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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·12年
5× Hieff CanacePCR Master Mix高保真pcr預(yù)混液
| 參考價(jià): | ￥ 1215 |
| 訂貨量: | 1 件 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 5× Hieff Canace 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：619更新時(shí)間：2023-02-22 16:47:43
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1 mL |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 10137ES03 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 高通量測(cè)序領(lǐng)域中多重PCR文庫構(gòu)建 |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
5× Hieff Canace® PCR Master Mix高保真pcr預(yù)混液（for Multiplex PCR) | 10137ES03 | 1 mL | 1215.00 |
10137ES08 | 5×1 mL | 3065.00 | |
10137ES25 | 25×1 mL | 11165.00 | |
10137ES76 | 500 mL | 178655.00 |
產(chǎn)品描述
5× Hieff Canace® PCR Master Mix高保真pcr預(yù)混液 (for Multiplex PCR)是基于新一代高保真DNA聚合酶Canace開發(fā)的，針對(duì)于高通量測(cè)序領(lǐng)域中多重PCR文庫構(gòu)建應(yīng)用專門優(yōu)化的。Canace酶基于Pyrococcus furiosis DNA Polymerase，經(jīng)基因工程改造而成。其蛋白結(jié)構(gòu)包含5’→3’聚合酶結(jié)構(gòu)域和經(jīng)過改造的3’→5’外切酶結(jié)構(gòu)域。這種組合大幅度提升了酶的耐熱性，保真性。耐熱溫度達(dá)到98℃，保真性是Taq DNA聚合酶的52倍，普通Pfu DNA聚合酶的6倍。酶溶液中添加了*的延伸因子，擴(kuò)增速度達(dá)到15 sec/kb。本產(chǎn)品為5×mix PCR混合液，可添加的模板、引物體積范圍大，使您的實(shí)驗(yàn)更加靈活（本公司另有2×mix可供選擇，Cat.10138）。
產(chǎn)品應(yīng)用
多重PCR文庫構(gòu)建。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存。有效期2年。
注意事項(xiàng)
1.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
2.值得注意的是，多重PCR建庫實(shí)驗(yàn)本身具有一定的難度，通常需要進(jìn)行優(yōu)化，如您在使用本產(chǎn)品時(shí)遇到困難，可聯(lián)系我們的技術(shù)支持，我們有多重優(yōu)化方案，可幫助您更好的構(gòu)建實(shí)驗(yàn)體系。
3.本產(chǎn)品僅作科研用途！
PCR反應(yīng)體系（推薦冰上配制）
組分 | 體積 μL |
ddH2O | to 50 |
DNA模板 | X |
Primer mix (X μM) | X |
5×Hieff Canace® PCR Master Mix (for Multiplex PCR) | 10 |
【注】：
1）試劑使用：使用前要充分解凍混勻。
2）引物與模板：第一輪多重PCR進(jìn)行target enrichment，其中的引物和模板條件需要自行摸索。
第二輪多重PCR引物的濃度建議使用：10 μM引物 加2 μL左右。
第一輪PCR擴(kuò)增程序：
循環(huán)步驟 | 溫度（℃） | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 98℃ | 3 min | 1 |
變性 | 98℃ | 20 sec | 15-45 |
退火/延伸 | 60℃ | 4-10 min | |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
【注】：
在PCR儀上設(shè)置上表中的反應(yīng)程序進(jìn)行多重PCR反應(yīng)（設(shè)置熱蓋溫度至105℃左右）。
退火/延伸時(shí)間：100重PCR推薦4 min；1000重推薦8-10 min需要自己根據(jù)引物情況摸索。
PCR產(chǎn)物磁珠純化
建議在50 μL 反應(yīng)體系中加45 μL磁珠（Cat:12601）進(jìn)行產(chǎn)物純化。
第二輪PCR擴(kuò)增程序：
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 98℃ | 30 sec | 1 |
變性 | 98℃ | 15 sec | 25-35（可自行優(yōu)化） |
退火 | 60℃ | 30 sec | |
延伸 | 72℃ | 1 min | |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
【注】：退火溫度和時(shí)間：推薦使用60℃，也可根據(jù)需要，設(shè)立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度。推薦退火時(shí)間設(shè)置為30 sec，可以在10-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié)。退火時(shí)間太長(zhǎng)可能導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物在膠上呈彌散狀。
PCR產(chǎn)物磁珠純化
建議在50 μL 反應(yīng)體系中加45 μL磁珠（Cat:12601）進(jìn)行產(chǎn)物純化。
HB210831
