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- 41204ES10 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):355更新時間:2022-06-01 11:31:00
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- 網(wǎng)址:
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10T |
---|---|---|---|
貨號 | 41204ES10 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | *(元) | 目錄價(元) |
Hieff® Quick exosome isolation kit(for Body Fluids) 體液外泌體快速抽提試劑盒 | 41204ES10 | 10 T | 1055 | 1585 |
41204ES30 | 30 T | 2155 | 3555 |
產(chǎn)品描述
Exosome(外泌體)是由活細胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu);存在于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中;Exosome攜帶有多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息,不僅在細胞與細胞間的物質(zhì)和信息傳遞中起重要作用,更有望成為多種疾病的早期診斷標志物。
本試劑盒采用*的分離技術(shù),可以快速從體液如腦脊液、羊水、唾液、肺泡灌洗液及鼻腔盥洗液等體液中獲得大量完整的外泌體顆粒,適用于下游的細胞共培養(yǎng)、電鏡分析、Western Blot、熒光定量(qPCR)和高通量測序等應(yīng)用。
產(chǎn)品組分
運輸和保存方法
室溫運輸,本試劑盒可于室溫穩(wěn)定保存24個月。
注意事項
1、使用前請將外泌體抽提試劑(41204-A)充分混勻。
2、產(chǎn)品只針對體液樣本,不適用其它血清/血液或者是細胞培養(yǎng)上清中外泌體的抽提;如果需要進行細胞上清外泌體分離,請選用細胞培養(yǎng)上清外泌體快速抽提試劑盒。
3、如果想要進一步純化外泌體,可以使用相應(yīng)抗體包被的磁珠進行親和純化。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5、本產(chǎn)品僅作科研用途!
操作方法
樣品預(yù)處理:
1、收集新鮮的樣品,置于冰上待用;若為凍存的樣品,可于冰箱取出后放于25℃水浴中解凍,待*融化后置于冰上待用。
2、取1 mL(單次樣品量不能低于1 mL)體液樣品轉(zhuǎn)移至離心管中,4℃,3000 × g離心10 min,棄沉淀,并將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管中。
3、將轉(zhuǎn)移的上清,4 ℃,10,000 × g離心20 min,棄沉淀,將上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管中。
外泌體分離:
1、向預(yù)處理后的樣品中,按照下表加入Exosome isolation solution (其他樣品量根據(jù)表中試劑用量進行等比例變換)。
Body Fluids | 41204-A 試劑用量 |
2.0 mL | 0.5 mL |
4.0 mL | 1.0 mL |
2、蓋緊離心管蓋,渦旋振蕩1 min,放置于4℃冰箱靜置2 h。
3、取出裝有混合液的離心管,4℃,10,000×g離心60 min,棄上清(盡可能吸凈上清液),收集富含外泌體的沉淀。
4、吸取一定量體積的1×PBS溶液均勻吹打離心沉淀物,待其充分懸浮于PBS后,將懸液轉(zhuǎn)移至新的1.5 mL離心管中。
【注】加入PBS的量,建議根據(jù)初始樣本的體積決定,初始樣本體積:1×PBS體積=10:1。
5、將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃,12,000×g離心2 min,棄沉淀,保留上清液,該上清液即富含外泌體顆粒的溶液。
【注】此時如果依然可以看到明顯的沉淀,建議重復(fù)步驟5,多次離心至無明顯沉淀。
6、純化后的外泌體可于4℃保存3天,-80℃ 長期保存,建議對外泌體進行分裝后保存,避免反復(fù)凍融。
外泌體純化(可選):
鑒于體液中雜蛋白較多,如果后續(xù)需要進行細胞共培養(yǎng)或者高通量測序,建議進一步純化外泌體。可以使用密理博100kD的孔徑的超濾管于4℃以14,000×g離心10-30 min,內(nèi)管中即為純化后的外泌體顆粒;除此之外,還可以使用抗體包被的磁珠進行親和純化。
外泌體除菌(可選):
獲得的外泌體后期需要與細胞共培養(yǎng),可以使用0.22 μm的濾器進行過濾除菌。初次嘗試時,外泌體濃度在10-100 μg/mL內(nèi)做梯度摸索,選擇一個較為合適的條件。
相關(guān)產(chǎn)品
應(yīng)用 | 貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
外泌體提取 | 41201ES25 | Hieff® Quick exosome isolation kit(for Cell Culture Media) | 25 mL |
41202ES30 | Hieff® Quick exosome isolation kit(for Serum/Plasma) | 20 mL | |
外泌體定量 | 20118ES60 | Lysis Buffer for WB/IP Assays | 100 mL |
20201ES76 | BCA Protein Quantification Kit | 500 T(100 mL) | |
外泌體鑒定 (Western Blot) | 41203ES05 | Exosome identification kit for Western Blot | 5 T |
36232ES10 | Precast Protein Improve Gels,,8%,10 wells | 1盒(10塊) | |
36233ES10 | Precast Protein Improve Gels,,10%,10 wells | 1盒(10塊) | |
36234ES10 | Precast Protein Improve Gels,,12%,10 wells | 1盒(10塊) | |
36235ES10 | Precast Protein Improve Gels,,15%,10 wells | 1盒(10塊) | |
20352ES76 | GoldBand 3-color High Range Protein Marker(10-245kDa) | 2×250 μL | |
外泌體標記 | 40726ES10 | DiI (DiIC18(3)) | 10 mg |
40757ES25 | DiR Iodide (DiIC18(7)) | 25 mg |
HB210915