)抗體包被的磁珠進(jìn)行親和純化。
3）產(chǎn)品只針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)上清來(lái)源的外泌體分離，不適用血清/血漿中外泌體的抽提，如果需要進(jìn)行血清/血漿的外泌體分離，請(qǐng)選用血清/血漿外泌體快速抽提試劑盒。
4）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作方法
樣品制備：
收集細(xì)胞培養(yǎng)基至15 mL離心管中，3000×g，離心10 min；小心收集上清，并轉(zhuǎn)移至新的離心管中（勿破壞沉淀），于冰上放置待用。
【注】若收集的細(xì)胞上清不能及時(shí)使用，可先放置于-20℃或-80℃冷凍。使用時(shí)，于25℃水浴鍋中解凍，*溶解后置于冰上待用。
外泌體分離：
1）試劑準(zhǔn)備：使用前請(qǐng)將外泌體抽提試劑充分混勻。
2）上清預(yù)處理：吸取10 mL的細(xì)胞培養(yǎng)上清，加入2.5 mL外泌體抽提試劑（41201-A），渦旋振蕩混勻1 min，再放置于2℃至8℃靜置2h；
細(xì)胞培養(yǎng)上清 | 外泌體抽提試劑 | 用途 |
10 mL | 2.5 mL | 電鏡、NTA粒徑、Western Blot |
40 mL | 10 mL | 多基因核酸分析（qPCR）、測(cè)序 |
【注】上述用量的推薦，僅針對(duì)外泌體分泌量高的腫瘤細(xì)胞，對(duì)于外泌體分泌量少的樣品（例如干細(xì)胞）可以適當(dāng)加大上清的用量。其它規(guī)格的細(xì)胞上清可以根據(jù)外泌體抽提試劑的用量進(jìn)行等比例換算。
3）外泌體沉淀：取出裝有混合液的離心管于4℃，10000×g離心60 min，棄上清，收集沉淀（盡可能吸盡上清）。
4）外泌體重懸：取100 μL 1×PBS均勻吹打離心沉淀物，使其充分混勻，并轉(zhuǎn)移至新的1.5 mL離心管中；
【注】外泌體顆粒會(huì)附著在管壁上，重懸時(shí)可以使用PBS對(duì)管壁進(jìn)行反復(fù)吹打洗脫（避免劇烈吹打）。重懸用的PBS的量可以根據(jù)細(xì)胞上清的量進(jìn)行等比例增加，也可以根據(jù)可能獲得的外泌體的量進(jìn)行適當(dāng)?shù)脑黾踊蛘邷p少。
5）外泌體的洗滌：將含有外泌體的1.5mL離心管于4℃，12000×g離心2 min，棄沉淀，保留上清液。
6）外泌體的保存：純化后的外泌體可于4℃保存3天，-80℃ 長(zhǎng)期保存，避免反復(fù)凍融。
外泌體濃縮（可選）：
如果獲得的外泌體濃度比較低，可以使用密理博3kD孔徑的超濾管于4℃，14000×g離心10-30 min，內(nèi)管中即為純化后的外泌體顆粒。
外泌體除菌（可選）：
獲得的外泌體后期需要與細(xì)胞共培養(yǎng)，可以使用0.22 μm的濾器進(jìn)行過(guò)濾除菌。初次嘗試時(shí)，建議外泌體蛋白濃度在10-100 μg/mL內(nèi)做梯度摸索，選擇一個(gè)較為合適的條件。
結(jié)果展示：
NTA粒徑檢測(cè)：結(jié)果顯示通過(guò)Yeasen外泌體抽提獲得的外泌體分散性好，大小均一，峰形單一。 | |
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樣品來(lái)源：293T細(xì)胞培養(yǎng)上清。 檢測(cè)儀器：ZetaView 上清用量：10 mL |
表面標(biāo)志物分析：通過(guò)Western Blot分析外泌體表面蛋白，可以很好的檢測(cè)到TSG101，CD63和MHCC的存在。 | |
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樣品來(lái)源：293T細(xì)胞培養(yǎng)上清。 裂解方式：RIPA裂解液 上清用量：10 mL |
核酸分析：通過(guò)Agilent 4200分析，可以檢測(cè)到較為明顯的外泌體小RNA條帶，足以滿足下游高通量測(cè)序的需求。 | |
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樣品來(lái)源：293T細(xì)胞培養(yǎng)上清。 檢測(cè)儀器：Agilent 4200 抽提方法：Trizol 上清用量：40 mL |
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| 貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
外泌體分離 | 41202ES30 | HieffTM Quick exosome isolation kit（ for Serum/Plasma） 血清/血漿外泌體快速抽提試劑盒 | 30 mL | 1500.00 |
外泌體定量 | 20118ES60 | Lysis Buffer for WB/IP Assays 免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液 | 100 mL | 228.00 |
20201ES76 | BCA Protein Quantification Kit BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒（增強(qiáng)型） | 500 T(100 mL) | 288.00 | |
外泌體鑒定 （Western Blot） | 36230ES10 | Precast Protein Improve Gels, 8%-20%, 10 wells 8%-20%高分辨率梯度預(yù)制膠,10孔 | 1盒（10塊） | 236.00 |
36231ES10 | Precast Protein Improve Gels,,4%-20%, 10 wells 4%-20%高分辨率梯度預(yù)制膠,10孔 | 1盒（10塊） | 236.00 | |
36232ES10 | Precast Protein Improve Gels,, 8%, 10 wells 8% 高分辨率梯度預(yù)制膠,10孔 | 1盒（10塊） | 236.00 | |
36233ES10 | Precast Protein Improve Gels,, 10%, 10 wells 10%高分辨率梯度預(yù)制膠,10孔 | 1盒（10塊） | 236.00 | |
36234ES10 | Precast Protein Improve Gels,, 12%, 10 wells 12%高分辨率梯度預(yù)制膠,10孔 | 1盒（10塊） | 236.00 | |
36235ES10 | Precast Protein Improve Gels,, 15%, 10 wells 15%高分辨率梯度預(yù)制膠,10孔 | 1盒（10塊） | 236.00 | |
20351ES76 | GoldBand 3-color Regular Range Protein Marker（10-180 kDa）三色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn) | 2×250 μL | 585.00 | |
20352ES76 | GoldBand 3-color High Range Protein Marker（10-245kDa） 三色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn) | 2×250 μL | 615.00 | |
外泌體標(biāo)記 | 40726ES10 | DiI (DiIC18(3)) 細(xì)胞膜橙紅色熒光探針 | 10 mg | 398.00 |
40757ES25 | DiR Iodide (DiIC18(7)) 細(xì)胞膜深紅色熒光探針 | 25 mg | 988.00 |
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