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產品簡介
| 供貨周期 | 兩周 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè),制藥 |
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產品介紹
產品描述
Agarose 4FF是在Agarose 4B基礎上經過交聯(lián)獲得的空白微球。其化學穩(wěn)定性及物理性能顯著增強，具有高流速、高載量、非特異性吸附低、回收率高、可多次重復使用等特點，可在此基礎上衍生功能基團，也可用于病毒顆粒、大分子蛋白、超螺旋 DNA 等生物大分子物質組分的凝膠過濾。
產品性質
基質 | 4%高交聯(lián)瓊脂糖凝膠 |
分離范圍 | 60 KD-20 MD |
粒徑 | 45-165 µm |
最大耐壓 | 0.3 MPa |
最大流速 | 500 cm/h |
PH穩(wěn)定性 | 2~12 (工作)，1~14 (CIP，短期) |
化學穩(wěn)定性 | 1 M NaOH、8 M尿素、6 M 鹽酸胍、70%乙醇 |
工作溫度 | 4 - 40 ℃ |
耐熱性 | 120℃，pH7 水中，30min |
儲存緩沖液 | 20%乙醇 |
運輸和保存方法
1.使用后的填料應儲存于20%乙醇中，為了防止乙醇揮發(fā)以及微生物生長，建議3個月更換一次新鮮的20%乙醇。
2.放置在4~8℃冷庫中保存效果更好；有效期5年。
注意事項
1.凍結可能破壞介質內部結構。
2.裝柱前最好將介質懸液平衡到室溫。
3.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
4.本產品僅作科研用途！
使用方法
1 生物大分子凝膠過濾
1.1 裝柱
1）將所取凝膠抽干，用初始緩沖液（按凝膠∶緩沖液 = 3∶1 的比例）配成勻漿并脫氣。
2）將層析柱垂直固定，底端用水或緩沖液潤濕并保留1 cm高左右的水柱。
3）用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內，使凝膠在柱內自由沉降，水封層析柱，沉降過夜。
4）連結好柱子頂端活動柱頭，打開蠕動泵，讓緩沖液用使用時操作流速流過 5 柱體積，再使用 1.5 倍的操作流速流過 5 柱體積，調節(jié)適配柱頭，使其盡量貼近膠面，最后用 2~3 倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
1.2 平衡
將平衡緩沖液以操作流速平衡層析柱，觀察檢測器的變化，直到電導、pH 等參數(shù)不變。
1.3 上樣
切換轉換閥進行上樣，上樣量根據(jù)樣品的性質和層析介質的量進行選擇，一般而言，樣品上樣量不超過柱床體積的 25%。根據(jù)分離效果可以適當調整上樣體積。
1.4 洗脫
繼續(xù)用平衡緩沖液沖洗層析柱，收集流出的不同組分，至不再有生物分子流出，至基線平衡。
1.5 再生
用 0.2 mol/L NaOH 或非離子洗滌劑洗 2 個柱體積；接著去離子水沖洗3-5個柱體積。若有失活蛋白質或脂類物質在再生時洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。
1.6 在位清洗
對于強結合蛋白質或脂類物質，可采用以下流程進行在位清洗：1 mol/L NaOH洗2個柱體積，4 mol/L 尿素或 3 mol/L 鹽酸胍洗2個柱體積，70%乙醇或30%異丙醇洗2個柱體積，平衡緩沖液洗2個柱體積。在位清洗可有效去除介質上的雜質，同時介質上的熱源也可基本去除。
2 偶聯(lián)功能基團
選擇合適的偶聯(lián)方法，進行功能配基的偶聯(lián)，需注意微球的化學穩(wěn)定范圍以及耐熱和耐壓等參數(shù)。偶聯(lián)完畢，依據(jù)配基的性質和微球的性質進行使用。
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