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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·12年
GMP-gradeT7聚合酶 T7 RNA Polymerase （1 KU/μL）
| 參考價(jià): | ￥ 1955 |
| 訂貨量: | 1 件 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- GMP-grade 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：810更新時(shí)間：2023-02-21 16:15:09
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 KU |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 10613ES92 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
T7聚合酶 T7 RNA Polymerase （1 KU/μL）-GMP-grade
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
T7聚合酶 T7 RNA Polymerase （1 KU/μL）GMP-grade | 10613ES92 | 10 KU | 1955 |
10613ES97 | 50 KU | 8655 | |
10613ES98 | 500 KU | 74855 | |
10613ES99 | 5000 KU | 詢價(jià) |
產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品是大腸桿菌重組表達(dá)來(lái)源的噬菌體T7 RNA聚合酶，以含有T7啟動(dòng)子序列（5’-TAATACGACT CACTATAG*-3’）的雙鏈DNA為模板，以NTP為底物，合成與啟動(dòng)子下游的反向單鏈DNA互補(bǔ)的RNA。雙鏈線性平末端或5’突出末端DNA均可作為T7 RNA聚合酶的底物模板，因此線性質(zhì)粒、PCR產(chǎn)物均可用作體外合成RNA的模板。
注：G*為RNA轉(zhuǎn)錄的第一個(gè)堿基。
本品是按照GMP工藝要求生產(chǎn)，產(chǎn)品以無(wú)菌液體形式提供。
產(chǎn)品性質(zhì)
來(lái)源（Source） | 重組E. coli |
最適溫度（Optimum Temperature） | 37℃ |
宿主核酸殘留（Host nucleic acid residue） | <10 fg/U |
宿主蛋白殘留（Host protein residue） | <50 ppm |
病原體（HBV/ HCV/HIV）檢測(cè) | 無(wú)檢出 |
RNA酶殘留（RNase residue） | 陰性 |
內(nèi)毒素殘留（Endotoxin residue） | <0.05EU/1000U |
支原體檢測(cè)（Mycoplasma detection） | 無(wú)檢出 |
無(wú)菌檢測(cè)（Sterility testing） | 無(wú)檢出 |
儲(chǔ)存緩沖液（Storage Buffer） | 50 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, 10 mM DTT, 100 mM NaCl, 0.1% Triton X-100，50%（v/v）甘油，pH7.9@25℃ |
活性單位定義（Unit Definition） | 在 37℃、pH8.0 的條件下，1 h內(nèi)使 1 nmol 的 [3H] GMP 摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位。 |
注：具體產(chǎn)品質(zhì)檢數(shù)據(jù)及更多指標(biāo)請(qǐng)查看批次質(zhì)檢報(bào)告
產(chǎn)品組分
編號(hào) | 組分 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | |||
10613ES92 (10 KU) | 10613ES97 (50 KU) | 10613ES98 (500 KU) | 10613ES99 (5000 KU) | ||
10613-A | T7 RNA polymerase (1 KU/μL) | 10 μL | 50 μL | 500 μL | 5 mL |
10613-B | 10×Transcription Buffer | 100 μL | 500 μL | 1 mL×5 | 10 mL×5 |
注：10×Transcription Buffer中含60 mM MgCl2和100 mM DTT，但不含有NTP，如需請(qǐng)購(gòu)買本公司NTP set solution 10133。
產(chǎn)品應(yīng)用
1. 單鏈 RNA合成（包括mRNA，siRNA，gRNA等各類RNA前體，以及同位素標(biāo)記或非同位素標(biāo)記的RNA探針）
2. 以（Cap analog）為引物合成Capped mRNA
運(yùn)輸和保存方法
干冰運(yùn)輸。-20℃保存，有效期一年。
應(yīng)用實(shí)例
1、按下列體系配制反應(yīng)體系
【注】：
①. DNA模板需要最后加入。由于10×Buffer中含有亞精胺，亞精胺濃度過(guò)高會(huì)引起DNA模板沉淀。
②. Buffer和水建議放置到室溫，然后開(kāi)始使用，反應(yīng)于室溫下配制，防止溫度低引起亞精胺沉淀高濃度DNA模板。
③.若轉(zhuǎn)錄長(zhǎng)度< 100 nt，模板投入量可增加至2 μg。
④. RNase inhibitor (40 U/μL)請(qǐng)購(gòu)買本公司產(chǎn)品10603。
⑤.為了特定區(qū)域的有效轉(zhuǎn)錄，建議在其區(qū)域下游把模板DNA預(yù)先切成平端或5′突出末端。
2、37℃反應(yīng)1-2 h（若轉(zhuǎn)錄長(zhǎng)度≤ 100 nt，增加時(shí)間至4-8 h）。
3、反應(yīng)結(jié)束后，使用2 U DNaseⅠ（無(wú)RNase）37℃、15 min去除DNA模板。
4、轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物純化：體外轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可選用RNA Cleaner磁珠進(jìn)行純化（12602），以去除蛋白、鹽離子和其他雜質(zhì)。也可以采用酚/氯仿純化法（具體操作步驟可聯(lián)系Yeasen索取）。
注意事項(xiàng)
1、DNA模板的種類：推薦使用含T7啟動(dòng)子的線性化質(zhì)粒和PCR產(chǎn)物作為模板。
2、轉(zhuǎn)錄模板的純度會(huì)顯著影響體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。在質(zhì)粒DNA抽提過(guò)程中殘留的RNase A會(huì)顯著影響轉(zhuǎn)錄RNA的質(zhì)量。通過(guò)酚-氯仿抽提的質(zhì)粒DNA為最佳模板；PCR產(chǎn)物建議采用膠回收純化后使用。
3、在20 μL反應(yīng)體系中加入0.02 U熱穩(wěn)定無(wú)機(jī)焦磷酸酶可顯著提高轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量。
4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
HB211021
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