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參考價: | 面議 |
- 40776ES50 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):961更新時間:2022-04-08 15:45:49
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50Ug |
---|---|---|---|
貨號 | 40776ES50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
Rhod-2, AM,Cell Permeable 細胞可滲透鈣離子熒光探針
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Rhod-2, AM,Cell Permeable Rhod-2, AM鈣離子探針 | 40776ES50 | 50 μg | 368.00 |
Rhod-2, AM,Cell Permeable Rhod-2, AM鈣離子探針 | 40776ES72 | 5×50 μg | 1288.00 |
Rhod-2, AM,Cell Permeable Rhod-2, AM鈣離子探針 | 40776ES80 | 1 mg | 4218.00 |
產(chǎn)品描述
Rhod-2是一種可見光激發(fā)的高親和力Ca2+指示劑,與其他可見光激發(fā)熒光探針如Fluo-3/4相比,Rhod-2具有長波長,更適用于檢測具有較高自熒光現(xiàn)象的細胞和組織內(nèi)鈣離子水平以及檢測由光感受器和籠鎖鈣離子螯合劑光激活導(dǎo)致的鈣離子釋放。
與紫外光激發(fā)的熒光探針相比,如Fura-2和Indo-1,可見光激發(fā)Ca2+探針具有以下特點:1)可被大多數(shù)設(shè)備的激發(fā)器有效激發(fā),包括共聚焦激發(fā)掃描顯微鏡以及流式細胞儀等。2)具有更強的染料吸收性能,使得更低濃度的探針即可成功檢測Ca2+變化,從而降低了對活細胞的光毒性。3)Ca2+依賴性熒光強度增強,對Ca2+變化水平檢測敏感度更高。4)降低樣品自熒光以及光散射的干擾。5)兼容光激活探針以及UV-激發(fā)試劑,因此更方便于多參數(shù)檢測。5)無光譜偏移。
產(chǎn)品性質(zhì)
CAS號(CAS NO.) | 129787-64-0 |
分子式(Formula) | C52H59N4O19Br |
分子量(Molecular Weight) | 1123.9575 |
Ex/Em | 549/ 578 nm |
溶解性(Solubility) | 溶于DMSO |
結(jié)構(gòu)式(Structure) |
|
運輸和保存方法
冰袋運輸。-20℃避光干燥保存,有效期6個月。
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
需要試劑準備
1) (可選)配制Pluronic F-127母液:100 mg Pluronic F-127粉末(Cat No. 60318ES60)中加入0.5 mL DMSO,配制成20%(w/v)的DMSO母液。溶解過程需要在40-50℃加熱20-30 min。溶液室溫保存,不要冷藏。如果有結(jié)晶析出,可以重新加熱后溶解,不影響使用。
2)Hanks•balanced salt solution
使用方法(本實驗方案僅供參考,為得到實驗結(jié)果,需根據(jù)具體的實驗情況優(yōu)化實驗條件。)
1)Rhod-2/AM儲存液的配制
利用高質(zhì)量無水DMSO溶解Rhod-2/AM配制成2-5 mM的儲存液,該儲存液可分裝于-20℃避光干燥密封保存。每次使用前需回溫至室溫。
【注】:① 因為Rhod-2/AM在水中的溶解性和穩(wěn)定性較差,不可用水溶性緩沖液配制Rhod-2/AM儲存液。
② 溶解用的DMSO需要保證新鮮無水,否則將會導(dǎo)致AM 體水解,使熒光染料無法進入細胞,影響實驗效果。
2)Rhod-2/AM工作液的配制
利用合適緩沖液(如Hanks & Hepes )將Rhod-2/AM稀釋成1-10 μM的工作液,具體稀釋方法如1 mM母液配制1 mL濃度為4 µM工作液,用1 mL 緩沖液稀釋4 µl 1mM母液即可,混勻。
【注】:① 典型工作液濃度為0.1-5μM,對于大多數(shù)細胞,我們推薦加載濃度4-5 μM,具體的使用濃度需根據(jù)實驗要求進行優(yōu)化。為了避免過度加載造成細胞毒性,建議在取得有效結(jié)果的基礎(chǔ)上盡量使用低探針濃度。
② Rhod-2/AM工作液需現(xiàn)配現(xiàn)用,避免反復(fù)凍存。
3)(可選)如果Rhod-2/AM進入細胞的效果不好,可向 Rhod-2/AM/DMSO 儲存液中加入適量20% Pluronic F127溶液,終稀釋至其終濃度為0.02-0.05%,Pluronic F127 可以防止 Rhod-2/AM在緩沖液中聚合并能幫助其進入細胞。
【注】:Pluronic F127可降低Rhod-2/AM的穩(wěn)定性,因此只建議在配制工作液時加入,不建議將其加入儲存液長期保存。
4)取出預(yù)培養(yǎng)的細胞,除去培養(yǎng)基,使用緩沖液洗滌細胞3次。
【注】:如果使用含血清的培養(yǎng)基,血清中的酯酶會分解 AM 體,從而降低Rhod-2/AM進入細胞的效果。另外含有酚紅的培養(yǎng)基會使本底值略微偏高,所以加工作液之前需盡量去除培養(yǎng)基殘留。
5)將 Rhod-2/AM工作液加入細胞,加入量以覆蓋細胞為準。在37℃培養(yǎng)15-60 min,然后除去Rhod-2/AM工作液。
【注】:關(guān)于孵育的時間,如果*做實驗不能確定,建議先孵育30 min,看熒光效果:如果細胞死亡較多,適當縮短時間;如果熒光強度太弱,適當延長時間。
6)用不含探針緩沖液洗滌細胞 3 次,以充分去除殘留的Rhod-2/AM工作液。然后加入緩沖液覆蓋細胞。
7)37℃培養(yǎng)箱孵育約 20-30 min,以確保 AM 體在細胞內(nèi)的*去酯化作用。
8)流式細胞儀檢測細胞。
【注】:① 某些細胞會將熒光探針被動運輸或分泌到胞外,在一些通過陰離子泵泄漏探針的細胞內(nèi)該現(xiàn)象尤其嚴重,此時需加入一些抑制劑防止該情況的發(fā)生,如加入適量的丙磺舒或磺吡酮。但需注意,抑制劑的加入量必須經(jīng)過優(yōu)化,過量的抑制劑也會對細胞造成不利影響。
② 某些細胞具有自體熒光會影響結(jié)果分析,需使用未加載探針細胞做對照,在結(jié)果分析時在同一波長下扣除自熒光。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Fura-2, AM, Cell Permeant 細胞膜可滲透鈣離子熒光探針 | 40702ES50 | 50 μg | 226.00 |
Fluo-3, AM, Cell Permeant 細胞膜可滲透鈣離子熒光探針 | 40703ES50 | 50 μg | 276.00 |
Fluo-4, AM, Cell Permeant 細胞膜可滲透鈣離子熒光探針 | 40704ES50 | 50 μg | 276.00 |
Indo-1, AM,Cell Permeable 細胞可滲透鈣離子熒光探針 | 40775ES50 | 50 μg | 248.00 |
Rhod-2, AM,Cell Permeable 細胞可滲透鈣離子熒光探針 | 40776ES50 | 50 μg | 368.00 |
HB190625