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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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HotStart Taq DNA Polymerase,50U/μL
| 參考價: | ￥ 4262 |
| 訂貨量: | 1 件 |
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：404更新時間：2023-02-21 16:35:50
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | 10736ES01 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
Hieff® HotStart Taq DNA Polymerase,50U/μL
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Hieff® HotStart Taq DNA Polymerase, 50 U/μL | 10736ES01 | 100 μL | 4262.00 |
Hieff® HotStart Taq DNA Polymerase, 50 U/μL | 10736ES03 | 1 mL | 31762.00 |
Hieff® HotStart Taq DNA Polymerase, 50 U/μL | 10736ES25 | 25 mL | 詢價 |
產(chǎn)品描述
Hieff® HotStart Taq DNA Polymerase,50U/μL是經(jīng)過配體修飾的熱穩(wěn)定Taq DNA Polymerase，該配體可以隨溫度變化來調(diào)節(jié)DNA聚合酶活性。在室溫下酶活性被*封閉，經(jīng)95℃加熱后活性才被釋放，這樣可防止在樣品準(zhǔn)備及反應(yīng)升溫階段產(chǎn)生非特異擴增和引物二聚體。Hieff® HotStart Taq DNA Polymerase的激活時間只需要2-3 min，兼容現(xiàn)有的PCR程序。
Hieff® HotStart Taq DNA Polymerase的反應(yīng)緩沖液中的組分、濃度都經(jīng)過優(yōu)化，使得引物與模板結(jié)合的嚴(yán)謹性提高，從而///大程度的減少非特異擴增和引物二聚體，非常適合低拷貝模板的擴增。PCR產(chǎn)物3’端帶A，可克隆至T載體。
產(chǎn)品組分
編號 | 組分 | 10736ES01 (5000 U) | 10736ES08 (50000 U) | 10736ES25 (1250 KU) |
10736-A | Hieff® HotStart Taq DNA Polymerase (50 U/μL) | 100 μL | 1 mL | 25 mL |
產(chǎn)品應(yīng)用
低拷貝基因擴增、基因型鑒定、菌落PCR
活性定義
用活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板/引物，74℃ 30 min內(nèi)，攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1個活性單位（U）。
質(zhì)量控制
核酸外切酶殘留檢測：10 U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74℃下孵育1 h，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
核酸內(nèi)切酶殘留檢測：10 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74℃下孵育1 h，DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
大腸桿菌殘留DNA檢測: 50 μL體系中，加入2 U本品，以ddH2O為模板，擴增E.coil 16s rDNA基因。35個循環(huán)后擴增產(chǎn)物進行1% 瓊脂糖凝膠電泳，EB染色，無擴增條帶。
運輸與保存方法
冰袋運輸。-20℃保存。
PCR反應(yīng)體系（50 μL）
組分 | 體積 (μL) | 終濃度 |
ddH2O | to 50 | - |
HS PCR Buffer (with Mg2+)a,c,d | X | 1× |
dNTP Mix (10 mM each) | 1 | 0.2 mM |
模板DNAe | 適量 | - |
引物正向 (10 μM) | 2 | 0.4 μM |
引物反向 (10 μM) | 2 | 0.4 μM |
Hieff® HotStart Taq DNA Polymerase (50 U/μL)b | 0.05 | 2.5 U/50 μL |
【注】：試劑使用：各組分使用前需充分融化混勻。
a）根據(jù)具體的實驗應(yīng)用，需自備相應(yīng)的反應(yīng)Buffer。
b）聚合酶濃度：推薦使用2.5 U/50 μL?？梢栽?.25-5 U/50 μL之間進行優(yōu)化。
c）PCR Enhancer使用：推薦僅當(dāng)擴增片段GC含量>60%且優(yōu)化條件也無法正常擴增時使用。
d）Mg2+終濃度：體系終濃度為2 mM。如有特殊需要，可用25 mM MgCl2，以0.2-0.5 mM為間隔向上摸索。
e）不同模板的推薦使用量（50 μL反應(yīng)體系）：
模板種類 | 模板使用量 |
基因組DNA | 50 ng-200 ng |
質(zhì)粒DNA | 100 pg-20 ng |
cDNA | 1-5 μL (不超過反應(yīng)體系的1/10) |
PCR擴增程序
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
變性 | 95℃ | 30 sec | 35 |
退火 | 50-60℃ | 30 sec | |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | |
終延伸 | 72℃ | 10 min | 1 |
【注】：1）退火溫度和時間：溫度推薦使用50-60℃。退火溫度過低會導(dǎo)致非特異性擴增。引物設(shè)計參考熒光定量引物標(biāo)準(zhǔn)。推薦退火時間設(shè)置為30 sec，可以在10-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié)。退火時間太長可能導(dǎo)致擴增產(chǎn)物在膠上呈彌散狀。也可根據(jù)需要，設(shè)立溫度梯度去摸索引物退火的適溫度和時間。
2）延伸溫度和時間：溫度推薦使用72℃。時間推薦使用30 sec/kb。
3）擴增產(chǎn)物：請將PCR擴增產(chǎn)物放置于-20℃保存，防止DNA發(fā)生降解。
注意事項
1）推薦使用本公司PCR Enhancer（貨號：10117ES），以擴增高GC含量的目的基因。
2）推薦使用本公司Hieff Clone®（貨號：10907ES和10908ES），以進行快速TA克隆。
3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
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HB200522
