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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級會(huì)員·13年
10617ES97T7 RNA聚合酶（1 KU/μL）
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 10617ES97 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：354更新時(shí)間：2022-03-22 15:16:47
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- 網(wǎng)址：
- www.yeasen.com
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50 KU |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 10617ES97 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
T7 RNA polymerase (1 KU/μL)T7 RNA聚合酶 | 10617ES92 | 10 KU | 972.00 |
10617ES97 | 50 KU | 3832.00 | |
10617ES98 | 500 KU | 36592.00 |
產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品是大腸桿菌重組表達(dá)來源的噬菌體T7 RNA聚合酶，以含有T7啟動(dòng)子序列（5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’）的雙鏈DNA為模板，以NTP為底物，合成與啟動(dòng)子下游的反向單鏈DNA互補(bǔ)的RNA。雙鏈線性平末端或5’突出末端DNA均可作為T7 RNA聚合酶的底物模板，因此線性質(zhì)粒、PCR產(chǎn)物均可用作體外合成RNA的模板。
注：G*為RNA轉(zhuǎn)錄的第一個(gè)堿基。
產(chǎn)品組分
編號 | 組分 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | ||
10617ES92(10 KU) | 10617ES97(50 KU) | 10617ES98(500 KU) | ||
10617-A | T7 RNA polymerase (1 KU/μL) | 10 μL | 50 μL | 500 μL |
10617-B | 10×Transcription Buffer | 100 μL | 500 μL | 1 mL×5 |
注：10×Transcription Buffer中含60 mM MgCl2和100 mM DTT，但不含有NTP，如需請購買本公司NTP set solution 10133。
產(chǎn)品應(yīng)用
1. 單鏈 RNA合成（包括mRNA，siRNA，gRNA等各類RNA前體，以及同位素標(biāo)記或非同位素標(biāo)記的RNA探針）
2. 以（Cap analog）為引物合成Capped mRNA
酶活定義
在 37℃、pH8.0 的條件下，1小時(shí)內(nèi)使 1 nmol 的 [3H] GMP 摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位。
運(yùn)輸儲(chǔ)存方法
干冰運(yùn)輸。-20℃保存，有效期一年。
質(zhì)量控制
核酸外切酶殘留檢測：100 U 本品和 0.5 μg λDNA-Hind Ⅲ，37℃下孵育 4 h，DNA 的電泳譜帶無變化。
切口酶殘留檢測：100 U 本品和 0.5 μg IL23R 質(zhì)粒，37℃下孵育 4 h，DNA 的電泳譜帶無變化。
Rnase 殘留檢測：100 U 本品和 0.5 μg 293T 細(xì)胞總 RNA，37℃下孵育 4 h，RNA 的電泳譜帶無變化。
注意事項(xiàng)
1. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2. 本產(chǎn)品僅作科研用途！
應(yīng)用實(shí)例
1、按下列體系配制反應(yīng)體系
組分 | 體積（μL） | 終濃度 |
10×Transcription Buffer (Mg2+ Plus) | 2 | 1× |
CTP / GTP/ ATP/ UTP (100 mM each) | 0.4 each | 2 mM each |
T7 RNA Polymerase (1 KU/μL) | 0.5-1 | - |
RNase inhibitor (40 U/μL) | 1 | - |
RNase free H2O | Up to 18 | - |
模板DNA | 2 (100 ng-1μg) | - |
【注】：
① DNA模板需要最后加入。由于10×Buffer中含有亞精胺，亞精胺濃度過高會(huì)引起DNA模板沉淀。
② Buffer和水建議放置到室溫，然后開始使用，反應(yīng)于室溫下配制，防止溫度低引起亞精胺沉淀高濃度DNA模板。
③ 若轉(zhuǎn)錄長度< 100 nt，模板投入量可增加至2μg。
④ RNase inhibitor (40 U/μL)請購買本公司產(chǎn)品10603。
⑤ 為了特定區(qū)域的有效轉(zhuǎn)錄，建議在其區(qū)域下游把模板DNA預(yù)先切成平端或5′突出末端。
2、37℃反應(yīng)1-2個(gè)小時(shí)（若轉(zhuǎn)錄長度≤ 100 nt，增加時(shí)間至4-8h）。
3、反應(yīng)結(jié)束后，使用2U DNaseⅠ（無RNase）37℃ 15分鐘去除DNA模板。
4、轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物純化：體外轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可選用RNA Cleaner磁珠進(jìn)行純化（12602），以去除蛋白、鹽離子和其他雜質(zhì)。也可以采用酚/氯仿純化法（具體操作步驟可聯(lián)系Yeasen索取）。
注意事項(xiàng)
1、DNA模板的種類：推薦使用含T7啟動(dòng)子的線性化質(zhì)粒和PCR產(chǎn)物作為模板。
2、轉(zhuǎn)錄模板的純度會(huì)顯著影響體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。在質(zhì)粒DNA抽提過程中殘留的RNase A會(huì)顯著影響轉(zhuǎn)錄RNA的質(zhì)量。通過酚-氯仿抽提的質(zhì)粒DNA為最佳模板；PCR產(chǎn)物建議采用膠回收純化后使用。
3、在20 μL反應(yīng)體系中加入0.02U熱穩(wěn)定無機(jī)焦磷酸酶可顯著提高轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量。
HB210929
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