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參考價(jià): | 面議 |
- 41207ES05 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):344更新時(shí)間:2022-01-28 14:04:19
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- 網(wǎng)址:
- www.yeasen.com
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5T |
---|---|---|---|
貨號 | 41207ES05 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
Hieff® Quick exosome isolation kit Plus (for Urine) 尿液外泌體快速抽提試劑盒Plus | 41207ES05 | 5 T | 1355.00 |
41207ES20 | 20 T | 3755.00 |
產(chǎn)品描述
Exosome(外泌體)是由活細(xì)胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu),存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中。Exosome攜帶有多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息,不僅在細(xì)胞與細(xì)胞間的物質(zhì)和信息傳遞中起重要作用,更有望成為多種疾病的早期診斷標(biāo)志物。
本試劑盒采用*的分離技術(shù),可以快速從尿液中獲得大量完整的外泌體顆粒,適用于下游的細(xì)胞共培養(yǎng)、電鏡分析、Western Blot、熒光定量(qPCR)和高通量測序等應(yīng)用。
產(chǎn)品組分
編號 | 組分 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | |
41207E05 | 41207ES20 | ||
41207-A | Exosome isolation solution(Urine) | 25 mL | 100 mL |
41207-B | Exosome Buffer | 5 mL | 20 mL |
41207-C | 50 mL過濾柱 | 5個(gè) | 20個(gè) |
運(yùn)輸和保存方法
室溫運(yùn)輸,本試劑盒可于室溫穩(wěn)定保存24個(gè)月。
注意事項(xiàng)
1、使用前請將外泌體抽提試劑(41207-A)充分混勻。
2、產(chǎn)品只針對尿液樣本,不適用其它血清/血液或者是細(xì)胞培養(yǎng)上清中外泌體的抽提;如果需要進(jìn)行細(xì)胞上清外泌體分離,請選用細(xì)胞培養(yǎng)上清外泌體快速抽提試劑盒。
3、如果想要進(jìn)一步純化外泌體,可以使用相應(yīng)抗體包被的磁珠進(jìn)行親和純化。
4、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
5、本產(chǎn)品僅作科研用途!
操作方法
樣品預(yù)處理:
1、收集新鮮的樣品,置于冰上待用;若為凍存的樣品,可于冰箱取出后放于25℃水浴中解凍,待*融化后置于冰上待用。
2、取25 mL(單次樣品量不能低于25 mL)體液樣品轉(zhuǎn)移至離心管中,4℃,3000 × g離心10 min,棄沉淀(可多次離心至無明顯沉淀),并將上清轉(zhuǎn)移至過濾柱(41207-B)中。(可多次離心至無明顯沉淀)
3、將過濾柱轉(zhuǎn)移至離心機(jī)中,4℃,3000×g離心10min,取過濾柱收集管中的液體,轉(zhuǎn)移至新管中。
外泌體分離:
1、向預(yù)處理后的樣品中,按照下表加入Exosome isolation solution (其他樣品量根據(jù)表中試劑用量進(jìn)行等比例變換)。
Urine | 41207-A 試劑用量 |
25 mL | 5 mL |
50 mL | 10 mL |
2、蓋緊離心管蓋,渦旋振蕩1 min,放置于4℃冰箱靜置2 h。
3、取出裝有混合液的離心管,4℃,10,000×g離心60 min,棄上清(盡可能吸凈上清液),收集富含外泌體的沉淀。
4、吸取一定量體積的Exosome Buffer溶液均勻吹打離心沉淀物,待其充分懸浮于Exosome Buffer后,將懸液轉(zhuǎn)移至新的1.5 mL離心管中。
【注】加入Exosome Buffer的量,建議根據(jù)初始樣本的體積決定,初始樣本體積:Exosome Buffer體積=50:1。
5、將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃,12,000×g離心5 min,棄沉淀,保留上清液,該上清液即富含外泌體顆粒的溶液。
【注】此時(shí)如果依然可以看到明顯的沉淀,建議重復(fù)步驟5,多次離心至無明顯沉淀。
6)外泌體的保存:純化后的外泌體可于4℃保存3天,分裝后于-80℃ 長期保存,避免反復(fù)凍融。
外泌體除菌(可選):
獲得的外泌體后期需要與細(xì)胞共培養(yǎng),可以使用0.22 μm的濾器進(jìn)行過濾除菌。初次嘗試時(shí),外泌體濃度在10-100 μg/mL內(nèi)做梯度摸索,選擇一個(gè)較為合適的條件。
HB220107