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10612ES84UCF.ME mRNA Cap 2氧甲基轉(zhuǎn)移酶GMP級(jí)
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 10612ES84 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：477更新時(shí)間：2022-03-21 16:52:37
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 2000 U |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 10612ES84 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
UCF.METMmRNA Cap 2′-O-Methyltransferase GMP-grade UCF.METMmRNA Cap 2氧甲基轉(zhuǎn)移酶GMP級(jí) | 10612ES84 | 2000 U | 985 |
10612ES92 | 10000 U | 4285 | |
10612ES97 | 50000 U | 18585 |
產(chǎn)品描述
mRNA Cap 2氧甲基轉(zhuǎn)移酶（UCF.METM mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase）是一種來(lái)自于牛痘病毒的重組蛋白。該酶可以在RNA的5′末端緊挨帽結(jié)構(gòu)的第一個(gè)核苷酸的2′-O位置處添加一個(gè)甲基基團(tuán)。該酶利用SAM作為甲基供體來(lái)甲基化加帽RNA，從而形成Cap1結(jié)構(gòu)。Cap1結(jié)構(gòu)能增強(qiáng)mRNA的翻譯效率，因此可有助于改善mRNA轉(zhuǎn)染和顯微注射實(shí)驗(yàn)中的表達(dá)。該酶需要有m7GpppN即7-甲基鳥(niǎo)苷帽結(jié)構(gòu)的RNA作為底物。
本品是按照GMP工藝要求生產(chǎn)，產(chǎn)品以無(wú)菌液體形式提供，可應(yīng)用于體內(nèi)/體外翻譯前mRNA的Cap1加帽反應(yīng)。
產(chǎn)品性質(zhì)
英文名（English Name） | UCF.METM mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase |
來(lái)源（Source） | 重組E.coli |
宿主核酸殘留（Host nucleic acid residue） | <10fg/U |
宿主蛋白殘留（Host protein residue） | <50ppm |
病原體（HBV/ HCV/HIV）檢測(cè) | 無(wú)檢出 |
內(nèi)毒素殘留（Endotoxin residue） | <0.05EU/1000U |
支原體檢測(cè)（Mycoplasma detection） | 無(wú)檢出 |
無(wú)菌檢測(cè)（Sterility testing） | 無(wú)檢出 |
純度（Purity） | ≥95%（SDS-PAGE） |
儲(chǔ)存緩沖液（Storage Buffer） | 20 mM Tris-HCl pH8.0，0.1mM EDTA，1mM DTT，100mM NaCl，50%（v/v）甘油，0.1%（v/v）Trion X-100 |
活性單位定義（Unit Definition） | 一單位（U）定義為：在37℃條件下1h內(nèi)甲基化10pmol的80nt帶帽RNA轉(zhuǎn)錄物所需的酶量。 |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存，有效期1年。推薦分裝凍存，避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品組分
編號(hào) | 組分 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | ||
10612ES84 | 10612ES92 | 10612ES97 | ||
10612 | mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase (50 U/μl) | 40 μl | 200 μl | 1 ml |
使用方法
1、使用RNase-free 水將適量 Capped RNA 稀釋至16μl；
2、將稀釋的RNA 在65℃條件下加熱處理5min，反應(yīng)后冰上放置 5min；
3、按下表（1）配置反應(yīng)體系（適用于10μg以?xún)?nèi)Capped RNA的甲基化反應(yīng)）；
4、37℃條件下孵育1h（對(duì)與目的片段長(zhǎng)度小于200nt RNA，可將孵育時(shí)間增加到2h）；
5、10×Capping Buffer的配置如下：500mM Tris-HCl、pH8.0、50mM KCl、10mM MgCl2、10mM DTT。
表1：20μL反應(yīng)體系配置
體系組分 | 20μl（Total） |
Denatured Capped RNA | 16μl |
10x Capping Reaction Buffer | 2μl |
SAM (4 mM) | 1μl |
mRNA Cap 2′-O-Methyltransferase (50 U/μl) | 1μl |
注意事項(xiàng)
1、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2、用于實(shí)驗(yàn)反應(yīng)的RNA在用之前應(yīng)進(jìn)行純化處理并溶于RNase-free water且溶液中不能含任何的EDTA和鹽離子；
3、反應(yīng)之前推薦65℃加熱5min以去除RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)。如果轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的5′端結(jié)構(gòu)復(fù)雜，可將時(shí)間延長(zhǎng)至10min；
4、SAM試劑在pH 7–8，37°C條件下穩(wěn)定性較差，需要現(xiàn)用現(xiàn)配?？深A(yù)先計(jì)算好所需SAM的用量，在反應(yīng)前將32 mM的儲(chǔ)備液稀釋成4 mM的工作液。為防止SAM降解，工作液應(yīng)保存于冰上。
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