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參考價(jià): | 面議 |
- 41202ES30 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù):1734更新時(shí)間:2022-06-01 11:26:28
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 30 mL |
---|---|---|---|
貨號(hào) | 41202ES30 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 在短時(shí)間內(nèi)獲得大量形態(tài)完好的外泌體 |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存 | 價(jià)格(元) | *(元) |
Hieff™ Quick exosome isolation kit(for Serum/Plasma) 血清/血漿外泌體提取試劑盒 | 41202ES30 | 30 mL | 室溫 | 2155.00 | 1500.00 |
產(chǎn)品描述
Exosome(外泌體)是由活細(xì)胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu);存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中;Exosome攜帶有多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息,不僅在細(xì)胞與細(xì)胞間的物質(zhì)和信息傳遞中起重要作用,更有望成為多種疾病的早期診斷標(biāo)志物。
血清/血漿外泌體提取試劑盒采用*的分離技術(shù),可以快速?gòu)难?血漿中獲得大量完整的外泌體顆粒,適用于下游的細(xì)胞共培養(yǎng)、電鏡分析、Western Blot、熒光定量(qPCR)和高通量測(cè)序等應(yīng)用。
產(chǎn)品組分
編號(hào) | 組分 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 |
41202-A | Exosome isolation solution( Serum/Plasma) | 41202ES30/30 mL |
運(yùn)輸和保存方法
室溫運(yùn)輸,本試劑盒可于室溫穩(wěn)定保存24個(gè)月。
注意事項(xiàng)
1、使用前請(qǐng)將外泌體抽提試劑(41202-A)充分混勻。
2、產(chǎn)品只針對(duì)血清/血漿樣本,不適用其它體液或者是細(xì)胞培養(yǎng)上清中外泌體的抽提;如果需要進(jìn)行細(xì)胞上清外泌體分離,
請(qǐng)選用細(xì)胞培養(yǎng)上清外泌體快速抽提試劑盒。
3、如果想要進(jìn)一步純化外泌體,可以使用相應(yīng)抗體包被的磁珠進(jìn)行親和純化。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
操作方法
樣品預(yù)處理:
1、收集新鮮的樣品,置于冰上待用;若為凍存的樣品,可于冰箱取出后放于25℃水浴中解凍,待*融化后置于冰上待用。
2、取1 mL血清/血液樣品轉(zhuǎn)移至離心管中,4℃,3000×g離心10 min,棄沉淀,并將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中。
3、將轉(zhuǎn)移的上清,4℃,10,000×g離心20 min,棄沉淀,將上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管中。
外泌體分離:
1、向預(yù)處理后的樣品中,加入4倍體積的1×PBS充分混勻。
Serum/Plasma+PBS | 41202-A試劑用量 |
200 μL+800 μL | 200 μL |
1.0 mL+4.0 mL | 1.0 mL |
2、在PBS稀釋后的樣品中,繼續(xù)加入相應(yīng)量的41202-A試劑;蓋緊離心管蓋,渦旋振蕩1 min,放置于4℃冰箱靜置2 h。
3、取出裝有混合液的離心管,4℃,10,000×g離心60 min,棄上清(盡可能吸凈上清液),收集富含外泌體的沉淀。
4、吸取一定量體積的1×PBS溶液均勻吹打離心沉淀物,待其充分懸浮于PBS后,將懸液轉(zhuǎn)移至新的1.5 mL離心管中。
注:加入PBS的量,建議根據(jù)初始樣本的體積決定,初始樣本體積:1×PBS體積=2.5:1。
5、將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃,12,000×g離心2 min,棄沉淀,保留上清液,該上清液即富含外泌體顆粒的溶液。
注:此時(shí)如果依然可以看到明顯的沉淀,建議重復(fù)步驟4,重新進(jìn)行洗滌和沉淀。
6、純化后的外泌體可于4℃保存3天,-80℃ 長(zhǎng)期保存,建議對(duì)外泌體進(jìn)行分裝后保存,避免反復(fù)凍融。
外泌體純化(可選):
鑒于血清/血漿中雜蛋白較多,如果后續(xù)需要進(jìn)行細(xì)胞共培養(yǎng)或者高通量測(cè)序,建議進(jìn)行進(jìn)一步純化??梢允褂妹芾聿?00kD的孔徑的超濾管于4℃以14,000×g離心10-30 min,內(nèi)管中即為純化后的外泌體顆粒;除此之外,還可以使用抗體包被的磁珠進(jìn)行親和純化。
外泌體除菌(可選):
獲得的外泌體后期需要與細(xì)胞共培養(yǎng),可以使用0.22 μm的濾器進(jìn)行過(guò)濾除菌。初次嘗試時(shí),外泌體濃度在10-100 μg/mL內(nèi)做梯度摸索,選擇一個(gè)較為合適的條件。
效果展示
NTA粒徑檢測(cè):結(jié)果顯示通過(guò)Yeasen外泌體抽提獲得的外泌體分散性好,大小均一,峰形單一。 | |
|
樣品來(lái)源:血液 檢測(cè)儀器:ZetaView 上清用量:200μL |
表面標(biāo)志物分析:通過(guò)Western Blot分析外泌體表面蛋白,可以很好的檢測(cè)到TSG101,CD63和MHCC的存在。 | |
樣品來(lái)源:血液 裂解方式:RIPA裂解液 樣品用量:200 μL | |
核酸分析:通過(guò)Agilent 4200分析,可以檢測(cè)到較為明顯的外泌體小RNA條帶,足以滿足下游高通量測(cè)序的需求。 | |
樣品來(lái)源:血液 檢測(cè)儀器:Agilent 4200 抽提方法:Trizol 樣品用量:0.6 mL |
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外泌體分離 | 41201ES25/50 | HieffTM Quick exosome isolation kit(for Cell Culture Media) 細(xì)胞培養(yǎng)上清外泌體快速抽提試劑盒 | 25 mL/50 mL | 1500.00/2700.00 |
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36232ES10 | Precast Protein Improve Gels, 8%, 10 wells 8% 高分辨率梯度預(yù)制膠,10孔 | 1盒(10塊) | 378.00 | |
36233ES10 | Precast Protein Improve Gels, 10%, 10 wells 10%高分辨率梯度預(yù)制膠,10孔 | 1盒(10塊) | 378.00 | |
36234ES10 | Precast Protein Improve Gels, 12%, 10 wells 12%高分辨率梯度預(yù)制膠,10孔 | 1盒(10塊) | 236.00 | |
36235ES10 | Precast Protein Improve Gels, 15%, 10 wells 15%高分辨率梯度預(yù)制膠,10孔 | 1盒(10塊) | 378.00 | |
20351ES76 | GoldBand 3-color Regular Range Protein Marker(10-180kDa) 三色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn) | 2×250 μL | 676.00 | |
20352ES76 | GoldBand 3-color High Range Protein Marker(10-245kDa) 三色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn) | 2×250 μL | 786.00 | |
外泌體標(biāo)記 | 40726ES10 | DiI (DiIC18(3)) 細(xì)胞膜橙紅色熒光探針 | 10 mg | 398.00 |
40757ES25 | DiR Iodide (DiIC18(7)) 細(xì)胞膜深紅色熒光探針 | 25 mg | 988.00 |