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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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10153ES60Hieff Canace® 高保真DNA聚合酶
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- 10153ES60 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：560更新時間：2024-09-04 17:29:42
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- www.yeasen.com
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100 u |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 10153ES60 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Hieff Canace® 高保真DNA聚合酶 | 10153ES10 | 10 U | 115.00 |
10153ES60 | 100 U | 695.00 | |
10153ES76 | 500 U | 2,585.00 | |
10153ES80 | 1000 U | 4,785.00 |
產(chǎn)品描述
Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase基于Pyrococcus Furiosis DNA Polymerase，經(jīng)基因工程改造而成。該酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性，其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍，是普通Pfu DNA聚合酶的9倍。酶溶液中添加了常溫可抑制聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性的兩種單克隆抗體，可簡便地進行高特異性的Hot Start PCR，極大提高了擴增的檢出率和產(chǎn)物的特異性。酶溶液中添加了延伸因子使得該酶具有長片段擴增能力，擴增目的片段的長度可長達13 kb。本產(chǎn)品配備了優(yōu)化緩沖液，使得該酶適用于復雜模板的擴增。擴增產(chǎn)物為平末端。
產(chǎn)品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | |||
10153ES10 （10 U） | 10153ES60 （100 U） | 10153ES76 （500 U） | 10153ES80 （1000 U） | ||
10153-A | Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase (1 U/μL) | 10 μL | 100 μL | 500 μL | 500 μL×2 |
10153-B | 2×Canace® Plus PCR buffer（含Mg2+，dNTPs） | 300 μL | 3×1 mL | 15×1 mL | 30×1 mL |
10153-C | 6×DNA Loading Buffer | 120 μL | 1.2 mL | 6 ml | 12 ml |
產(chǎn)品應用
基因克??；復雜DNA模板擴增；高通量建庫。
活性定義
用活性化的大馬哈魚DNA為模板/引物，74°C，30 min內(nèi)，攝入10 nmol的全核苷酸為酸性不溶物的活性定義為1 U。
運輸與保存方法
冰袋運輸。-20°C保存。有效期1年。
注意事項
1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
2）本產(chǎn)品僅作科研用途！
推薦PCR反應體系
組分 | 體積 | 終濃度 |
ddH2O | to 50 μL | - |
2×Canace® Plus PCR buffer (含Mg2+，dNTPs) | 25 μL | 1× |
DNA模板 | 適量 | - |
2 μL | 0.4 μM | |
Primer反向 (10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase (1 U/μL) | 1 μL | 1 U/50 μL |
【注】：
1）試劑使用：使用前要充分解凍混勻。
2）Mg2+終濃度：體系終濃度為2mM。如有特殊需要，可用50 mM MgCl2，以0.2-0.5 mM為間隔向上摸索。
3）高GC模板：在體系中加入終濃度為3%的DMSO可能有利于擴增。
4）不同模板的推薦使用量（25 μL反應體系）：
模板種類 | 擴增片段1 kb-10 kb |
基因組DNA | 50 ng-200 ng |
質(zhì)?；虿《綝NA | 10 pg-20 ng |
cDNA | 1-2.5 μL（不超過PCR反應總體積的1/10） |
PCR擴增程序：有以下三種程序可選擇，優(yōu)先選擇兩步法程序。
兩步法程序（優(yōu)先推薦）： 三步法程序（常規(guī)程序）：
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) | 循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) | |
預變性 | 98°C | 3 min | 1 | 預變性a | 98°C | 3 min | 1 | |
變性 | 98°C | 10 sec | 30-35 | 變性 | 98°C | 10 sec | 30-35 | |
延伸 | 68°C | 30 sec/kb | 退火b | 60°C | 20 sec | |||
終延伸 | 72°C | 5 min | 1 | 延伸c | 72°C | 30 sec/kb | ||
終延伸 | 72°C | 5 min | 1 |
梯度溫度退火程序（難擴增基因推薦程序）: *不同擴增程序下的特點：
步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) | 程序類型 | 兩步法 | 三步法 | 梯度退火 | |
預變性 | 98°C | 3 min | 1 | 速度 | 最快 | 中等 | 慢 | |
變性 | 98°C | 10 sec | 15，每個循環(huán)降低1℃ | 特異性 | 高 | 中等 | 高 | |
梯度退火 | 70-55°C | 20 sec | PCR產(chǎn)量 | 中等 | 最高 | 中等 | ||
延伸 | 72°C | 30 sec/kb | 檢出率 | 高 | 中等 | 高 | ||
變性 | 98°C | 10 sec | 20 | |||||
正常退火 | 55°C | 20 sec | ||||||
延伸 | 72°C | 30 sec/kb | ||||||
終延伸 | 72°C | 5 min | 1 | |||||
【注】：
a. 預變性溫度和時間：推薦溫度：98°C，時間：3 min，高GC含量模板5-10 min。
b. 退火溫度和時間：推薦溫度：60°C，也可根據(jù)需要，設立溫度梯度去摸索引物退火的最適溫度。推薦退火時間設置為20 sec，可以在10-30 sec內(nèi)調(diào)節(jié)。退火時間太長可能導致擴增產(chǎn)物在膠上呈彌散狀。
c. 延伸溫度和時間：推薦溫度：72°C。時間：30 sec/kb，復雜模板根據(jù)實際情況可延長至60 sec/kb。
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HB220407
