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供應(yīng)簡介

REPOTMNFAT慢病毒報告基因是吉滿生物自主研發(fā)的用于檢測NFAT轉(zhuǎn)錄活性水平為目的的報告基因慢病毒顆粒。NFAT（Nuclear factor of activated T-cells）轉(zhuǎn)錄因子家族對細(xì)胞因子基因和其它一些對免疫反應(yīng)很關(guān)鍵的基因轉(zhuǎn)錄中起關(guān)鍵作用。

詳細(xì)介紹

REPO^TMNFA慢病毒報告基因主要用于檢測細(xì)胞中NFAT調(diào)控的信號通路的活性、藥物研究以及基因過表達(dá)和RNAi的表型分析等。

pGMLVNFAT-Lu是在pGMLV-Lu慢病毒載體的多克隆位點插入了多個NFAT結(jié)合位點，可以高靈敏度地檢測NFAT的激活水平。采用慢病毒作為報告基因的優(yōu)點在于它能夠感染多種難感染的細(xì)胞，比如原代細(xì)胞，干細(xì)胞，神經(jīng)元細(xì)胞等。而且慢病毒能夠?qū)⑼庠椿虿迦爰?xì)胞基因組內(nèi)，實現(xiàn)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

質(zhì)粒圖譜：

質(zhì)粒元件信息：

5'LTR	1-635
PBS （primer binding site）	636-653
Ψ （packaging signal）	685-822
RRE （Rev-response element）	1303-1536
cPPT （central polypurine tract）	2028-2151
NFATresponse element	2191-2232
Luciferase	2298-3950
P_PGK（phosphoglycerate kinase promoter）	3980-4488
Puro^r（puromycin resistance gene）	4509-5108
WPRE（woodchuck posttranscriptional regulatory element）	5122-5713
3'LTR	5916-6552
PUC origin of replication	7695-7022
Amp^r	8836-7840

包裝清單：

產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	包裝
GM-022012	REPO^TMNFAT慢病毒報告基因	50ul×4管；1×10e7TU/ml
-	說明書	-

使用說明：

NFAT報告基因慢病毒顆粒采用慢病毒轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染哺乳動物細(xì)胞。用熒光素酶檢測試劑盒或雙熒光素酶檢測試劑盒進(jìn)行檢測。

NFAT的激活劑，可作為NFAT報告基因的陽性對照。

注意事項：

1. 病毒操作時使用生物安全柜，如使用普通超凈工作臺操作病毒，請不要打開風(fēng)機。

2. 病毒操作時請穿實驗服，帶口罩和乳膠手套。

3. 操作病毒時必須特別小心，不要產(chǎn)生氣霧或飛濺。如操作時超凈臺有病毒污染，立即用10%次氯酸鈉溶液搽拭干凈。接觸過病毒的槍頭、離心管和培養(yǎng)板等需用10%次氯酸鈉溶液浸泡1h以上后棄去。

4. 用顯微鏡觀察細(xì)胞感染情況時應(yīng)遵從以下步驟：擰緊培養(yǎng)瓶或蓋緊培養(yǎng)板。用70%乙醇清理培養(yǎng)瓶外壁后到顯微鏡出觀察拍照。離開顯微鏡試驗臺前，用70%乙醇清理實驗臺。

5. 病毒操作完成后，用肥皂清洗雙手。

保存條件：

-80℃保存。（如保存時間過長，使用前請重新檢測病毒滴度）

參考文獻(xiàn)：

[1] Herum KM, Lunde IG, Skrbic B, Florholmen G, Behmen D, Sjaastad I, Carlson CR, Gomez MF, Christensen G.

Syndecan-4 signaling via NFAT regulates extracellular matrix production and cardiac myofibroblast differentiation in response to mechanical stress.

J Mol Cell Cardiol. 2013 Jan;54:73-81. doi: 10.1016/j.yjmcc.2012.11.006. Epub 2012 Nov 22.

[2] Awla D, Zetterqvist AV, Abdulla A, Camello C, Berglund LM, Spégel P, Pozo MJ, Camello PJ, Regnér S, Gomez MF, Thorlacius H.

NFATc3 regulates trypsinogen activation, neutrophil recruitment, and tissue damage in acute pancreatitis in mice.

Gastroenterology. 2012 Nov;143（5）:1352-60.e1-7. doi: 10.1053/j.gastro.2012.07.098. Epub 2012 Jul 27.

[3] Facundo HT, Brainard RE, Watson LJ, Ngoh GA, Hamid T, Prabhu SD, Jones SP

O-GlcNAc signaling is essential for NFAT-mediated transcriptional reprogramming during cardiomyocyte hypertrophy.

Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2012 May 15;302（10）:H2122-30. doi: 10.1152/ajpheart.00775.2011. Epub 2012 Mar 9.

[4] Finsen AV, Lunde IG, Sjaastad I, Østli EK, Lyngra M, Jarstadmarken HO, Hasic A, Nygård S, Wilcox-Adelman SA, Goetinck PF, Lyberg T, Skrbic B, Florholmen G, Tønnessen T, Louch WE, Djurovic S, Carlson CR, Christensen G.

Syndecan-4 is essential for development of concentric myocardial hypertrophy via stretch-induced activation of the calcineurin-NFAT pathway.

PLoS One. 2011;6（12）:e28302. doi: 10.1371/journal.pone.0028302. Epub 2011 Dec 2.

[5] Minematsu H, Shin MJ, Celil Aydemir AB, Kim KO, Nizami SA, Chung GJ, Lee FY.

Nuclear presence of nuclear factor of activated T cells （NFAT） c3 and c4 is required for Toll-like receptor-activated innate inflammatory response of monocytes/macrophages.

Cell Signal. 2011 Nov;23（11）:1785-93. doi: 10.1016/j.cellsig.2011.06.013. Epub 2011 Jun 25.

產(chǎn)品價格：

貨號	名稱	產(chǎn)地	規(guī)格	報價/元
GM-022012	Lentivirus NFAT luciferase reporter 慢病毒報告基因顆粒	Genomeditech	50ul×4管； 1×10e7TU/ml	3200

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