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Hieff Canace® II Uracil DNA Polymerase
參考價: 393
訂貨量: 1
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 產(chǎn)品型號
  • Yeasen/翌圣生物 品牌
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地

訪問次數(shù):478更新時間:2023-02-22 16:39:27

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網(wǎng)址:
www.yeasen.com

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產(chǎn)品簡介
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100 U
貨號 10144ES60 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 使用含dUTP的引物進(jìn)行高保真文庫擴(kuò)增
Hieff Canace® II Uracil DNA Polymerase是一種基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代高保真DNA聚合酶,和Pfu DNA Polymerase相比,Hieff Canace® II Uracil High-Fidelity DNA polymerase的性能得到大幅度提升,針對復(fù)雜的模板也能快速準(zhǔn)確的完成PCR反應(yīng)。
產(chǎn)品介紹
  • 產(chǎn)品信息

    產(chǎn)品名稱          

    產(chǎn)品編號

    規(guī)格

    價格(元)

    Hieff Canace® II Uracil DNA Polymerase

    10144ES60

    100 U

    393.00

    10144ES76

    500 U

    1993.00


    產(chǎn)品描述

    Hieff Canace® II Uracil DNA Polymerase是一種基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代高保真DNA聚合酶,和Pfu DNA Polymerase相比,Hieff Canace® II Uracil High-Fidelity DNA polymerase的性能得到大幅度提升,針對復(fù)雜的模板也能快速準(zhǔn)確的完成PCR反應(yīng)。其保真性是Taq DNA Polymerase的52倍,是Pfu DNA Polymerase的6倍,且*克服了常規(guī)高保真酶無法以dUTP為原料進(jìn)行聚合反應(yīng)、無法使用含有dUTP的擴(kuò)增引物以及無法使用含有dUTP的DNA作為擴(kuò)增模板等諸多弊病。本產(chǎn)品配備了優(yōu)化后的酶緩沖液,添加了PCR增強(qiáng)組分,使得該酶具有*的擴(kuò)增效率和廣泛的模板適應(yīng)性,非常適合復(fù)雜模板的擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物為平末端。


    產(chǎn)品組分


    編號

    組分

    規(guī)格

    10144ES60(100U)

    10144ES76(500U)

    10144-A

    Hieff Canace®   II Uracil High-Fidelity DNA Polymerase(1 U/μL)

    100 μL

    500 μL

    10144-B

    2×Canace® II Uracil PCR buffer(含Mg2+,dNTPs)

    1 mL×3

    1 mL×15


    運(yùn)輸和保存方法

    冰袋運(yùn)輸。

    -20℃保存。有效期一年。


    產(chǎn)品應(yīng)用

    使用含dUTP的引物進(jìn)行高保真文庫擴(kuò)增

    使用含dUTP的模板進(jìn)行高保真文庫擴(kuò)增

    使用含dUTP的dNTP進(jìn)行高保真文庫擴(kuò)增


    注意事項(xiàng)

    1) 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
    2) 本產(chǎn)品僅作科研用途!


    使用方法

    Hieff Canace® II Uracil High-Fidelity DNA polymerase與常規(guī)高保真酶的使用方法略有不同。在使用前,請務(wù)必仔細(xì)閱讀使用說明。


    1. 推薦反應(yīng)體系

    所有操作應(yīng)于冰上進(jìn)行,2×Canace® II Uracil PCR buffer解凍后請充分混勻。體系配置之前請預(yù)熱PCR儀,各組分添加完成之后用移液器吸打充分混勻并短暫離心至管底,然后置于預(yù)熱的PCR儀中進(jìn)行反應(yīng)。所有組份使用完畢之后及時放回-20℃保存。


                      表1 PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系  

    組分

    體積

    模板或接頭連接產(chǎn)物

    X µL

    2×Canace® II Uracil PCR buffer

    25 µL

    正向引物 (10-25 μM)

    1-2.5 µL

    反向引物 (10-25 μM)

    1-2.5 µL

    Hieff Canace® II Uracil High-Fidelity DNA polymerase(1 U/µL)

    1 µL

    ddH2O

    Total to 50 µL

    【注】:

    1)試劑使用:使用前要充分解凍混勻。

    2)模板:使用純化后的高質(zhì)量DNA模板可以顯著提高擴(kuò)增效率和成功率;
    3)dNTP:推薦dNTP使用終濃度為200 μM。試劑盒中提供的dNTP中不含dUTP,如特殊情況下需要制備含dUTP的模板,可自行額外添加dUTP至終濃度為400 μM。
    4)聚合酶濃度:推薦使用1 U/50 μL??梢栽?.5-2 U/50 μL之間進(jìn)行優(yōu)化,請勿超過2 U/50 μL。為了防止聚合酶因3’→5’外切酶活性降解引物,建議將聚合酶在最后一步加到反應(yīng)體系中。

    5)Mg2+終濃度:體系終濃度為2 mM。如有特殊需要,可向我公司咨詢,要求提供低Mg2+濃度或不含Mg2+的buffer。


    2.推薦反應(yīng)程序

                  表2 PCR擴(kuò)增反應(yīng)程序

    步驟

    溫度

    時間

    循環(huán)數(shù)

    預(yù)變性

    98°C

    1 min

    1

    變性

    98°C

    10 sec

    1~15(根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求)

    退火

    60°C

    30 sec

    延伸

    72°C

    30 sec

    終延伸

    72°C

    5 min

    1

    Hold

    4°C

    -

    -

    【注】:

    1)預(yù)變性溫度和時間:推薦使用98℃。預(yù)變性推薦時間:質(zhì)粒DNA等簡單模板為30 sec;文庫為1 min;cDNA、基因組DNA等復(fù)雜模板為3 min;高GC含量模板為5-10 min;

    2)退火溫度和時間:推薦使用60℃,也可根據(jù)需要,設(shè)立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度。推薦退火時間設(shè)置為20 sec,可以在10-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié)。退火時間太長可能導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物在膠上呈彌散狀;

    3)延伸溫度和時間:推薦使用72℃。延伸時間根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行調(diào)整;

    相關(guān)產(chǎn)品

    產(chǎn)品名稱

    產(chǎn)品貨號

    規(guī)格

    價格(元)

    Hieff Canace®   High-Fidelity DNA polymerase

    10135ES60/76/80

    100/500/1000 U

    626/2356/4256

    Hieff Canace®   II High-Fidelity DNA polymerase

    10140ES60/76

    100/500 U

    653/2453

    HB210928




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