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參考價: | 面議 |
- 12607ES08 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):256更新時間:2022-02-10 10:22:04
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- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 8T |
---|---|---|---|
貨號 | 12607ES08 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module 快速DNA連接模塊 | 12607ES08 | 8T | 1283.00 |
12607ES24 | 24T | 2933.00 | |
12607ES96 | 96T | 9773.00 |
產(chǎn)品描述
Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module是針對Illumina®高通量測序平臺文庫構(gòu)建專業(yè)設(shè)計的DNA連接模塊。本產(chǎn)品可在雙鏈平末端DNA////片段或雙鏈3′-dA DNA////片段的兩端連接Illumina®測序平臺適用的DNA接頭,具有連接效率高、簡便、可實現(xiàn)自動化等優(yōu)勢。本產(chǎn)品已與Hieff NGS® End Repair/dA-Tailing Module(Cat#12608),2×Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity Mix for Library Amplification(Cat#12621)共同用于DNA文庫構(gòu)建,通過Illumina®高通量平臺測序驗證其有效性。本產(chǎn)品中提供的所有試劑組分,都經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量與功能驗證,最高程度保障產(chǎn)品優(yōu)異性能與批間穩(wěn)定性。
產(chǎn)品組分
產(chǎn)品編號 | 組分名稱 | 規(guī)格 | |
12607ES24 | 12607ES96 | ||
12607-A | Fast-Pace T4 DNA Ligase | 120 μL | 480 μL |
12607-B | 5×Fast-Pace Ligation Buffer | 480 μL | 960×2 μL |
測序驗證
本品與Hieff NGS® End Repair/dA-Tailing Module(Cat#12608),2×Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity Mix for Library Amplification(Cat#12621)共同用于DNA文庫構(gòu)建,通過Illumina®高通量平臺測序驗證其有效性。
運輸與保存方法
冰袋運輸。
-20℃保存,效期一年。
注意事項
1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2)本產(chǎn)品僅作科研用途!
使用方法
1. Adapter的質(zhì)量和使用濃度直接影響連接效率及文庫產(chǎn)量。Adapter用量過高可能會產(chǎn)生較多Adapter Dimer;用量較低可能會影響連接效率及文庫產(chǎn)量。表1列舉了使用本試劑盒,不同Input DNA量推薦的Adapter使用量。
表1.500 pg-1 μg Input DNA推薦的Adapter使用濃度
Input DNA | Adapter : Input DNA摩爾比 | Input DNA | Adapter : Input DNA摩爾比 |
500 ng | 20:1 | 25 ng | 200:1 |
250 ng | 40:1 | 10 ng | 200:1 |
100 ng | 100:1 | 1 ng | 200:1 |
50 ng | 100:1 | 500 pg | 400:1 |
【注】:Input DNA摩爾數(shù)(pmol)≈ Input DNA質(zhì)量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均長度(bp)]。
2. 目前主流的合并法DNA建庫試劑盒,其末端修復(fù)和加A處理后一般不純化,直接進行接頭連接。本試劑盒可與主流的商業(yè)化末端修復(fù)加A體系兼容,進行接頭連接。反應(yīng)體系請參考如下配制,并渦旋混勻幾秒鐘,瞬離后至于20℃,反應(yīng)15分鐘即可。
表2.Adapter Ligation體系
名稱 | 體積(μL) |
dA-tailed DNA | 60 |
5×Fast-Pace Ligation Buffer | 20* |
Fast-Pace T4 DNA Ligase | 5 |
DNA Adapter | X** |
dd2O | To 100 |
【注】:*對于Ligation Enhancer,請上下顛倒、振蕩,充分混勻并瞬時后離心使用。
**根據(jù)自身需求加入適量的接頭。
【接頭添加計算舉例】:當(dāng)Input DNA為100 ng,Input DNA長度為300 bp時,接頭應(yīng)該添加多少?
第一步,計算Input DNA摩爾數(shù)。公式:Input DNA摩爾數(shù)(pmol)≈ Input DNA質(zhì)量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均長度(bp)];
Input DNA 摩爾數(shù)(pmol)=100÷(0.66×300)=0.5 pmol;
第二步,計算接頭添加摩爾數(shù)。根據(jù)注意事項三表2查詢接頭添加比例;
根據(jù)表2,查得Input DNA 100ng時接頭添加比例100:1,則接頭添加摩爾數(shù)=100×0.5 pmol=50 pmol;
第三步,計算接頭添加體積。接頭濃度=15 μmol/L(如使用其他接頭,濃度需要依據(jù)其他接頭濃度參數(shù));
接頭添加體積=接頭添加摩爾數(shù)(50 pmol)÷接頭濃度(15 μmol/L)=3.34 μL(注:15 μmol/L=15 pmol/μL)
綜上,接頭可添加3.4 μL,加1.6 μL水補齊至5 μL。(注:接頭最大加入體積不超過5 μL)
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